Polimeraza lančana reakcija (PCR) u molekularnoj biologiji naziva se eksperimentalna metoda detekcije virusa. Omogućuje značajno povećanje koncentracije određenih fragmenata nukleinske kiseline (DNA) u uzorcima biološkog materijala, što omogućuje određivanje (prepoznavanje) i brojanje njih.

Analiza se provodi kako slijedi. Genetski materijal (uzorak krvi), koji potencijalno može sadržavati željeni gen, uvede se u ispitnu epruvetu. Tu se također stavljaju primeri - kemijski sintetizirane male duljine željenog gena.

DNA ili RNA polimeraza se također dodaje u posudu, ona je u stanju izgraditi lanac nukleinskih kiselina koja je potpuno identična originalnoj. Skup od četiri slobodna nukleotida, posebni građevinski materijal za RNK ili DNA, od kojih jedan sadrži radioaktivne čestice fosfora, također se uvodi u rezultirajuću kompoziciju.

Rezultirajuća smjesa se zagrijava do 95-96 ° C, zbog čega se oba DNA helicama, koji su isprepleteni u uobičajenom stanju, razotkriveni. Zatim se priprema ohladi, u ovom trenutku početnice se pričvrste na željeno područje genoma virusa, bez da RNA (ili DNA) ponovo stvori dvostruku spiralu.

Tijekom hlađenja, polimeraza traži slobodan lanac nukleotida. Za funkcioniranje ovog enzima potreban je jedan lanac nukleotida. Jer polimeraze klizi duž lanca DNA (kao uže prsten), dvostruke spirale se ne može raditi.

Nakon toga se provodi ponovljeni ciklus grijanja, zbog čega se nukleotidni lanci razdvajaju. Za svaki od ovih ciklusa PCR, količina željenog hepatitisa u uzorku povećava se u geometrijskoj progresiji, a ostatak genetskog materijala linearno se proizvodi.

Nakon pročišćavanja otopine nukleotidnih ostataka i razdvajanja DNA lanaca parametrom molekularne težine iz elektroforeze, lako je odrediti da li željeni gen postoji u testnom uzorku ili ne.

Prednosti PCR

Laboratorijska studija koja koristi PCR metodu omogućuje dobivanje još više informacija nego jednostavno prisutnost RNA virusa. Prilikom određivanja parametra razine radioaktivnog zračenja, moguće je utvrditi koja je količina genetskog materijala u početku sadržana u uzorku koji se razmatra. U slučaju hepatitisa, odredite razinu viralnog opterećenja.

Druga prednost ove metode je vrlo visoka osjetljivost CR reakcije. To je puno veće od klasičnih metoda za otkrivanje virusa. U idealnom slučaju, da bi se identificiralo željeni gen, samo jedan virus u uzorku je dovoljan za PCR.

Osim toga, PCR je potpuno specifičan. Njegovi su primeri stvoreni na takav način da u potpunosti odgovaraju jedinim dijelovima željenih gena, koji nijedan drugi slijed nema. Oba otisaka prstiju su jedinstveni, au svakom od gena postoje jedinstveni slijedovi nukleotida.

Kvalitativna PCR analiza

Kvalitativna analiza otkriva samo prisutnost virusa u krvi. Taj bi test trebao biti proveden za sve pacijente za koje je utvrđeno da imaju antitijela na hepatitis C u krvi. Rezultat može biti samo jedna od dvije vrijednosti: "otkrivena" ili "nije otkrivena". U zdravih osoba norma (referentna vrijednost) ne smije biti "otkrivena".

Postoji i posebna interpretacija takvih rezultata provedenih kvalitativnih istraživanja:

• Rezultat je "otkriven". To znači da je u uzorku biološkog materijala preuzeta je pronašao RNA ulomak koji je specifičan za hepatitis C virusom Prema tome, tu je i činjenica pacijenta s virusom hepatitisa B infekcije C. Ako je rezultat kvalitativne PCR je „otkrio”, to znači da virus replicira i u ovom trenutku inficira nove stanice jetre u tijelu.
• Rezultat je "ne otkrivena". Kao presudi pokazuje da je u uzorku biološkog materijala dobivenog fragmenta RNA nije otkriven u laboratoriju, koji je specifičan za HCV RNA ili jednakom koncentracijom patogena infekcije u uzorku bio je ispod granice osjetljivosti testa.

U akutnoj fazi virusa hepatitis C virusom, kvalitativne studije primjenom PCR tehnike mogu se otkriti nakon 1-2 tjedna neposredno nakon infekcije tijela, tj. Dugo prije pojave antitijela na hepatitis.

Nepouzdani rezultati analiza takve istrage mogu se dobiti:

• kontaminirana biomaterijala;
• prisutnost heparina u krvi pacijenta;
• prisutnost u uzorku kemijskih ili proteinskih supstanci (inhibitori) koji utječu na različite komponente PCR-a.

Za kvalitativnu analizu PCR, posebna priprema pacijenta za studij nije potrebna. Venska krv koristi se kao materijal.

Procjena rezultata

Kvalitativna PCR testa ima određeni stupanj osjetljivosti, a ovisno o točnosti istraživanja i razini opreme u laboratoriju može varirati između 10 i 500 IU / ml.

To znači da ako je prisutan u vrlo maloj koncentraciji virus uzorak krvi (manje od praga osjetljivosti laboratorija), a zatim bolestan ishod pacijent može definirati kao „ne detektira.” Zbog toga, kada se izvođenje kvalitativne analize PCR s niskim razinama viremije (virus niska koncentracija), na primjer, kod pacijenata koji se liječe antivirusne terapije, važno je znati, a prag osjetljivosti dijagnostičkog sustava.

Varijante dijagnostičkih sustava

Za kontrolu virološkog odgovora preporuča se antivirusno liječenje za korištenje dijagnostičkih sustava s pragom osjetljivosti od najmanje 50 IU / ml. Tih kriterija, na primjer: analizatore Cobas Ampicolor HCV (c točnosti od 50 IU / ml) i RealBest HCV RNA (s osjetljivošću od 15 IU / ml).

Prema preporukama SZO za uspostavljanje konačne dijagnoze hepatitisa C, mora se temeljiti isključivo na temelju trostrukog detekciju virusa RNA u uzorcima seruma iz pacijenta bez drugih vrsta markera hepatitisa.

Uz PCR metode, TMA ispitivanje (transkripcijska amplifikacijska metoda) također se koristi za otkrivanje HCV RNA kod bolesnika. Ona ima najbolji prag osjetljivosti (5-10 IU / ml), ali u našoj zemlji takva metoda testiranja još nije vrlo česta.

Raspon otkrivenih modifikacija virusa

Ovo kvalitativno određivanje seruma prisutnosti RNA virusa hepatitisa C omogućuje određivanje nekoliko genotipova ovog virusa. Trenutno, znanost zna više od šest genotipova ovog virusa, kao i oko 10 podtipova ove bolesti.

U našoj zemlji česti su virusi 1, 2, 3 genotipova. Laboratoriji mogu identificirati sljedeće genotipove: la i lb, 2a, 2b i 2c i 3, 4, 5a i 6, bez obzira na podtipove. Za sve izmjene virusa specifičnost detekcije je 100%.

