ANF ​​320, homogeni tip

Dobar dan! Prije godinu dana kći (19) prebačen reaktivni artritis, akutni raektsiyu yersiniosis (certifikat, IgA su visoke, klinika je također tretirana u Nasonova SRI). U svezi s dijagnozom, svi popratni testovi su uzeti i pokazali liječniku. Protutijela na dDNA bile su 1.04; ANF ​​1: 320. Liječnik nije ništa rekao o tome. Godinu dana kasnije postao sam agitiran zbog ANF-a. Sada su svi ponovno registrirani, čekamo. Svi testovi (ukupna krv, c-reaktivni protein, cijela biokemija, urin) su normalni. Protutijela na dDNA 0.74. ANF ​​još nije spreman. Prije otprilike tri godine u ljeto na čelu bile su osip s koricama, bilo je mjesec dana. Postoji osjetljivost na sunce, možda postoji mjesto na prsima koje prolazi. Ne mogu se usredotočiti na život i raditi od uzbuđenja dok čekam ANF. Reci mi, molim te, što da radimo, u slučaju - ako je to pozitivno? Živimo ne u Moskvi, naši reumatolozi od prošle godine nemaju povjerenja. Ako hoćete li se liječiti - da ćemo ići u Moskvu. Hvala unaprijed!

Na usluzi AskRight dostupan je online liječenje reumatologa za bilo koji problem koji vas brine. Liječnici-stručnjaci obavljaju konzultacije tijekom cijelog dana i besplatno. Postavite svoje pitanje i dobiti odgovor odmah!

Antinuklearni faktor na HEp-2 stanicama

Metoda istraživanja pomoću ljudskih epitelialnih stanica HEp-2, koja omogućuje otkrivanje antinuklearnih antitijela, jedan je od markera sustavnih bolesti vezivnog tkiva.

Ruski sinonimi

ANF, antinuklearna antitijela, antinuklearna antitijela (ANA).

Engleski sinonimi

Antinuklearna antitijela (ANA), Hep-2 supstrat, ANA-Hep2, Fluorescentna protu-nuklearna detekcija protutijela (FANA).

Metoda istraživanja

Indirektna imunofluorescentna reakcija.

Koja biomaterija se može koristiti za istraživanje?

Kako se pravilno pripremiti za studij?

Ne pušite 30 minuta prije nego donirate krv.

Opće informacije o studiji

Određivanje antinuklearnog faktora (ANF) je "zlatni standard" za otkrivanje antinuklearnih antitijela (ANA) i dijagnoza autoimunih bolesti.

Patogeneza sustavnih bolesti vezivnog tkiva (NWST) usko je povezana s oštećenjem imunološkog sustava i povećanom proizvodnjom antitijela na strukture vlastitih stanica. Autoantitijela prema komponenti staničnih jezgra - antinuklearna antitijela - interakciju s nukleinskim kiselinama i proteina iz jezgre, citoplazme antigena, što se očituje upalnim promjenama u tkivima i organima, bol u zglobovima i mišićima, umor, teškim gubitkom težine, promjena na koži. ANA se nalaze u mnogim autoimunim bolestima, ali su najčešći za sistemski lupus erythematosus (SLE). ANA pojaviti u više od 90% bolesnika sa sustavnim bolestima vezivnog tkiva, to je trenutno opisano oko 200 vrsta, koje su ujedinjeni jednim imenom - antinuklearnih faktor.

Kod određivanja ANF metodom indirektne fluorescencije češće se koristi interleaved linija epitelnih stanica ljudskog gnijezda adenokarcinoma HEp-2. Hep-2 stanice su vrlo prikladni supstrati za laboratorijska ispitivanja, budući da imaju veliku jezgru i rastu u jednom sloju na naočalama. Ana se detektira kada se veže na intracelularne antigene HEp-2 stanica.

U istraživanju se stanice epitela HEp-2 uzgajaju na staklu, fiksiraju i inkubiraju razrijeđenom krvnom serumu pacijenta. Nakon odstranjivanja viška seruma, stanice se inkubiraju s antitijelima obilježenim fluoresceinom, zatim ponovno ispiru i ispituju fluorescentnim mikroskopom. Ovo određuje titar protutijela i vrstu luminescencije. Titar od više od 1: 160 smatra smislenim. U slučaju pogoršanja reumatskih bolesti ona prelazi 1: 640, au razdoblju remisije padne na 1: 160-1: 320. Što je više protutijela, to je titar veći. Po vrsti luminescencije može se ustanoviti antinuklearna antitijela koja imaju veliku kliničku važnost i određuju taktiku za daljnje ispitivanje pacijenta. Glavne su periferne, granularne (fine / durene), nukleolarne, centromerne i citoplazmatske vrste bojenja jezgre. Svaka vrsta luminescencije karakterizira vrlo karakteristična svojstva koja omogućuju razlikovanje jedne varijante od druge.

Homogena (difuzna) bojenja povezana je s prisutnošću protutijela na dvolančanu DNA, histone i karakteristično za SLE i lupus erythematosus.

Periferni sjaj je zbog periferne raspodjele kromatina u jezgri, povezan je s protutijelima na DNA i specifičan je za SLE. Ova vrsta luminescencije je važna za razlikovanje od bojenja nuklearne membrane koja se javlja u autoimunim bolestima jetre.

Najčešće se pojavljuje granulirano (muljevito, mrežno) bojanje i najmanje je specifično, otkriveno je u mnogim autoimunim bolestima. Autoantigeni u ovom slučaju su nukleoproteinski kompleksi u jezgri (Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B antigeni i PCNA).

Vrlo visoki ANF titri s velikim granuliranim tipom luminescencije često ukazuju na mješovitu bolest vezivnog tkiva.

Nuklearno (nukleolarno) bojenje je rezultat stvaranja antitijela na komponente nukleolusa (RNA polimeraza-1, NOR, U₃RNP, PM / Scl), otkrivena je kod skleroderme, Sjogrenove bolesti. ANA ponekad je povišena u endokrine bolesti (tip 1 dijabetesa, tiroiditis, hipertireoza, endokrinih sindrom višestruke), bolesti kože (psorijaza, pemfigus), trudnoću nakon transplantacije organa i tkiva bolesnika na hemodijalizi.

Centromerijska luminescencija pojavljuje se u prisutnosti protutijela na centromere kromosoma i karakteristična je za oblik sklerodermije - CREST sindrom.

Citoplazmatski tip luminescencije povezan je s protutijelima tRNA sintetaze, naročito s Jo-1, što je karakteristično za dermatomyositis i polimiositis. Ova vrsta bojenja se također određuje u prisutnosti protutijela na druge citoplazmatske komponente u autoimunom hepatitisu, primarnoj bilijarnoj cirozi.

Simultano otkrivanje različitih vrsta luminescencije ukazuje na prisutnost različitih tipova protutijela.

U zdravih osoba, može se naći melkogranulyarnoe sjaj na niskim, umjerenim ili visokim titra ANA, ali obično gruba i homogene vrste sjaj ne treba odrediti.

Ovisno o rezultatima procjene vrste luminescencije, razvijene su daljnje taktike liječenja bolesnika i dodatne studije koje određuju spektar ANA.

Za što se koristi istraživanje?

• Za dijagnosticiranje sustavnih bolesti vezivnog tkiva.
• Za diferencijalnu dijagnozu reumatskih bolesti.
• Procijeniti učinkovitost terapije za autoimune bolesti.
• Za praćenje napretka sustavnih bolesti vezivnog tkiva.

Kada se studija dodjeljuje?

• Uz simptome autoimune bolesti (produljena vrućica, bol u zglobovima, umor, gubitak težine, promjena u koži).
• Pri identifikaciji promjena koje su karakteristične za sustavne bolesti vezivnog tkiva (povećani ESR, razina C-reaktivnih proteina, cirkulirajući imunološki kompleksi).

Što znače rezultati?

Uzroci povećanja titra ANP na HEp-2 stanicama:

• Sustavni lupus eritematosus (u 95% slučajeva),
• dermatomiozitis / polimiositis,
• sistemska skleroderma (u 60-90% slučajeva),
• Sjogrenov sindrom (u 40-70% slučajeva)
• mješovita bolest vezivnog tkiva (Sharpeov sindrom),
• Raynaudov sindrom,
• discoid lupus,
• lupus erythematosus,
• reumatoidni artritis,
• nekrotirajući vaskulitis,
• infektivna mononukleoza,
• leukemija,
• maligne neoplazme (uglavnom limfom),
• teška miastenia gravis,
• infektivni endokarditis,
• kronični autoimuni hepatitis,
• primarne bilijarne ciroze jetre,
• tuberkuloza,
• pneumokonioza,
• intersticijska plućna fibroza.

Antinuklearni faktor (HEp-2)

Dragi bolesnici! Katalog analiza je trenutno u fazi ispunjavanja informacija i sam po sebi ne sadrži sve studije koje provodi naš centar. Granice Endokrinološkog centra obavljaju više od 700 vrsta laboratorijskih ispitivanja. Ovdje možete pronaći cijeli popis.

Provjerite podatke o troškovima usluga i pripremu za analizu pozivom (812) 344-0-344, +7 953 360 96 11. Poslije dostavljanja krvnih testova, imajte na umu troškove ograde biomaterial.

Spremno za registraciju: 0 analiza

• Istraživački kod: 331
• Vrijeme dovršetka: 5-6 dana (osim subote, nedjelje)
• Trošak analize 960 rub.

Metoda istraživanja pomoću ljudskih epitelialnih stanica - HEp-2, koja omogućuje identificiranje antinuklearnih protutijela koja se smatraju jednim od markera tzv. Sistemskih bolesti vezivnog tkiva.

Otkrivanje antinuklearnog faktora (ili ANF) je vrsta "zlatnog standarda" za otkrivanje antinuklearnih antitijela (ili ANA) i prepoznavanje autoimunih bolesti.

Patogenu mehanizmi sistemskih bolesti vezivnog tkiva (ili SZST) u odnosu na poremećaje u funkcioniranju imunosnog sustava i povećanu produkciju antitijela na vlastite strukture stanica. Takozvani autoantitijela protiv komponenti jezgre stanice - antinuklearnih antitijela - interakciji s nukleinskim kiselinama, proteinima, jezgre, citoplazme antigena, što dovodi do upalnih promjena u različitim tkivima, organima, bol u mišićima i zglobovima, s promjenama na koži, gubitak tjelesne težine, izraženo umorom. Antinuklearna antitijela su otkrivena u mnogim bolestima autoimune prirode, ali je najtipičnija za sistemski lupus erythematosus (SLE ili). ANA je registrirana s više od 90% osoba koje imaju NWFP; do danas je opisano oko 200 vrsta, ujedinjeno imenom "antinuklearni faktor".

Kada se indirektnom fluorescentnom metodom detektira antinuklearni faktor, češće se koristi interleavirana epitelna stanična linija humanog adrenokarcinoma (ili HEp-2). Njegove su stanice vrlo prikladne podloge za laboratorijska istraživanja, jer imaju relativno veliku jezgru i rastu u jednom sloju na staklu. Antinuklearni faktor detektira se kada se stvara veza s intracelularnim antigenom HEp-2 stanica.

U istraživanju, HEp-2 stanice se uzgajaju na staklu, podvrgavaju se fiksaciji i inkubiraju s razrijeđenim krvnim serumom pacijenta. Nakon uklanjanja suviška stanice su inkubirane sa serumskih protutijela, označen s fluoresceinom, što je polje ponovno isprana i zatim se proučavao upotrebom fluorescentnog mikroskopa, sa detekcijom na ovoj titra i vrsti luminiscencije. Dijagnostički se smatra značajnim više od 1: 160 titra. U slučaju akutne reumatske bolesti istitrira većim od 1: 640, kada se spušta remisija u rasponu od 1: 160 do 1: 320. Uz povećanje broja antitijela povećava se i titar. Vrsta luminescencije omogućuje uspostavljanje antinuklearnih ciljeva protutijela; to je važno iz kliničke točke gledišta i može odrediti taktiku za daljnje ispitivanje pacijenta. Emitiraju razne vrste bojanjem jezgre (npr periferne, granula, nucleolar, centromerni, citoplazmatske).

Za svaku vrstu luminescencije postoje vrlo karakteristične osobine koje omogućuju razlikovanje međusobno.

Homogeno bojenje (difuzno) povezano je s prisutnošću antitijela protiv dvostrukih lanaca deoksiribonukleinske kiseline (DNA), histona i inherentno je sistemskom crvenom i lupusu lijeka.

Periferna luminescencija je posljedica periferne raspodjele u kromatinskoj jezgri, povezana je s protutijelima protiv deoksiribonukleinske kiseline, specifične za sistemski lupus eritematosus. Ova vrsta luminescencije je važna za razlikovanje od obojenja jezgrene membrane koja se javlja u autoimunim patogenama jetre.

Granulirano bojenje se najčešće nalazi, je najmanje specifično, javlja se u mnogim autoimunim bolestima. Autoantigeni u ovom slučaju su nukleoproteinski kompleksi u jezgri (Sm, U1-RNP i neki drugi).

Vrlo visoki titri antinuklearnog faktora s velikim granuliranim tipom luminescencije često ukazuju na mješovitu bolest vezivnog tkiva.