Kvantitativna analiza PCR-a

Korištenjem kvantitativnog PCR testa određuje se razina koncentracije virusa hepatitisa u uzorcima krvi (viralni opterećenje). Ovaj test za viremiju (koncentraciju virusa) omogućuje određivanje broja jedinica specifičnog genetskog materijala (najviše viralne RNA), koji se detektira u određenoj količini. U tom slučaju, odredite njegovu koncentraciju u 1 ml, što odgovara 1 cu. cm.

Kvantitativni parametri analize su izraženi u brojkama, za ovu uporabu kao mjerne jedinice međunarodnih jedinica (IU) po mililitru (ml), označene kao ME / ml. Sada se u nekim laboratorijima količina virusa može odrediti u drugim jedinicama: broj kopija po ml, označen je kao kopija / ml.

• Za hepatitis C, takva kvantitativna analiza PCR-a se obavlja neposredno prije početka terapije. Zatim na 1., 4., 12. i 24. tjedna. Procjena na 12. tjednu je indikativna, omogućuje određivanje učinkovitosti terapije.
• Priprema za analizu. Za kvantitativnu analizu PCR-a nije potrebna posebna priprema pacijenta za ispitivanje. Pola sata prije uzorkovanja, ne smijete pušiti. Venska krv koristi se kao laboratorijski materijal.

Procjena rezultata

Za različite laboratorijske testne sustave, za ovaj pokazatelj postoje različiti faktori konverzije u IU / ml. U prosjeku se koristi parametar pretvorbe u kojem je 4 kopija / ml = 1 IU / ml. To je, na primjer, ako laboratorij daje rezultat PCR analize 2,4 x 10 6 kopija / ml, tada bi taj parametar trebao biti podijeljen s 4, a dobivamo 6 x 10 5 IU / ml.

Visoka razina opterećenja od 800.000 IU / ml smatra se visoka, što je približno jednako indeksu od 3.000.000 kopija / ml. Niža viremija, prema nekim autorima, odgovara parametrima kvantitativnog PCR ispod 400,000 IU / ml.

Kao rezultat kvantitativnog testa, konačni rezultati mogu biti isporučeni ne u obliku digitalne vrijednosti, već: "ispod mjernog raspona" ili "nije detektirano".

• Procjena: "ispod mjernog raspona". To ukazuje da kvantitativni test nije uspio otkriti viralnu RN hepatitis C, ali sam virus prisutan je u tijelu u vrlo malim koncentracijama. Ovo je indicirano dodatnim kvalitativnim testom, koji potvrđuje činjenicu prisutnosti virusa.
• Procjena: "nije otkrivena". Ovaj rezultat pokazuje da kvantitativni test nije detektiran virus u uzorku RNA.

Parametar viralnog opterećenja, prije svega, određuje stupanj infektivnosti bolesti, razinu "infektivnosti" pacijenta. Što je koncentracija virusa veća, to je veća vjerojatnost prijenosa podataka na druge ljude. Na primjer, kada se seksate s bolesnom osobom ili vertikalnom stazom. Takav kvantitativni pokazatelj također pomaže u određivanju učinkovitosti pacijentovog liječenja.

Provođenje kvantitativne analize PCC-a važno je za antivirusnu terapiju, vrednovanje njegovog uspjeha i raspoređivanje trajanja tečaja. Dakle, s brzim odzivom tijela na liječenje i niskim stupnjem viremije, trajanje terapije može se smanjiti.

S polaganim smanjenjem kvantitativnog parametra PCR, antivirusna terapija treba biti proširena ili modificirana. Ako je razina viralnog opterećenja niska, onda je to povoljan faktor terapije, ako je visok, onda je primijenjena metoda liječenja nedjelotvorna, a lijekove ili metode njihove upotrebe treba mijenjati.

Analiza PCR-a za hepatitis

PCR NA HEPATITIS C

1. RNA hepatitisa C ( „PCR kvalitete”) - otkrivanje u analizi krvi je dokaz o postojanju akutne ili kroničnog hepatitisa C se određuje od 2. tjedna infekcije, prije nego što se prikazuje anti-HCV, što za dijagnosticiranje bolesti u ranim fazama. Određivanje RNA obavlja se kod osoba s klinikom akutnog hepatitisa i osoba s pozitivnim rezultatima analize hepatitisa.
2. RNA hepatitisa C ("PCR quantitative") - virusni opterećenje - jedan od pokazatelja učinkovitosti antivirusne terapije i njegove procjene (promjenom razine početne vrijednosti). Kvantitativna karakterizacija sadržaja hepatitis C RNA je važna za procjenu učinkovitosti antivirusne terapije i ima prognostičku važnost za određivanje kroničnosti. Pacijenti s visokim količinama viralnog opterećenja (velike količine RNA) prije liječenja reagiraju na lošiji način liječenja.
3. RNA hepatitisa C (genotipovi 1, 2, 3) - Vrsta liječenja ovisi o vrsti i njegovoj učinkovitosti. Bolest uzrokovana virusom genotipa 1 je najnepovoljnija u odnosu na prognozu učinkovitosti terapije. Prema aktualnim preporukama, prije početka antivirusne terapije treba obaviti krvni test za nas genotipizaciju hepatitisa C.
4. RNA hepatitisa C (prošireni genotipizacija la, lb, 2, 3a, 4, 5, 6) - na području Rusije kruže 1a, 1b, 2a, 2c, 2k, 3a podtipove. Hepatitis C, uzrokovan virusom genotipova 1 i 4, najnepovoljniji je u odnosu na prognozu.
5. Ultrasensivni PCR za hepatitis C (kvalitativna metoda) - analiza se koristi za dijagnosticiranje bolesti u ranim fazama infekcije, optimalna je za testiranje davanja krvi i procjenu odgovora na antivirusno liječenje. Ova studija, čak i u odsutnosti antitijela na virus hepatitisa C, preporučuje se za bolesnike s jetrenom bolesti neodređenog uzroka, s stečenim imunodemogućenjem ili primanjem imunosupresivne terapije.
6. Ultrasensivni PCR za hepatitis C (kvantitativna metoda) - jedinstvena analiza s visokom osjetljivošću (10 IU / ml) za određivanje virusa hepatitisa C u kvantitativnom smislu. Studija se koristi za praćenje učinkovitosti terapije.