Jezgre (ili nucleolar) bojenje je s obzirom na stvaranje antitijela protiv komponenti jezgricom (npr PHK polimeraza-1, NOR, neki drugi); nalazi se u slučaju sklerodermije, s Sjogrenovom bolesti. Formiranje antinuklearna antitijela u broju slučajeva raste u nekim endokrinim patologijama (kao što je dijabetes prvog tipa, upale štitnjače, hipertireoza, endokrinih sindrom višestruke), oštećenja kože (pemfigus, psorijaza), tijekom trudnoće, nakon transplantacije tkiva i organa, kod pacijenata na hemodijaliza.

Centromerijska luminescencija detektirana je u prisutnosti protutijela protiv centromera kromosoma; je karakterističan za određeni oblik skleroderme - takozvani CREST-sindrom.

Citoplazmatski tip luminescencije. Povezan je s antitijelima protiv tRNA sintetaze, javlja se u dermatomyositis, polimiositis. Ova vrsta bojenja je također otkrivena u prisutnosti protutijela protiv drugih komponenti citoplazme u slučaju autoimunog hepatitisa, s primarnom bilijarnom cirozom.

Istodobno otkrivanje različitih tipova luminescencije ukazuje na prisutnost različitih tipova protutijela.

U istraživanju zdravih pojedinaca, fine granulirane luminescencije mogu se otkriti u slučaju niskih, umjerenih ili visokih titara antinuklearnih antitijela, međutim, grube ili homogene vrste luminescencije ne bi trebalo otkriti.

Nakon vrednovanja vrste luminescencije određene su daljnje taktike liječenja, te se mogu provesti dodatne studije kako bi se pojasnio spektar antinuklearnih antitijela.

30 minuta prije uzimanja krvi pušenje prestane.

Postoje samo neki procesi, uvjeti i bolesti, u kojima je svrha ove analize prikladna.

Istraživanje antinuklearnog faktora (HEp-2) može se provesti kako bi se identificirale sistemske bolesti vezivnog tkiva (CSTD); s ciljem dijagnostičke diferencijacije reumatskih bolesti; za procjenu učinkovitosti trajnog liječenja autoimunih bolesti; pratiti tijek NWFP-a.

Ispod su samo neki mogući procesi, stanja i bolesti kod kojih je otkriven antinuklearni faktor (HEp-2). Treba imati na umu da rezultat istraživanja ne mora uvijek biti dovoljno specifičan i dovoljan kriterij za oblikovanje zaključka. Prikazane informacije ni na koji način ne služe svrsi samodijagnostičnosti i samo-liječenja. Konačnu dijagnozu utvrđuje samo liječnik u kombinaciji s rezultatima drugih metoda istraživanja.

Mogućih razloga za povećanje titra antinuklcarno faktora: Sustav eritemski lupus (SLE), sistemski sklerodermu, dermatomiozitis ili polimiozitis, miješane bolesti vezivnog tkiva (koja se naziva pomiješa bolest vezivnog tkiva), Sjogrenov sindrom, diskoidni lupus, Raynaudov sindrom, reumatoidni artritis, doza lupus, infektivna mononukleoza, nekrotizirajući vaskulitis, određene malignoma (npr limfom, leukemija), infektivni endokarditis, mijastenije gravis, primarne bilijarne ciroze, kronična auto imuni hepatitis, pneumokonioza, intersticijska plućna fibroza, tuberkuloza.

Čimbenici koji mogu utjecati na ishod studije

Lažno pozitivan rezultat - to može biti povezana sa sljedećim faktorima: dob starija od 60-65 godina istraživao (promatrana u 10-37% slučajeva); primjena brojnih lijekova koji mogu biti odgovorne za nastanak erythematosus lijeka (npr tiazidni diuretici, tetracikline, sulfonamide, streptomicin, rezerpin, kinidin, propiluratsil, prokainamid, primidon, fenitoin, fenilbutazon, penicilin, oralni kontraceptivi, metildopa, litijeve soli, izoniazid, hidralazin, grizeofulvin, soli zlata i brojni drugi). Lažno negativni rezultat može ponekad voditi glukokortikosteroide (npr prednizon, deksametazon, metipred).

U 5% svih slučajeva sistemskog lupus erythematosusa, moguće je dobiti negativan rezultat istraživanja (ANP-negativni sistemski lupus erythematosus). U takvim slučajevima, dijagnoza antitijela protiv SS antigena (Ro) je potrebna kako bi se razjasnila dijagnoza.

Pozitivan rezultat studije ne služi uvijek kao apsolutni dokaz prisutnosti autoimune bolesti. Dakle, u brojnim zdravih osoba (3-13%) titar antinuklearnog faktora je povećan i može doseći 1: 320.

Rezultati studije trebali bi se protumačiti zajedno s kliničkim podacima, kao is drugim laboratorijskim pokazateljima.

U slučaju dobivanja pozitivnog rezultata preporuča se odrediti specifičnost antinuklearnih protutijela imunoblotom.

Antinuklearni faktor: što analiza pokazuje

U medicini se razlikuju specifični uvjeti u kojima zaštitne stanice počinju napadati vlastiti organizam, autoimune bolesti. Većina tih bolesti pojavljuju se u kroničnom obliku i potencijalno su opasne jer mogu uzrokovati ozbiljne probleme u radu pojedinih organa i sustava. To često dovodi do invaliditeta i ozbiljnih posljedica.

Mogućnosti suvremene medicine su velike, a sve te promjene moguće je otkriti u ranoj fazi i početi s liječenjem u vremenu. Jedna od najčešćih studija koja se koristi za dijagnosticiranje ovih stanja je analiza antinuklearnih protutijela, skraćeno ANA.

opis

ANA analiza je najsigurnija metoda dijagnosticiranja sumnje na bilo koji autoimuni poremećaj, Općenito, to su bolesti vezivnog tkiva. Ali postoji i prisutnost protutijela u malignim procesima, infektivnim, itd.

Najveća osjetljivost protutijela na takve bolesti:

1. Sistemsko lupus eritematosus.
2. Reumatoidni artritis.
3. Bolesti Sjogren.

Te se stanice mogu naći iu oko trećini bolesnika s kroničnim hepatitisom.

Različiti čimbenici utječu na povećanje pokazatelja. Posebice, malarija, leukemija, infektivna mononukleoza i još mnogo toga.

Zajedno s otkrivanjem ANA tijekom studije, važno je procijeniti razinu takvih imunoglobulina kao IgA, IgM, IgG. Identifikacija ovih sastojaka u krvi kod bolesnika može ukazivati ​​na veću vjerojatnost razvoja reumatskih patologija i kolagenoza.