PCR NA HEPATITIS B

1. Hepatitis B DNA (kvalitativna analiza) - indeks reprodukcije hepatitisa B. Prvi se pojavljuje u krvi, prosječno 1 mjesec nakon infekcije. U nekim slučajevima, to je jedini marker latentne infekcije HBV. Određivanje DNA virusa omogućuje dijagnosticiranje hepatitisa B izazvanog mutantnim sojevima, u kojima se ne otkrivaju drugi markeri infekcije.
2. Hepatitis B DNA (kvantitativna analiza) - Koncentracija DNA (virusni opterećenje) jedan je od testova koji se koriste za određivanje stadija kroničnog hepatitisa B i učinkovitost antivirusne terapije. Analiza se provodi prije i tijekom liječenja.
3. Genotipizacija hepatitisa B - bolesti uzrokovane različitim genotipima virusa mogu se razlikovati u kliničkom tijeku i ishodu. Hepatitis B, uzrokovan virusom genotipa C, često ima kronični tijek i ima visok rizik od preobrazbe u cirozu jetre ili hepatocelularnog karcinoma. Pacijenti zaraženi virusom genotipa A reagiraju bolje na liječenje.
4. Ultrasensivni DNA-PCR za hepatitis B (kvalitativna metoda) - preda ih za rano otkrivanje bolesti. Vrlo informativan u proučavanju krvi donora. Može se koristiti za potvrdu spontanog ili liječenja induciranog uklanjanja virusa iz ljudskog tijela.
5. Ultrasensivni PCR za hepatitis C (kvantitativna metoda) - dijagnosticiranje DNA virusa hepatitisa B u kvantitativnom smislu. Analiza je provedena kako bi se ocijenila učinkovitost terapije.
6. Određivanje mutacija otpornosti na antivirusne lijekove lamivudin, telbivudin, entekavir, adefovir, tenofovir (dan zajedno s analizom "hepatitisa B kvantitativne DNA"). Provođenje analize nužno je za pacijente s kroničnim hepatitisom B prije početka antivirusne terapije i tijekom primjene lijekova. Rezultat sadrži informacije o dostupnosti otpornosti virusa hepatitisa B na antivirusne lijekove:
   • R - virus je otporan na antivirusni lijek (otkrivene su mutacije rezistencije na ovaj lijek);
   • S - hepatitis B virus je osjetljiv na lijek (noralna vrijednost, mutacije otpornosti nisu otkrivene);
   • I - uzročnik infekcije može uzrokovati otpornost na ovaj lijek.

Trošak krvnog testa i PCR za hepatitis C

Hepatitis C je upalna patologija u kojoj su zahvaćene stanice jetre. Bolest se razvija zbog prodora virusa hepatitisa C (HVC) u ljudsko tijelo.

Oblik bolesti može biti akutan ili kroničan.

Najčešće, simptomi akutnog oblika bolesti, većina pacijenata nisu dostupni, ponekad je bolest praćena bolovima u trbuhu, smanjuje performanse, veću umor, apetit, poremećaj tamnu nijansu urina, promjene boje izmeta, žutilo kože i sluznica, bolove u zglobovima. Postoje takvi simptomi u pravilu 6-8 tjedana nakon infekcije, ali se mogu očitovati nakon šest mjeseci.

Razvojem takvih pojava potrebno je primijeniti na zdravstvenu ustanovu i proći sveobuhvatan pregled cjelokupnog organizma. U sklopu liječničkog pregleda obavlja se test krvi za hepatitis C.

Danas, uz pomoć suvremenih dijagnostičkih tehnika, moguće je identificirati ovu patologiju u početnoj fazi razvoja, što značajno povećava šanse za potpuno liječenje bolesti.

Analiza za hepatitis C obvezna je za sljedeće skupine ljudi:

• žene u razdoblju djeteta;
• osobe s znakovima hepatitisa;
• djelatnici zdravstvenih ustanova;
• potencijalni donatori organa i krvi;
• ovisnici o drogama, osobe zaražene HIV-om, osobe koje provode neuredan intimni život.

Popis potrebnih studija

Koji testovi trebam uzimati s hepatitisom C? Za točnu dijagnozu bolesti, otkrivanje njenih uzroka i stanja jetre parenhima potrebno za obavljanje takve studije:

• opća analiza urina i krvi;
• biokemijska analiza krvi;
• PCR analiza;
• test krvi za otkrivanje protutijela na HVC;
• test krvi za raspoloživa antitijela vlastitim stanicama jetre;
• biopsija jetre.

Tumačenje krvnog testa za hepatitis C izvodi stručnjak. Uzimajte u obzir svaku metodu istraživanja detaljnije, a također ćemo razumjeti kakva je analiza za hepatitis C najtočnija.

Opća analiza

Kada obavljate opći test krvi za hepatitis C, možete procijeniti stanje bolesnika. Promjene u broju krvi ne percipiraju se kao specifični simptomi hepatitisa, ali kod ove bolesti postoje kršenja kao što su:

• smanjuje se koncentracija hemoglobina, trombocita i leukocita;
• povećava se sadržaj limfocita;
• koagulacija krvi je poremećena;
• povećava se stopa eritrocita sedimentacije (ESR).

Opća analiza urina omogućava otkrivanje uroka urobelin - žučnog pigmenta koji se pojavljuje u urinu uslijed neispravnosti jetre.

Biokemijska analiza

Biokemijska analiza krvi u hepatitisu C omogućuje nam prepoznavanje takvih kršenja kao:

• povećao sadržaj jetrenih enzima (alanin transaminaza - ALT i aspartat aminotransferaza - AST), koji ulaze u krvotok s oštećenjem hepatocita. U normalnom stanju, ti pokazatelji kod muškaraca ne bi smjeli biti viši od 37 IU / l, kod žena - ne više od 31 IU / l. Povećana koncentracija ALT i AST u hepatitisu C, koja je asimptomatska, često je jedini simptom ove bolesti. Pored toga, razina krvi povećava razinu alkalne fosfataze glutamil-transpcptidaze (obično ne više od 150 IU / L).
• premašuje se sadržaj bilirubina (ukupnog i izravnog) u krvi. Ako je razina žutog pigmenta u serumu veća od 27-34 umol / L, žutica doći (do 80 mol / l na jednostavan način, 86-169 pmol / L - umjerena, iznad 170 mmol / l - teški oblik).
• Smanjena razina albumina, naprotiv, koncentracija gama globulina povećana. Gamma globulini se sastoje od imunoglobulina - protutijela koja štite tijelo od patogena.
• povećana koncentracija triglicerida u krvi.

PCR studija

Pomoću PCR tehnike moguće je dijagnosticirati patogena. Izvođenje ove analize omogućuje otkrivanje virusa u krvi, čak i ako je njegova količina minimalna. Analiza PCR-a za hepatitis C omogućuje prepoznavanje postojećih infekcija u krvi nakon proteka 5 dana od vremena infekcije, to jest dugo prije nego što se pojave antitijela.

Ako je rezultat testa krvi za hepatitis C s PCR metodom pozitivan, to ukazuje na prisutnost aktivne infekcije u tijelu. Pomoću ove metode može se provesti kvalitativno i kvantitativno istraživanje HVC RNA.

Tijekom kvalitativne analize PCR za hepatitis C, moguće je otkriti postojeći virus u ljudskom tijelu.

Takav dijagnostički postupak se provodi ukoliko je otkriven anti-HVC u krvi.

Transkripcija analize za hepatitis C sadrži informacije da je infekcija u tijelu otkrivena ili nije otkrivena. U normalnom stanju, patološke supstance u krvi nisu otkrivene.

Ako analiza za hepatitis C daje pozitivan rezultat, to ukazuje da je patogeni mikroorganizam kontinuirano podijeljen i utječe na stanice jetre.