Ako odnos između sadržaja antitijela i simptoma nije identificiran, samo postojanje ANA u krvi označava izbor pravilnih taktika liječenja. Dugotrajno očuvanje visokih titara ukazuje na razočaravajuće stanje. Snižavanje ovih titara govori o remisiji patologije, mnogo rjeđe o neposrednoj smrti.

Međutim, ova protutijela mogu se otkriti u određenom postotku zdravih osoba, a ANF titri mogu ići izvan norme.

Oznaka za studiju

Liječiti rezultate Liječnik je pravo imunolog i bilo koji diplomski, ovisno o području lezije.

Indikacije za ovu studiju su:

1. Identifikacija sustavnih bolesti, kao i autoimunih poremećaja bez očitih simptoma.
2. Otkrivanje sistemskog lupus eritematosusa i njena kompleksna studija, odabir strategije liječenja.
3. Identifikacija lupusa lijekova.
4. Prisutnost određenih kliničkih simptoma, kao što su dugotrajna groznica bez ikakvog razloga, krhkost i nježnost u zglobovima, osip kože, bolovi u mišićima, visok stupanj umora.
5. Znakovi simptomatskih manifestacija mješovitih bolesti: bolesti kože i unutarnjih organa, konvulzivni uvjeti, povećani indeksi temperature.
6. Davanje lijekova za disopiramid, hidralazin i drugi.

Vrste ispitivanja

Postoje dva načina otkrivanja protutijela u krvi. Prva tehnika se naziva indirektna imunofluorescentna mikroskopija. U prisutnosti protutijela, oni će se vezati na specifične nuklearne antigene. Koriste se elementi koji se osvjetljavaju u posebnom svjetlosnom spektru. Pod mikroskopom postaje moguće identificirati vrstu luminescencije.

Više o tome što je miofascialni sindrom i kako se liječi pročitajte ovdje.

Ova metoda je prepoznata kao najbolji za određivanje vrijednosti antinuklearnih antitijela. Također, tehniku ​​je dobio i drugi naziv - lupus test-bendovi.
Druga metoda dijagnoze je enzimski imunoanaliza. Njezino značenje je da protutijela u krvi ulaze u odnos s antigenom i na kraju rješenje mijenja svoju sjenu.

Važno je naglasiti, taj pozitivan probir ne može biti jedini razlog za postavljanje dijagnoze.

Dodatna studija je obavezna, uz pomoć kojih je moguće odrediti bolest u ranoj fazi. U slučaju negativnog probira, može se pretpostaviti da nema kršenja. Međutim, to ne isključuje autoimune bolesti bolesnika.

Krv je darovana antinuklearnom faktoru zajedno s drugim analizama. Ali konačni rezultat utječe unos određenih lijekova i prisutnost patoloških stanja pacijenta u kroničnom i akutnom tijeku. Da biste rastavili sve ove trenutke, stručnjak će vam pomoći, tada će utvrditi ispravnu dijagnozu i savjetovati kako nastaviti dalje.

Tumačenje rezultata

Kvalitativnim istraživanjem mogu se dobiti sljedeći rezultati:

• niži od 0,9-negativnih, norm;
• vrijednosti od 0,9 do 1,1 - sumnjive;
• više od 1,1 - pozitivno.

Pacijenti često postavljaju pitanje: je li antinuklearni faktor 1: 160 normalan ili ne? Sve iznad ovog pokazatelja nadilazi normu.

Čitaj također: Kako liječiti epiduritis kralježnice

Također je vrijedno napomenuti da nepravilna priprema i neke nijanse mogu utjecati na rezultate:

1. Kršenje načela pripreme.
2. Nepridržavanje pravila algoritma injekcije od strane liječnika.
3. Prihvaćanje određenih farmaceutskih proizvoda.
4. Dijagnoza uremije također može iskriviti rezultate.

Pozitivna probir za antinuklearna antitijela može pokazivati ​​prisutnost takvih bolesti kao što su lupus, gušterače patologije, prisutnost funkcionalnih poremećaja štitnjače, bolesti jetre, Sjogrenov sindrom, pluća tkiva zglobova i više. Samo liječnik može tumačiti rezultate i propisati daljnje liječenje.

Tijekom dekodiranja ove studije, valja istaknuti da u slučaju negativnih vrijednosti, vjerojatnost da postoji bolest nije isključena.

Kako se detaljno primijeniti Alesan krema za zglobove ovdje opisan

Ako je screening za ta antitijela pozitivan bez pratećih simptoma, potrebno je proći temeljitije ispitivanje.

Kako se pravilno pripremiti za studij

Venska krv djeluje kao materijal za analizu.

Značajke pripreme:

1. Materijal je preuzet na prazan želudac. Nakon posljednjeg obroka mora proći najmanje 8 sati. Dopušteno je piti kvalitetnu filtriranu vodu bez plina.
2. Prije dva sata prije uzimanja krvi Isključene su pušenje i uporaba nikotinskih proizvoda.
3. Nekoliko dana prije izvršenja manipulacije Isključenje potrošnje alkoholnih pića i energije, zabranjeno je sudjelovati u teškom fizičkom radu.
4. Dva tjedna moraju biti u potpunosti isključivanje lijekova, naročito, hormona, antibiotika i drugih lijekova.
5. Za potvrdu studije važno je ponovite screening za dva tjedna.

Očekujte rezultate u roku od 48 sati nakon postupka. Moguće je primiti podatke u hitnom nalogu u roku od 3 sata.

zaključak

Iz ovog članka ste postali svjesni onoga što je krv uzeta za ANF analizu i što je to. Nisu sva protutijela mogu biti otkrivena u ovoj studiji zbog svoje obilja. Da bi se smanjila mogućnost pogrešnih rezultata, potrebno je provesti sveobuhvatnu studiju zajedno s drugim metodama.

Odsutnost visokih ANF titra ne znači da pacijent nema sustavne bolesti, baš kao što pozitivni rezultat ne može biti nedvosmisleni argument za dijagnozu.

Analiza krvi što je to

Antinuklearni faktor na HEp-2 stanicama

Antinuklearni faktor na HEp-2 stanicama

Metoda istraživanja pomoću ljudskih epitelialnih stanica HEp-2, koja omogućuje otkrivanje antinuklearnih antitijela, jedan je od markera sustavnih bolesti vezivnog tkiva.

ANF, antinuklearna antitijela, antinuklearna antitijela (ANA).

Antinuklearna antitijela (ANA), Hep-2 supstrat, ANA-Hep2, Fluorescentna protu-nuklearna detekcija protutijela (FANA).

Indirektna imunofluorescentna reakcija.

Koja biomaterija se može koristiti za istraživanje?

Kako se pravilno pripremiti za studij?

Ne pušite 30 minuta prije nego donirate krv.

Opće informacije o studiji

Određivanje antinuklearnog faktora (ANF) je "zlatni standard" za otkrivanje antinuklearnih antitijela (ANA) i dijagnoza autoimunih bolesti.

Patogeneza sustavnih bolesti vezivnog tkiva (NWST) usko je povezana s oštećenjem imunološkog sustava i povećanom proizvodnjom antitijela na strukture vlastitih stanica. Autoantitijela prema komponenti staničnih jezgra - antinuklearna antitijela - interakciju s nukleinskim kiselinama i proteina iz jezgre, citoplazme antigena, što se očituje upalnim promjenama u tkivima i organima, bol u zglobovima i mišićima, umor, teškim gubitkom težine, promjena na koži. ANA se nalaze u mnogim autoimunim bolestima, ali su najčešći za sistemski lupus erythematosus (SLE). ANA pojaviti u više od 90% bolesnika sa sustavnim bolestima vezivnog tkiva, to je trenutno opisano oko 200 vrsta, koje su ujedinjeni jednim imenom - antinuklearnih faktor.

Kod određivanja ANF metodom indirektne fluorescencije češće se koristi interleaved linija epitelnih stanica ljudskog gnijezda adenokarcinoma HEp-2. Hep-2 stanice su vrlo prikladni supstrati za laboratorijska ispitivanja, budući da imaju veliku jezgru i rastu u jednom sloju na naočalama. Ana se detektira kada se veže na intracelularne antigene HEp-2 stanica.

U istraživanju se stanice epitela HEp-2 uzgajaju na staklu, fiksiraju i inkubiraju razrijeđenom krvnom serumu pacijenta. Nakon odstranjivanja viška seruma, stanice se inkubiraju s antitijelima obilježenim fluoresceinom, zatim ponovno ispiru i ispituju fluorescentnim mikroskopom. Ovo određuje titar protutijela i vrstu luminescencije. Titar od više od 1: 160 smatra smislenim. U slučaju pogoršanja reumatskih bolesti ona prelazi 1: 640, au razdoblju remisije padne na 1: 160-1: 320. Što je više protutijela, to je titar veći. Po vrsti luminescencije može se ustanoviti antinuklearna antitijela koja imaju veliku kliničku važnost i određuju taktiku za daljnje ispitivanje pacijenta. Glavne su periferne, granularne (fine / durene), nukleolarne, centromerne i citoplazmatske vrste bojenja jezgre. Svaka vrsta luminescencije karakterizira vrlo karakteristična svojstva koja omogućuju razlikovanje jedne varijante od druge.

Homogena (difuzna) bojenja povezana je s prisutnošću protutijela na dvolančanu DNA, histone i karakteristično za SLE i lupus erythematosus.

Periferni sjaj je zbog periferne raspodjele kromatina u jezgri, povezan je s protutijelima na DNA i specifičan je za SLE. Ova vrsta luminescencije je važna za razlikovanje od bojenja nuklearne membrane koja se javlja u autoimunim bolestima jetre.

Najčešće se pojavljuje granulirano (muljevito, mrežno) bojanje i najmanje je specifično, otkriveno je u mnogim autoimunim bolestima. Autoantigeni u ovom slučaju su nukleoproteinski kompleksi u jezgri (Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B antigeni i PCNA).

Vrlo visoki ANF titri s velikim granuliranim tipom luminescencije često ukazuju na mješovitu bolest vezivnog tkiva.

Nuklearno (nukleolarno) bojenje je uzrokovano stvaranjem antitijela na komponente nukleolusa (RNA polimeraza-1, NOR, U3RNP, PM / Scl), otkrivena je kod skleroderme, Sjogrenove bolesti. ANA ponekad je povišena u endokrine bolesti (tip 1 dijabetesa, tiroiditis, hipertireoza, endokrinih sindrom višestruke), bolesti kože (psorijaza, pemfigus), trudnoću nakon transplantacije organa i tkiva bolesnika na hemodijalizi.

Centromerijska luminescencija pojavljuje se u prisutnosti protutijela na centromere kromosoma i karakteristična je za oblik sklerodermije - CREST sindrom.

Citoplazmatski tip luminescencije povezan je s protutijelima tRNA sintetaze, naročito s Jo-1, što je karakteristično za dermatomyositis i polimiositis. Ova vrsta bojenja se također određuje u prisutnosti protutijela na druge citoplazmatske komponente u autoimunom hepatitisu, primarnoj bilijarnoj cirozi.

Simultano otkrivanje različitih vrsta luminescencije ukazuje na prisutnost različitih tipova protutijela.

U zdravih osoba, može se naći melkogranulyarnoe sjaj na niskim, umjerenim ili visokim titra ANA, ali obično gruba i homogene vrste sjaj ne treba odrediti.

Ovisno o rezultatima procjene vrste luminescencije, razvijene su daljnje taktike liječenja bolesnika i dodatne studije koje određuju spektar ANA.

Za što se koristi istraživanje?

• Za dijagnosticiranje sustavnih bolesti vezivnog tkiva.
• Za diferencijalnu dijagnozu reumatskih bolesti.
• Procijeniti učinkovitost terapije za autoimune bolesti.
• Za praćenje napretka sustavnih bolesti vezivnog tkiva.

Kada se studija dodjeljuje?

• Uz simptome autoimune bolesti (produljena vrućica, bol u zglobovima, umor, gubitak težine, promjena u koži).
• Pri identifikaciji promjena koje su karakteristične za sustavne bolesti vezivnog tkiva (povećani ESR, razina C-reaktivnih proteina, cirkulirajući imunološki kompleksi).

Što znače rezultati?

Uzroci povećanja titra ANP na HEp-2 stanicama:

• Sustavni lupus eritematosus (u 95% slučajeva),
• dermatomiozitis / polimiositis,
• sistemska skleroderma (u 60-90% slučajeva),
• Sjogrenov sindrom (u 40-70% slučajeva)
• mješovita bolest vezivnog tkiva (Sharpeov sindrom),
• Raynaudov sindrom,
• discoid lupus,
• lupus erythematosus,
• reumatoidni artritis,
• nekrotirajući vaskulitis,
• infektivna mononukleoza,
• leukemija,
• maligne neoplazme (uglavnom limfom),
• teška miastenia gravis,
• infektivni endokarditis,
• kronični autoimuni hepatitis,
• primarne bilijarne ciroze jetre,
• tuberkuloza,
• pneumokonioza,
• intersticijska plućna fibroza.

Što je to tipično?

Za SLE, lupus erythematosus, sistemsku sklerodermu, kronični aktivni hepatitis

Za SLE, Sjögrenov sindrom, mješoviti bolest vezivnog tkiva, reumatoidni artritis

Za polimiozitis / dermatomiozitis, sklerodermu, Sjogrenov sindrom, SLE

Za CREST sindrom (kalcifikacija kože, Raynaudov sindrom, disfunkcija jednjaka, sklerodaktan, telangiektazija)

Za dermatomiozitis / polimiositis, autoimuna bolest jetre, primarna bilijarna ciroza

Što može utjecati na rezultat?