Rezultati takve analize mogu biti nepouzdani, moguća je u sljedećim slučajevima:

• kontaminacija korištene biomaterijala;
• ako postoji heparin u krvi;
• u prisutnosti kemijskih ili bjelančevinskih tvari (inhibitori) u istraživanju biomaterijala koji utječu na elemente PCR-a.

Kvantitativna analiza za hepatitis C daje informacije o količini virusa koji se nalazi u krvi, odnosno određuje virusni opterećenje. Ovaj izraz znači količinu HVC RNK prisutnih u krvi (npr. 1 ml). U tumačenju kvantitativne analize za hepatitis C, ta se vrijednost izražava u digitalnom ekvivalentu, izmjerenom u IU / ml.

Krv za PCR u hepatitisu C se uzima prije terapijskih mjera. Nakon što se analiza izvodi na 1, 4, 12 i 24 tjedna. Studija u tjednu 12 je indikativna i provodi se kako bi se procijenila učinkovitost postupaka liječenja u tijeku.

Ako je analiza za hepatitis C u trudnoći pozitivna i virusna opterećenja prekoračena, rizik prijenosa patogena od bolesne majke do djeteta višestruko se povećava. Također, s povećanim vrijednostima virusnih opterećenja, provedba terapijskih mjera je teška.

Prema analizi hepatitisa C, ako je virusni opterećenje veći od 800 000 IU / ml, onda je visoka. Ako su brojke ispod 400,000 IU / mL, razina viralnog opterećenja smatra se niska.

Analiza hepatitisa C koja koristi PCR metodu smatra se najtočnijom i ima nekoliko prednosti u odnosu na druge mogućnosti istraživanja, i to:

• izravna dijagnoza patogena. Pri izvođenju tradicionalnih istraživanja utvrđena je prisutnost bjelančevinskih biljega, koji su proizvodi vitalne aktivnosti patogenih supstanci. Samo kaže da je infekcija prisutna u krvi. Kada se analiza za hepatitis C vrši primjenom PCR metode, moguće je odrediti vrstu uzročnika opasne patologije.
• specifičnost metodologije. Tijekom ovog postupka u biomateriji se identificira jedinstvena DNA regija koja odgovara samo jednoj vrsti patogena. To omogućuje da se minimizira vjerojatnost dobivanja nepouzdanih rezultata.
• visoka osjetljivost. Kod izvođenja PCR analize može se otkriti minimalna količina virusa. To je važno ako se identificiraju uvjetno patogene tvari koje predstavljaju prijetnju samo ako se njihova razina podigne.
• kada se koristi ova tehnika, može se otkriti nekoliko patogena u jednom biomaterijalnom uzorku.
• moguće je otkriti skrivene infekcije. Osim toga, analiza omogućuje dijagnosticiranje patogena koji žive unutar stanice i imaju visoku antigenu varijabilnost.

Ako su rezultati istraživanja pozitivni, tragovi virusa se nalaze u biomateričkoj, a zatim mreža u tijelu ima infekciju.

Negativna analiza PCR-a za hepatitis C znači da u biologiji nema tragova infekcije.

Imunološko ispitivanje

Ova metoda omogućuje prepoznavanje antitijela na sve vrste virusa hepatitisa, kao i protutijela na stanice jetre vašeg tijela, koje promoviraju razvoj autoimunog hepatitisa.

Rezultati dobiveni tijekom istraživanja su važni 3 mjeseca, a zatim trebate ponovno donirati krv za hepatitis C.

Također je moguće izvesti izričito istraživanje pomoću posebnih test traka. Ova analiza omogućava određivanje protutijela virusa u krvi i slini. Takav se postupak može izvesti samostalno, kod kuće.

Biopsija jetre

Za izvođenje takve analize uzima se element parenhima jetre i provodi se histološka studija dobivene biomaterijala. To nam omogućuje procjenu stanja organa: identificiranje upalnih, nekrotičnih žarišta, faze fibroze i slično.

Danas se koriste testovi koji zamjenjuju histološku analizu parenhima jetre.

Da biste procijenili fazu oštećenja jetre i intenzitet procesa upale, koristite specifične biomarkere venske krvi. Uz pomoć Fibrotesta, moguće je procijeniti opseg proliferacije vlaknastog tkiva.

Prilikom izvođenja Actitesta moguće je dobiti informacije o intenzitetu patoloških procesa u parenhimu jetre. Korištenje Steatotest može dijagnosticirati masnu degeneraciju jetrenog tkiva i procijeniti stupanj tog procesa. Fibromax se sastoji od svih gore navedenih testova i može uključivati ​​i druge studije.

Priprema za studiju

Kakvi su testovi uzeti za hepatitis C i kako se ova ili ona vrsta istraživanja provode, otkrili smo. Jednako je važno znati se pripremiti za analizu.

Da biste dobili pouzdane rezultate, preporučljivo je pridržavati se sljedećih zahtjeva:

• Analize za hepatitis C trebale bi se uzimati ujutro, na prazan želudac. Posljednji put biste trebali jesti hranu najmanje 8 sati prije testa.
• Biomatrijsko uzorkovanje može se provoditi tijekom dana ili navečer. U takvom slučaju važno je da između zadnjeg obroka i analize prođe najmanje 5-6 sati.
• Prije davanja krvi za hepatitis C, čaj, kava, sok ili druga pića treba odbaciti, samo je voda dopuštena.
• 48 sati prije studije potrebno je isključiti potrošnju masne, pržene hrane i pića koja sadrže alkohol.
• Za najmanje sat vremena prije provođenja testa morate se suzdržati od pušenja.
• Nemojte izvršiti analizu odmah nakon ultrazvuka, instrumentalnog, radiološkog pregleda, masaže ili fizioterapije.
• dan prije studija je potrebno isključiti korištenje lijekova i intenzivne tjelesne aktivnosti. Emocionalni napadi također su kontraindicirani.
• 15 minuta prije nego što se test preporuča držati u mirnom stanju.

Postupak uzorkovanja krvi

Gdje proći test za hepatitis C? Zbirka biomaterijala za daljnja istraživanja provodi se u laboratoriju zdravstvene ustanove ili kod pacijenta.

Krv iz vena se uzima kako slijedi:

• Uz pomoć posebnog paketa omotanog pacijentovom podlakticom, venski protok je suspendiran. Zahvaljujući takvim manipulacijama, vene se napune krvlju i bit će vidljivije, što će uvelike olakšati proces umetanja igle.
• Područje kože na kojoj će se ubaciti igla brižno se liječi alkoholom ili tekućinom koja sadrži alkohol.
• Igla je pažljivo umetnuta u venu, a na njega je pričvršćena ispitna cijev posebno oblikovana za prikupljanje krvi.
• odmah nakon što je igla umetnuta u venu, crijevo za cijeđenje se uklanja iz ruke pacijenta.
• nakon prikupljanja potrebne količine krvi za analizu, igla se postupno uklanja iz vena.
• na mjestu ubrizgavanja mora se nanositi sterilni vuneni ili gipsni štapić umočen u alkoholu.
• kako bi se spriječio pojava hematoma, tampon bi trebao biti pritisnut s malo napora na području ubacivanja igle, savijati ruku na koljenastom zglobu i držati ga nekoliko minuta. Takve akcije također pomažu da brzo zaustavi krv.

S obzirom na dobru tehniku ​​unutarnje administracije, ovaj postupak je apsolutno siguran i čitanje ne uzrokuje bolne senzacije.

U rijetkim slučajevima, nakon uzimanja krvi moguće je oticanje vene. Taj se fenomen naziva "flebititis". Problem će se ublažiti komprimiranjem (ne vrućim), treba ga primjenjivati ​​na natečene kožne dijelove nekoliko puta dnevno.

Postoje i određeni problemi ako postoji poremećaj krvarenja. Uzimanje aspirina, varfarina i drugih lijekova koji razrjeđuju krv mogu izazvati krvarenje. Zato prije izvođenja analize morate odbiti uzimati lijekove. Ako se liječenje ne može otkazati, obavijestite stručnjaka o tome.

Uvjeti i cijene

Koliko je analiza učinjena za hepatitis C? Rezultati testa krvi za hepatitis mogu biti spremni za nekoliko sati, a za nekoliko dana (obično ne dulje od 8 dana). Trajanje pripreme rezultata ovisi o vrsti virusa i odabranoj tehnici analize. Istraživanje provedeno metodom PCR je brže. Rezultati u ovom slučaju bit će spremni za samo nekoliko sati.

Koliko je analiza za hepatitis C? Ovisno o klinici i složenosti studije, cijena postupka može varirati od 400 do 11.000 rubalja.

Treba napomenuti da može trajati nekoliko tjedana da se dobije dovoljan volumen antitijela na HVC. Stoga, u ranoj fazi razvoja patologije, rezultat studije može biti lažno negativan.

Osim toga, moguće je dobivanje netočnih podataka ako je analiza slabo izvedena i kršenja uvjeta prijevoza za primljene biomaterijale (uzorci trebaju biti dostavljeni u laboratorij najviše 2 sata nakon prikupljanja krvi).

Ako je rezultat studije pozitivan, morate se odmah posavjetovati s liječnikom infektivne bolesti. Specijalist će provesti dodatno ispitivanje i propisati odgovarajući tretman.

Još mislite da je teško liječiti hepatitis C?

Sudeći po činjenici da sada čitate ove retke - pobjeda u borbi protiv bolesti jetre nije na vašoj strani. I već si razmišljala o terapiji interferonom? Razumljivo je, jer hepatitis C je vrlo ozbiljna bolest, jer pravilno funkcioniranje jetre jamči zdravlje i dobrobit. Mučnina i povraćanje, žućkasto ili sivkasto ton kože, gorčina usta, zamračivanje urina i proljev. Svi ovi simptomi nisu poznati vama, a ne izgovorom.

Ali, možda je ispravnije postupati ne kao posljedicu, već razlog? Za liječenje preporučujemo korištenje suvremenih ruskih lijekova - sophosbuvir i daklatasvir. Pročitajte više >>

Kvalitativna i kvantitativna analiza PCR-a za hepatitis C: negativna, pozitivna, dekodiranje

Hepatitis C - virusne bolesti jetre uzrokovane HCV flavivirus, u kojoj je struktura sadrži molekulu od ribonukleinske kiseline (RNA) (od engleskog virusa hepatitisa C,). RNA nosi genetski kod virusa. Njegova prisutnost omogućuje analizu PCR-a za hepatitis C.

HCV je opasnost za ljude i da tzv serološki prozor (vrijeme između infekcije i pojave reakcije imunološkog sustava) može biti dovoljno dugo - od nekoliko tjedana do šest mjeseci.

To ne otkriva infekcije i započinje liječenje na vrijeme.

Ovisno o individualnim karakteristikama tijela domaćina, HCV se može očitovati u akutnom obliku, a može se razviti i kao kronična bolest koja će zahtijevati dugotrajno i skupo liječenje. Kada se detektiraju antitijela na HCV, provode se brojni laboratorijski testovi, uključujući PCR za hepatitis C. Ovaj test se provodi za sve ljude čija je krv pronađena protutijela na HCV.

Što je PCR analiza?

Laboratorijska analiza PCR-a za hepatitis C - studija biološkog materijala za prepoznavanje prisutnosti flavavirusa.

Lančana reakcija polimeraze (kao što je kratica dešifrirana) pokazuje kvantitativnu vrijednost virusne štete organizma, njegove kvalitativne karakteristike, kao i genotip RNA koji sadrži virus.

Na temelju njih, kao i na temelju dodatnih analiza, određuje se metoda i trajanje terapije, kao i epidemiološki čimbenik (rizik od prijenosa na drugog prijevoznika).

Što je RNA analiza za hepatitis C?

PCR hepatitis C također se naziva RNA analiza (HCV RNA), jer nije poznat. Flavavirus sadrži RNA česticu s veličinom viriona od 30-60 nm. Jedna od karakteristika ovog mikroorganizma je velika sklonost mutacijama.

Svaka od podvrsta (genotipova) virusa ima različitu otpornost, što uzrokuje različite metode liječenja i prirodu daljnje prognoze za pacijenta.

Biološki materijal (venska krv) dobiva post i obično testiran u realnom vremenu PCR (visoko osjetljivim realnom vremenu dijagnostika za određivanje donju granicu 15 IU / ml pomoću automatizirani način zatvorenog sustava).

Postoje i drugi testovi, na primjer COBAS AMPLICOR s osjetljivošću od 50-100 IU / ml. Za svaku laboratorijsku studiju, prag osjetljivosti je važan, tj. sposobnost reagenta da detektira minimalnu koncentraciju virusa u biološkom materijalu.

Vrste analize za hepatitis C korištenjem PCR metode

PCR za hepatitis C uključuje tri važne komponente:

• kvalitativna analiza;
• kvantitativna analiza;
• genotipizacija.

Ovi testovi mogu odrediti prirodu virusa, kao i genetske znakove patogena. Ovisno o osjetljivosti dijagnostičkog sustava, test se provodi jednom, a ponekad se provodi i drugi test s osjetljivijim reagensom kako bi se potvrdili ili pročistili rezultati.

Visokokvalitetni hepatitis C PCR

PCR analiza za hepatitis C je još jedno zajedničko ime za lančanu reakciju polimerazne analize. Standardna osjetljivost testa, koja omogućuje otkrivanje prisutnosti virusne lezije, je u rasponu od 10-500 IU / ml.

Negativna analiza PCR-a za hepatitis C pokazuje da je koncentracija virusa u krvi pacijenta ispod prag osjetljivosti dijagnostičkog sustava.

Ako je kvalitativno PCR dao "neotkriven" odgovor, tada je za daljnje liječenje važno znati prag osjetljivosti reagensa.

Proteinske frakcije s flavavirusom pojavljuju se mnogo kasnije.

Kvantitativni hepatitis C PCR

Kvantitativni PCR hepatitis C je pokazatelj virusnog opterećenja koji odražava razinu koncentracije flavavirus RNA u tijelu. Ovo je pokazatelj koji pokazuje koliko ulomaka virusne RNA sadrži po jednom kubičnom centimetru krvi. PCR hepatitis C RNA rezultata kvantitativna ispitivanja u konvencionalnom sustavu navedeni su u međunarodnim jedinicama po mL (IU / ml), i može se snimiti na različite načine, na primjer - 1,7 ppm ili 1,700,000 IU / ml.