• Lazni pozitivni rezultat promovira:

• • dobi preko 60-65 godina (u 10-37% slučajeva);
  • primjena lijekova, što može dovesti do erythematosus lijeka (acetazolamid, karbidope, klorotiazid, klorpromazin, klofibrat, etosuksimid, soli zlata, griseofulvin, hidralazin, izoniazid, metildopa, litij, oralne kontraceptive, penicilin, fenilbutazon, fenitoin, prokainamid, propiluratsil, kvinidin, rezerpin, streptomicin, sulfonamidi, tetraciklini, tiazidni diuretici).

• Korištenje glukokortikosteroida (prednisolon, deksametazon, metipred) ponekad dovodi do lažnog negativnog rezultata.

• U 5% slučajeva SLE moguće je negativan rezultat ove analize (ANF-negativni SLE). U takvim situacijama, kako bi se razjasnila dijagnoza, potrebno je odrediti antitijela na SS antigene (Ro).
• Pozitivan rezultat ispitivanja nije apsolutni dokaz prisutnosti autoimune bolesti. U zdravih ljudi, u 3-13% slučajeva ANF titar je povišen i doseže 1: 320.
• Rezultati testa moraju se procijeniti zajedno s kliničkim podacima i ostalim laboratorijskim pokazateljima.
• Ako se preporuča pozitivan rezultat studije kako bi se odredila specifičnost ANA imunoblota.

• Protutijela na dvolančanu DNA (anti-dsDNA), screening
• Antitijela na nuklearne antigene (ANA), screening
• Protutijela na ekstrakcijski nuklearni antigen (ENA ekran)
• Protutijela na kardiolipin, IgG i IgM
• Antinuklearna antitijela (anti-Sm, RNP, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, cent-B, Jo-1, da histona, u nukleosomima, ribo P, AMA-M2), imunoblot
• Opći test krvi (bez leukocitne formule i ESR)
• Stopa sedimentacije eritrocita (ESR)
• Antistreptolizin O
• C-reaktivni protein, kvantitativno
• Reumatoidni faktor
• Cirkulirajući imunološki kompleksi (CEC)
• C3 komplement kompleks
• C4 komplement kompleks

Tko određuje studiju?

• Wilson D. McGraw-Hill Priručnik za laboratorijske i dijagnostičke testove 1. Ed Normal, Illinois, 2007: 55-57 str.
• Mariz HA, Sato EI, Barbosa SH, Rodrigues SH, Dellavance A, Andrade LE. Uzorak na antinuklearnom protutijelu - HEp-2 je kritični parametar za diskriminirajuće antinuklearnu antitijelo-pozitivne osobe i bolesnike s autoimunim reumatskim bolestima. Arthritis Rheum. 2011 Jan; 63 (1): 191-200.
• Kumar Y, Bhatia A, Minz RW. Antinuklearna antitijela i njihova metoda detekcije u dijagnostici bolesti vezivnog tkiva: put je ponovno pregledan. Diagn Pathol. 2009. 2. siječnja, 4: 1. PMID: 19121207 [PubMed].

Antinuklearni faktor na HEp-2 stanicama: studije u laboratoriju KDLmed

Metoda istraživanja pomoću ljudskih epitelialnih stanica HEp-2, koja omogućuje otkrivanje antinuklearnih antitijela, jedan je od markera sustavnih bolesti vezivnog tkiva.

ANF, antinuklearna antitijela, antinuklearna antitijela (ANA).

Antinuklearna antitijela (ANA), Hep-2 supstrat, ANA-Hep2, Fluorescentna protu-nuklearna detekcija protutijela (FANA).

Indirektna imunofluorescentna reakcija.

Koja biomaterija se može koristiti za istraživanje?

Kako se pravilno pripremiti za studij?

Ne pušite 30 minuta prije nego donirate krv.

Opće informacije o studiji

Određivanje antinuklearnog faktora (ANF) je "zlatni standard" za otkrivanje antinuklearnih antitijela (ANA) i dijagnoza autoimunih bolesti.

Patogeneza sustavnih bolesti vezivnog tkiva (NWST) usko je povezana s oštećenjem imunološkog sustava i povećanom proizvodnjom antitijela na strukture vlastitih stanica. Autoantitijela prema komponenti staničnih jezgra - antinuklearna antitijela - interakciju s nukleinskim kiselinama i proteina iz jezgre, citoplazme antigena, što se očituje upalnim promjenama u tkivima i organima, bol u zglobovima i mišićima, umor, teškim gubitkom težine, promjena na koži. ANA se nalaze u mnogim autoimunim bolestima, ali su najčešći za sistemski lupus erythematosus (SLE). ANA pojaviti u više od 90% bolesnika sa sustavnim bolestima vezivnog tkiva, to je trenutno opisano oko 200 vrsta, koje su ujedinjeni jednim imenom - antinuklearnih faktor.

Kod određivanja ANF metodom indirektne fluorescencije češće se koristi interleaved linija epitelnih stanica ljudskog gnijezda adenokarcinoma HEp-2. Hep-2 stanice su vrlo prikladni supstrati za laboratorijska ispitivanja, budući da imaju veliku jezgru i rastu u jednom sloju na naočalama. Ana se detektira kada se veže na intracelularne antigene HEp-2 stanica.

U istraživanju se stanice epitela HEp-2 uzgajaju na staklu, fiksiraju i inkubiraju razrijeđenom krvnom serumu pacijenta. Nakon odstranjivanja viška seruma, stanice se inkubiraju s antitijelima obilježenim fluoresceinom, zatim ponovno ispiru i ispituju fluorescentnim mikroskopom. Ovo određuje titar protutijela i vrstu luminescencije. Titar od više od 1: 160 smatra smislenim. U slučaju pogoršanja reumatskih bolesti ona prelazi 1: 640, au razdoblju remisije padne na 1: 160-1: 320. Što je više protutijela, to je titar veći. Po vrsti luminescencije može se ustanoviti antinuklearna antitijela koja imaju veliku kliničku važnost i određuju taktiku za daljnje ispitivanje pacijenta. Glavne su periferne, granularne (fine / durene), nukleolarne, centromerne i citoplazmatske vrste bojenja jezgre. Svaka vrsta luminescencije karakterizira vrlo karakteristična svojstva koja omogućuju razlikovanje jedne varijante od druge.

Homogena (difuzna) bojenja povezana je s prisutnošću protutijela na dvolančanu DNA, histone i karakteristično za SLE i lupus erythematosus.