Kvantitativna PCR dijagnoza hepatitisa C je dana pacijentima prije početka antivirusne terapije, a 12. tjedna liječenja kako bi se procijenili rezultati odabrane metode borbe protiv HCV. Virusna opterećenja omogućuju prepoznavanje tri važna pokazatelja bolesti:

• infektivnost, tj. stupanj rizika prijenosa virusa iz jednog nosača u drugu (što je veća koncentracija flavavirus RNA, to je veća vjerojatnost zaraze druge osobe, na primjer, tijekom seksualnog kontakta);
• metoda i učinkovitost liječenja;
• trajanje i prognozu antivirusne terapije (što je veći virusni opseg, to traje dulji tretman).

Kvantitativna PCR dijagnoza hepatitisa C ovisi o vrsti laboratorijskog testa i pragu njegove osjetljivosti. Donja granica norme obično se smatra do 600.000 IU / ml, prosječna vrijednost je u rasponu od 600.000-700.000 IU / ml. Rezultati od 800,000 IU / mL i više smatraju se visokom razinom virusa koji sadrži RNA.

genotipizacija

S obzirom na visoku mutacijsku aktivnost HCV-a u prirodi, važno je odrediti u fazi ispitivanja koja genotip virusa je u pacijentovoj krvi. Ukupno je zabilježeno 11 genotipova virusa hepatitisa C na planeti, koje uključuju mnoge podvrste. Na području Ruske Federacije, uobičajene su 1,2 i 3.

PCR RNA hepatitisa C zajedno s genotipizacijom vrlo je važna komponenta analize, jer omogućuje liječniku određivanje otpora (otpornosti) virusa, odabir prikladnih lijekova i propisivanje tijeka liječenja.

Genotipizacija također omogućuje neizravno određivanje stanja jetre. Na primjer, 3 genotip HCV-a često prati steatosis, u kojem se nakuplja masno tkivo u stanicama tijela.

Test krvi za PCR u hepatitisu C trebao bi dati brojku koja određuje genotip. U laboratorijskim odgovorima može se pisati "nije upisano" - a to znači da u ljudskoj krvi postoji virus koji nije određen testnim sustavom. To može ukazivati ​​da genotip nije karakterističan za određeno zemljopisno područje. U tom slučaju potrebno je ponovno analizirati analizu s većom osjetljivošću dijagnostičkog sustava.

Dekodiranje PCR analize za hepatitis C

Test za hepatitis C PCR može se kvantificirati na temelju gore navedenih podataka. Pri primanju rezultata laboratorijskih ispitivanja obično se pišu sljedeći podaci:

• "Pronađeno" / "nije pronađeno" (visoko kvalitetno PCR za hepatitis C);
• količina frakcija koje sadrže RNA, na primjer 831.680 IU / ml (kvantitativno PCR test);
• brojka koja određuje genotip HCV-a, na primjer - 1, 2, 3, 4;
• naziv testa najčešće je u stvarnom vremenu.

Najvažnije za dešifriranje PCR analize za hepatitis C je druga točka, koja pokazuje virusno opterećenje koje određuje prognozu, metodu i trajanje liječenja.

Ako je PCR analiza za hepatitis C negativna i ELISA pozitivna - što to znači?

Za dešifriranje laboratorija važan za kontakt hepatologist ili infekcijskih bolesti, koja objasniti informacije prema vrsti dijagnostičkog sustava i njegove praga osjetljivosti. U medicinskoj praksi postoje mnogi podaci o krvi koji mogu dovesti do zbunjenosti osobe bez medicinskog obrazovanja.

Na primjer, ako je test za HCV PCR negativnog i pozitivnog ELISA, što može značiti da u tom trenutku u pacijentovoj krvi nije HCV, a prije nego što je doživio akutni oblik hepatitisa C. Smatra se da pozitivno imunosorbent testa (ELISA) pokazuje da je u krvi postoje protutijela proizvedena poslije invazije virusa u prošlosti. No, u modernoj medicinskoj praksi ELISA analiza nije dovoljno pouzdana i često daje neobične rezultate, tako da liječnici ga koristiti kao primarni screening. Kada dijagnosticira bolest, stručnjaci su vođeni precizno PCR testovima.

Korisni videozapis

U sljedećem videu vrlo je detaljno i zanimljivo reći što je bit PCR metode, kako se analiza radi:

zaključak

Venska krv je obično uzeta za analizu hepatitis C PCR. Najčešće se radi o dvostrukom uzorku biološkog materijala - za ELISA i izravno za PCR test. Za točne rezultate ispitivanja potrebno je poštivati ​​glavna pravila laboratorijskog uzorkovanja biološkog materijala:

• krv za analizu se daje ujutro na prazan želudac;
• između jedenja i uzimanja krvi trebalo bi trajati najmanje 8 sati;
• Prije nego što uzmete test, također biste trebali isključiti alkohol i prženu hranu;
• Tijekom dana prije davanja krvi, morate izbjegavati visoki fizički napor.

Rezultati testiranja krvi obično su spremni sljedeći dan.

PCR-studija za hepatitis C: tipovi, indikacije, transkripta

Virusni hepatitis C je ozbiljna bolest koja se javlja kod oštećenja jetre. U osamdeset posto pacijenata prolazi u kronični oblik. Virus se umnožava u jetrenim stanicama - hepatocitima - i uzrokuje njihovu smrt. Mrtvo tkivo je zamijenjeno žarištima vezivnog tkiva, razvija se fibroza.

S razvojem fibroze jetre ne može obavljati svoju funkciju, počinje cirozu, koja je opasna za njene komplikacije: sve veći pritisak u portalnu venu, gastrointestinalnog krvarenja, oslabljen zgrušavanje krvi, mentalne promjene uslijed oštećenja jezgre mozga otrovne proizvode.

Uzrok bolesti je infekcija virusom iz obitelji Flaviviridae, koja je vrsta RNA virusa. To znači da se genetički materijal kojim se sintetiziraju proteini patogena kodira u molekuli ribonukleinske kiseline. Infekcija se javlja kroz krv, seksualno, i od trudnice do fetusa. Nažalost, između infekcije i početka proizvodnje antitijela može proći prilično veliku količinu vremena - od dva tjedna do šest mjeseci. To ne dopušta odrediti infekciju pomoću metode enzimskog imunološkog pregleda i započeti liječenje u ranoj fazi.

Što je PCR analiza?

PCR je metoda molekularne analize koja omogućuje otkrivanje genetskog materijala patogena već u prvom tjednu nakon infekcije koristeći lančanu reakciju polimeraze. Studija ima visoku specifičnost, točnost i omogućuje ne samo određivanje prisutnosti ili odsutnosti virusa, već i njegovu koncentraciju i genotip.