Periferni sjaj je zbog periferne raspodjele kromatina u jezgri, povezan je s protutijelima na DNA i specifičan je za SLE. Ova vrsta luminescencije je važna za razlikovanje od bojenja nuklearne membrane koja se javlja u autoimunim bolestima jetre.

Najčešće se pojavljuje granulirano (muljevito, mrežno) bojanje i najmanje je specifično, otkriveno je u mnogim autoimunim bolestima. Autoantigeni u ovom slučaju su nukleoproteinski kompleksi u jezgri (Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B antigeni i PCNA).

Vrlo visoki ANF titri s velikim granuliranim tipom luminescencije često ukazuju na mješovitu bolest vezivnog tkiva.

Nuklearno (nukleolarno) bojenje je uzrokovano stvaranjem antitijela na komponente nukleolusa (RNA polimeraza-1, NOR, U3RNP, PM / Scl), otkrivena je kod skleroderme, Sjogrenove bolesti. ANA ponekad je povišena u endokrine bolesti (tip 1 dijabetesa, tiroiditis, hipertireoza, endokrinih sindrom višestruke), bolesti kože (psorijaza, pemfigus), trudnoću nakon transplantacije organa i tkiva bolesnika na hemodijalizi.

Centromerijska luminescencija pojavljuje se u prisutnosti protutijela na centromere kromosoma i karakteristična je za oblik sklerodermije - CREST sindrom.

Citoplazmatski tip luminescencije povezan je s protutijelima tRNA sintetaze, naročito s Jo-1, što je karakteristično za dermatomyositis i polimiositis. Ova vrsta bojenja se također određuje u prisutnosti protutijela na druge citoplazmatske komponente u autoimunom hepatitisu, primarnoj bilijarnoj cirozi.

Simultano otkrivanje različitih vrsta luminescencije ukazuje na prisutnost različitih tipova protutijela.

U zdravih osoba, može se naći melkogranulyarnoe sjaj na niskim, umjerenim ili visokim titra ANA, ali obično gruba i homogene vrste sjaj ne treba odrediti.

Ovisno o rezultatima procjene vrste luminescencije, razvijene su daljnje taktike liječenja bolesnika i dodatne studije koje određuju spektar ANA.

Za što se koristi istraživanje?

• Za dijagnosticiranje sustavnih bolesti vezivnog tkiva.
• Za diferencijalnu dijagnozu reumatskih bolesti.
• Procijeniti učinkovitost terapije za autoimune bolesti.
• Za praćenje napretka sustavnih bolesti vezivnog tkiva.

Kada se studija dodjeljuje?

• Uz simptome autoimune bolesti (produljena vrućica, bol u zglobovima, umor, gubitak težine, promjena u koži).
• Pri identifikaciji promjena koje su karakteristične za sustavne bolesti vezivnog tkiva (povećani ESR, razina C-reaktivnih proteina, cirkulirajući imunološki kompleksi).

Što znače rezultati?

Uzroci povećanja titra ANP na HEp-2 stanicama:

• Sustavni lupus eritematosus (u 95% slučajeva),
• dermatomiozitis / polimiositis,
• sistemska skleroderma (u 60-90% slučajeva),
• Sjogrenov sindrom (u 40-70% slučajeva)
• mješovita bolest vezivnog tkiva (Sharpeov sindrom),
• Raynaudov sindrom,
• discoid lupus,
• lupus erythematosus,
• reumatoidni artritis,
• nekrotirajući vaskulitis,
• infektivna mononukleoza,
• leukemija,
• maligne neoplazme (uglavnom limfom),
• teška miastenia gravis,
• infektivni endokarditis,
• kronični autoimuni hepatitis,
• primarne bilijarne ciroze jetre,
• tuberkuloza,
• pneumokonioza,
• intersticijska plućna fibroza.

Što je to tipično?

Za SLE, lupus erythematosus, sistemsku sklerodermu, kronični aktivni hepatitis

Za SLE, Sjögrenov sindrom, mješoviti bolest vezivnog tkiva, reumatoidni artritis

Za polimiozitis / dermatomiozitis, sklerodermu, Sjogrenov sindrom, SLE

Za CREST sindrom (kalcifikacija kože, Raynaudov sindrom, disfunkcija jednjaka, sklerodaktan, telangiektazija)

Za dermatomiozitis / polimiositis, autoimuna bolest jetre, primarna bilijarna ciroza

Što može utjecati na rezultat?

• Lazni pozitivni rezultat promovira:

• • dobi preko 60-65 godina (u 10-37% slučajeva);
  • primjena lijekova, što može dovesti do erythematosus lijeka (acetazolamid, karbidope, klorotiazid, klorpromazin, klofibrat, etosuksimid, soli zlata, griseofulvin, hidralazin, izoniazid, metildopa, litij, oralne kontraceptive, penicilin, fenilbutazon, fenitoin, prokainamid, propiluratsil, kvinidin, rezerpin, streptomicin, sulfonamidi, tetraciklini, tiazidni diuretici).

• Korištenje glukokortikosteroida (prednisolon, deksametazon, metipred) ponekad dovodi do lažnog negativnog rezultata.

• U 5% slučajeva SLE moguće je negativan rezultat ove analize (ANF-negativni SLE). U takvim situacijama, kako bi se razjasnila dijagnoza, potrebno je odrediti antitijela na SS antigene (Ro).
• Pozitivan rezultat ispitivanja nije apsolutni dokaz prisutnosti autoimune bolesti. U zdravih ljudi, u 3-13% slučajeva ANF titar je povišen i doseže 1: 320.
• Rezultati testa moraju se procijeniti zajedno s kliničkim podacima i ostalim laboratorijskim pokazateljima.
• Ako se preporuča pozitivan rezultat studije kako bi se odredila specifičnost ANA imunoblota.

• Protutijela na dvolančanu DNA (anti-dsDNA), screening
• Antitijela na nuklearne antigene (ANA), screening
• Protutijela na ekstrakcijski nuklearni antigen (ENA ekran)
• Protutijela na kardiolipin, IgG i IgM
• Antinuklearna antitijela (anti-Sm, RNP, SS-a, P-B, Scl-70, PM-Sci, PCNA, cent-B, Jo-1, histone, nukleosomi, ribo P, AMA-M2), imunoblot
• Opći test krvi (bez leukocitne formule i ESR)
• Stopa sedimentacije eritrocita (ESR)
• Antistreptolizin O
• C-reaktivni protein, kvantitativno
• Reumatoidni faktor
• Cirkulirajući imunološki kompleksi (CEC)
• C3 komplement kompleks
• C4 komplement kompleks

Tko određuje studiju?