Za studiju, uzmite krv pacijenta u kojoj se RNA virusa može naći. U krvi se dodaju primeri - umjetno sintetizirani dijelovi željenog gena male duljine, a RNA polimeraza je poseban enzim koji množi količinu genetskog materijala patogena. Uz pomoć posebnog aparata provode se nekoliko ciklusa grijanja i hlađenja. Materijal se zatim analizira i uspoređuje s poznatim virusnim genima, na temelju kojih se donosi zaključak o prisutnosti ili odsutnosti infekcije.

Vrste PCR analize za hepatitis C

Postoje tri vrste PCR analize:

1. Kvalitativna PCR analiza. Prva faza studije. Omogućuje identificiranje genetskog materijala virusa u krvi.

Kvantitativna analiza PCR-a. Omogućuje određivanje količine virusa - koncentraciju genetskog materijala patogena u jednom mililitru krvi. Ova studija se provodi prije početka terapije, a potom na prvom, četvrtom, dvanaestom i (ako je tečaj dug) dvadeset četvrtog tjedna liječenja kako bi se procijenila njezina učinkovitost.

genotipizacija. Uzročnik hepatitisa C često i brzo mutira. Na planetu pronađeno je sedam varijanti genotipa tog virusa. U Rusiji su prva, druga i treća vrsta uobičajene. Svaki od genotipova ima različitu otpornost na terapiju, na primjer, učinkovitost liječenja prvog tipa je šezdeset posto, a drugi i treći dosežu osamdeset pet. Stoga, kako bi se odabrali prikladni lijekovi i propisali tijek liječenja dovoljnog trajanja, potrebno je točno utvrditi koja vrsta virusa je zaražena pacijentom.

Indikacije za PCR analizu za hepatitis C

PCR-studija propisana je u sljedećim slučajevima:

• kontakt s bolesnom osobom, što može dovesti do infekcije;
• pozitivno enzimski vezani imunotest;
• znakovi ciroze jetre: promjene veličine jetre, povećana slezena, pojava potkožnog venskog pleksusa na abdomenu;
• pojava simptoma oštećenja jetre: bol u desnom dijelu trbuha, žućkanje kože;
• povećana aktivnost ALT i AST u biokemijskoj analizi krvi;
• prije početka tretmana kako bi se utvrdilo količinu virusa;
• za praćenje učinkovitosti antivirusne terapije;
• nakon završetka liječenja za praćenje recidiva;
• u prisutnosti dijagnoze hepatitisa B, da se isključi mješovita oštećenja jetre.

Dekodiranje PCR studije za hepatitis C

Dekodiranje PCR analize i enzimskog imunološkog testa za hepatitis C treba obratiti stručnjak za hepatologu ili zaraznu bolest. Analizirati rezultate PCR je potrebno u kombinaciji s biokemijskim krvnim testom, biopsijom i ultrazvukom. Samo kvalificirani liječnik će moći analizirati rezultate studija i na temelju njih propisati pravu terapiju.

Dekodiranje kvalitativne analize.

Genetski materijal patogena pronađen je u analiziranom biološkom materijalu. Potvrđena je infekcija.

Nema infekcije, ili je količina RNA patogena ispod granice osjetljivosti.

Dekodiranje kvantitativne analize.

Normalan lik za zdrave ljude. To znači da ne postoji hepatitis C RNA u ispitnom materijalu, ili je njegova koncentracija ispod prag osjetljivosti studije.

Koncentracija RNA je ispod raspona kvantitativnosti. Takvi se rezultati tumače vrlo oprezno, povezuju ih s podacima drugih studija, često provode drugu studiju.

Razina viralnog opterećenja pri određenoj koncentraciji smatra se niska. Obično smanjenje količine virusa znači da je terapija uspješna.

Više od 8 x 10 ^ 5 IU / ml

Razina virusnog opterećenja pri određenoj koncentraciji smatra se visokom.

Više od 2,4 x 10 ^ 7 IU / ml

Količina RNA je iznad gornje granice raspona kvantifikacije. Zaključivanje o stupnju virusnog opterećenja s ovim rezultatom nije moguće. Obično u takvim slučajevima, test se ponavlja s razrjeđivanjem uzorka krvi.

Dekodiranje genotipizacije.

Otkriveno je RNA specifičnog genotipa

U biomateričnom virusu hepatitisa C detektira se specifični genotip i podtip. Rezultat je kodiran rimskim brojevima i latinskim slovima, na primjer - la, 2b. Postoji sedam genotipova i šezdeset sedam podtipova, ali u Rusiji postoje samo tri prve vrste.

Otkriveno je RNA virus hepatitisa C

U krvi, RNA se nalazi rijedak genotip za Rusiju, koji se ne može pripisati prvom, drugom ili trećem tipu. Potrebno je više istraživanja.

Ovaj rezultat pokazuje da je pacijent zdrav, ili da je razina RNA patogena premalena.

Situacija je moguća kada je PCR analiza za hepatitis C negativna, a enzimski imunosni test detektira protutijela protiv virusa. To znači da je pacijent imao akutni oblik hepatitisa C i izliječio se. Približno dvadesetak slučajeva infekcije rezultira spontanom liječenjem ako tijelo pacijenta ima dovoljno otpornosti na infekciju.

Unatoč činjenici da je PCR vrlo precizna analiza, njegovi rezultati mogu biti iskrivljeni u sljedećim situacijama:

• krv je prevezena u laboratorij pod neadekvatnim uvjetima, temperaturni režim je povrijeđen;
• uzorak biomaterijala je kontaminiran;
• u krvi su ostali tragovi heparina i drugih antikoagulanata;
• U ispitivanoj tvari bili su inhibitori - tvari koje usporavaju ili zaustavljaju lančanu reakciju polimeraze.

Prednosti PCR-a u odnosu na druge metode

1. Dijagnoza u ranim fazama. PCR detektira genetički materijal uzročnika bolesti. Pomoću imunofluorescentne analize moguće je odrediti samo imunoglobuline - tvari koje tijelo proizvodi kao odgovor na infekciju. U slučaju infekcije hepatitisom C, interval između infekcije i nastupa imunološkog odgovora može biti nekoliko tjedana i mjeseci, a tada ELISA neće biti učinkovit. PCR će dati odgovor već u prvom tjednu nakon infekcije.

Niska vjerojatnost pogreške. U istraživanom materijalu određuje se genetički materijal koji je karakterističan samo za jednu vrstu patogena. To vam omogućuje izuzimanje netočnih rezultata. Kod ELISA-e moguće su pogreške jer se istovrsna vrsta protutijela može izdati protiv različitih virusa - takva antitijela nazivaju se križnim reaktivnostima.

Visoka osjetljivost. PCR može otkriti RNA patogena čak iu minimalnim količinama. To omogućuje identificiranje skrivenih infekcija.

Kako se pripremiti za isporuku krvi za PCR istraživanje

Za PCR analizu, venska krv je prikupljena za hepatitis C. Obično se dva dijela krvi odvede iz pacijentove vene istodobno: prvi se šalje za PCR, a drugi za ELISA. To je učinjeno kako bi se preciznije procijenilo koliko je pacijent zaražen virusom i kako imunitet bori protiv njega.

Obično su potrebna sljedeća pravila pacijenta:

• Ispitivanje krvi uzima se ujutro;
• prekid između posljednjeg obroka i isporuke krvi trebao bi biti osam do deset sati;
• dva ili tri dana prije analize morate odustati od pržene i masne hrane i alkohola;
• za dvadesetčetiri sata prije analize, pacijent treba izbjegavati tjelesno naprezanje: nemojte nositi težine, ne dolazite u teretanu ili bazen.

Kvalitativna analiza za hepatitis C

Ostavite odgovor

Kvalitativna analiza lančane reakcije polimeraze - PCR za hepatitis C određuje prisutnost ili odsutnost HCV u tijelu. U laboratoriju se proučava struktura RNA, u kojoj će se virus locirati. Ako se otkrije virus C, potrebno je podvrgnuti tijeku liječenja, budući da zanemareno stanje jetre ima ozbiljne posljedice. Kvalitativno PCR se provodi nakon oporavka kako bi se potvrdilo odsutnost protutijela. Imenovan i za preventivni pregled. Uz nisku koncentraciju patogena u krvi, PCR (kvalitativni) ne može otkriti ništa, jer dijagnostički sustav ima prag osjetljivosti. U slučaju početne faze bolesti ili blagog oblika, PCR se u konačnici dijagnosticira s ultrazvučnom opremom.

Što je RNA virus?

Pojam RNA virusa hepatitisa C (ili virusa hepatitisa C virusa RNA) naziva se sam jetrena bolest. Virus C se veže na zdravu ćeliju tijela, prodirući unutra. Tijekom vremena, širenje po cijelom tijelu, to je samo doći u krv. Kao rezultat, patogen prodire u jetru, osigurava svoje stanice i naporno radi. Jetrene stanice (hepatociti) rade pod njegovim utjecajem, podvrgavaju se promjenama i od toga propadaju. Što duže virus C bude u jetri, više stanica umre. Tijekom vremena nastaju opasne bolesti koje dovode do maligne degeneracije i smrti.

Infekcija jetre s tom vrstom virusa ne može se na bilo koji način manifestirati izvana. Dugi niz godina ili desetljeća zaražena osoba osjeća se sasvim zdravo, a samo slučajni pregled najčešće otkriva patologiju. Kada donosi krv za hepatitis, ispituje se dio lanca RNA (ribonukleinske kiseline) koji je dio ljudskog gena (DNA). Rezultati laboratorijskih istraživanja ne bi trebali biti korišteni za samo-liječenje, jer to je samo indikator. Liječnik će odrediti točnu sliku i daljnju dijagnozu.

Kada završite: svjedočanstvo studije

Za potvrdu HCV je dodijeljena PCR analiza (lančana reakcija polimeraze). PCR studije pomažu pronaći patogeni materijal u strukturi RNA i propisati učinkovitu terapiju. Imenovan u sljedećim slučajevima:

• identifikacija znakova upale jetre;
• probira za prevenciju;
• ispitivanje osoba u kontaktu;
• dijagnoza hepatitisa mješovitog porijekla (definicija glavnog uzročnika);
• Određivanje razine aktivnosti reprodukcije virusa u kroničnom obliku;
• ciroza jetre;
• kako bi se odredila učinkovitost propisane terapije.

PCR studije određuje liječnik kako bi se utvrdilo učinkovitost tijeka liječenja hepatitisa.

Postoji kvalitativna i kvantitativna analiza PCR-a. Kvantitativno PCR pokazuje postotak RNA s nosačima virusa u krvi, a kvalitativno PCR upućuje na virusnu prisutnost ili odsutnost. Pozitivan pokazatelj kvalitete (prisutnost hepatitis C RNA) također zahtijeva kvantitativno istraživanje. Visoka razina koncentracije patogena hepatitisa C povezana je s rizikom prijenosa, tj. Kontaminacije drugih. Niska količina se bolje liječi. Količina RNA virusa u krvi nije povezana s intenzitetom bolesti. PCR analiza se također obavlja u slučaju interferonske terapije, kako bi se propisala trajanje i složenost liječenja.

Značajke kvalitativne PCR analize za hepatitis C

Imenuje kvalitativnu analizu s indeksom lančane reakcije polimeraze, svi pacijenti koji su imali antitijela u krvi za hepatitis C koji je bio bolestan i oporavio, treba ponovo uzeti test. Preporučljivo je da se testira na hepatitis B, a zatim, u slučaju pozitivnog zaključka, i hepatitis D. i kvalitativno analizirani reakatsiya treba provoditi u suradnji s drugim krvnim testovima. Analize će pokazati kompletnu sliku širenja virusa.

Iz rezultata ispitivanja vidjet će se samo pozitivan test za hepatitis C ili negativan, tj. Prisutnost ili odsutnost virusa. Ako se zaključak "detektira", virus je i nastavlja djelovati aktivno. Oznaka "nije pronađena" ukazuje na odsutnost virusa ili malu količinu virusa. Uz ovaj pokazatelj treba uzeti u obzir činjenicu da je analitička osjetljivost dijagnostičkih sustava različita, a RNA hepatitis C još uvijek može biti u krvi, ali se ne očituje u analizi.

Posebno osjetljiva metoda PCR ultra-hepatitisa C otkriva čak iu manjoj količini. Koristi se hibridizacijsko-fluorescentna studija koja je mnogo puta veća od standardnih PCR sustava. Metoda se koristi u nekoliko slučajeva:

• sumnja na skrivene oblike hepatitisa C;
• Pacijent nije potvrdio dijagnozu PCR, ali postoje antitijela;
• u slučaju oporavka;
• identificirati ranu fazu infekcije.

Povratak na sadržaj

Objašnjenje analize

Konačnu odluku u dijagnozi utječe PCR dekodiranje HCV-a, posebice, s ultrametodom. Glavni nedostatak ovog istraživanja je strog pridržavanje sterilnih uvjeta za uzorak i materijale. Malo odstupanje ponekad pokazuje netočne zaključke analitičara, komplicira dijagnozu i naknadnu terapiju. Analiza PCR-a za određivanje RNA virusa hepatitisa ne pokazuje uvijek sliku bolesti s povjerenjem, a ponekad se priznaju netočnosti, oba načina.

Dijagnosticiranje virusa hepatitisa preporuča se primjenjivanje sveobuhvatnog pregleda.

Norma indikatora

Odsutnost JgM antitijela na RNA u virusnom hepatitisu C smatra se normom u analizi lančane reakcije polimeraze. Istodobno, nalaz serološke analize ukazuje na prisutnost antitijela na virus C i to je također unutar granica norme. Kvalitativna definicija ne pokazuje intenzitet bolesti, samo otkriva uzročnik hepatitisa C u RNA. Takva analiza se ponavlja nakon tretmana kako bi se potvrdio stvarni oporavak.

odstupanja

Ako su JgM antitijela na HCV RNA prisutna, to ukazuje na razvoj infekcije. Bolest je akutna ili kronična, manifestira se u različitim fazama. Ako se bilježi smanjenje broja antitijela, analiza će pokazati postizanje rezultata liječenja tijekom oporavka. Postoje vrlo rijetki slučajevi lažnih pozitivnih nalaza u dijagnozi. Nalaze se kod žena tijekom trudnoće i kod osoba s drugim zaraznim bolestima.