• Wilson D. McGraw-Hill Priručnik za laboratorijske i dijagnostičke testove 1. Ed Normal, Illinois, 2007: 55-57 str.
• Mariz HA, Sato EI, Barbosa SH, Rodrigues SH, Dellavance A, Andrade LE. Uzorak na antinuklearnom protutijelu - HEp-2 je kritični parametar za diskriminirajuće antinuklearnu antitijelo-pozitivne osobe i bolesnike s autoimunim reumatskim bolestima. Arthritis Rheum. 2011 Jan; 63 (1): 191-200.
• Kumar Y, Bhatia A, Minz RW. Antinuklearna antitijela i njihova metoda detekcije u dijagnostici bolesti vezivnog tkiva: put je ponovno pregledan. Diagn Pathol. 2009. 2. siječnja, 4: 1. PMID: 19121207 [PubMed].

Antinuklearna antitijela. Opće informacije

AHA je heterogena skupina aAT koja reagira s različitim komponentama jezgre. Standardna metoda probira za određivanje ANA je posrednom imunofluorescencijom reakcija (NRIF) koristeći podloge od sekcije kriostatskih miša ili štakora (jetre bubrega), ili stanične linije Hep-2 (humani grkljana epitela raka stanica). Primjena standardiziranih Hep-2 stanica je poželjna, jer omogućava da se znatno povećati osjetljivost i precizno opisati različite vrste jezgre luminiscencije. Kada se ANA provodi metodom NERIF, tradicionalno se označavaju kao antinuklearni faktor (ANF).

ANF ​​je jedan od glavnih laboratorija za dijagnosticiranje sustavnih reumatskih bolesti. Studija ANF je vrlo koristan za dijagnozu SLE i SS, N i dijagnostike PM / mm, prognozu i za praćenje protoka juvenilni kronični artritis, i Raynaudov fenomen. Pozitivni rezultati određivanja ANF smatra obveznim dijagnostički kriteriji za eritematosus lijeka, bolest miješanog vezivnog tkiva (SZST), autoimuni hepatitis i dokazali dijagnostičku i prognostičku vrijednost u RA, multipla skleroza, bolesti štitnjače, infekcije, idiopatska trombocitopenijska purpura i fibromijalgije. Učestalost ANF detekcije povećava se s dobi, osobito kod žena.

Pacijenti s pozitivnim određivanje ANA preporučljivo izvođenje potvrdne testove - određivanje specifične pojedinačne ANA jezgri i u citoplazmi antigena (ds DNA, Sm, SS-A / Ro, SS-B / La, Scl-70, CHP) pomoću ELISA metode, IB, RID, RIA, i drugi.

Antinuklearni faktor (ANF, HEp-2) s definicijom vrste luminescencije (u krvi)

Antinuklearna antitijela (ANA, ANA, antinuklearna antitijela, faktor antinuklearna ANF) - Metoda NIF na stanične linije Hep-2 uz određivanje tipa emisije. - mjera autoimunih bolesti vezivnog tkiva. ANA skupina autoantitijela na proteine ​​i druge komponente (uključujući DNA) u jezgrama stanica. Glavne indikacije za primjenu: dijagnoza isključivanja - sistemski eritemski lupus (vjeruje se da je Ana se javljaju u 90% slučajeva SLE, drugim riječima, negativni rezultat s vjerojatnošću od 90% isključuje dijagnozu SLE), diferencijalna dijagnoza sistemske vezivnog tkiva (sistemski eritemski lupus, sklerodermija, nodularni periarteritis, dermatomyositis), kronični aktivni hepatitis.

Trenutno postoji više od 200 vrsta opisanih ANA usmjerena na nukleinske kiseline, proteini, histona staničnu membranu, spliceosome komponente, ribonukleoroteinov, jezgrama i centromerni proteina. Na taj način oni oštećuju vezivno tkivo, što je pridonijelo uvođenju definicije antinuklearnog faktora kao testa za sustavne bolesti vezivnog tkiva. Termin "antinuklearni faktor" podrazumijeva test za otkrivanje antinuklearnih antitijela indirektnom imunofluorescencijom.

Jedan od načina detekcije antinuklearna faktor u krvi (antinuklcarno antitijelo) je postupak indirektne imunofluorescencije primjenom seruma pacijenta na stanicama tkiva HEp-2 stanice ljudskog transplatabilni linija (stanice epitelnog grkljana linije karcinoma Hep-2 sadrži različitih nuklearnih antigena) korištenjem obilježenog konjugata s ljudskim protutijelima. Kao podloge mogu se koristiti i druge stanične linije ljudskih, ali zahvaljujući dobrom morfologije i jednostavnost uzgoja je Hep-2 linija postala priznata podloga imunofluorescenciji. Postupak detekcije Tan ANF razvijen 1982, koristeći kao supstrat za transplantaciju humanog epithelioid staničnu liniju Hep-2. Ova stanična linija izvedena iz ljudskog adenokarcinoma grkljana, je jedan od glavnih poliploidnih neorogovevayuschy ravni epitelnih stanica koje tvore monosloj na staklu. Pacijent serumi su inkubirani sa supstratom tkiva, pri čemu su antinuklearna antitijela iz seruma pacijenta (ako su prisutne), su povezane sa odgovarajućim nuklearnog antigena. Vezna mjesta autoantitijela otkrivena su pomoću anti-humanog seruma obilježenog s fluoresceinom. Rezultati za reakcije su ocijenjeni od strane mikroskopom pomoću fluorescentnog mikroskopa i vizualnu procjenu prirode svjetlucanja vezanih antitijela. Među prednostima Hep-2 (u odnosu na životinje tkiva kriosekcijama) mogu se navesti visoku učestalost diobe stanica koji omogućuje određivanje antitijela na antigene izražene samo u procesu diobe stanica, u odsutnosti stanica matriks tkiva, što ometa snimanje specifične luminescencije u odnosu na histološke zone. Kod nekih bolesti, kao što su SLE, sistemski skleroderme (sistemska skleroza), neke infekcije, imuni sustav vidi bolesnika jezgru (nuklearne proteine) vlastite stanice tkiva su vanjska i proizvodi antitijela na njih (antinuklearna antitijela - Aha). U tom slučaju oštećenja vezivnog tkiva, koji mogu olakšati provedbu antinuklcarno faktor koji određuje kao test za sistemskih bolesti vezivnog tkiva.

Pri tumačenju podataka treba imati na umu da AHA spektar uključuje veliku skupinu autoantitijela na DNA, nukleoproteine, histone, nuklearne ribonukleoproteine ​​i druge nuklearne komponente. Dakle, test ima za cilj otkrivanje različitih protutijela na komponente jezgre i citoplazme, koje su prvo otkrivene s SLE. Daljnji dijagnostički kriteriji za test su prošireni u vezi s otkrivanjem tih protutijela i ostalim bolestima vezivnog tkiva.

Testovi probira za određivanje ukupnog ANA obično koristi skup sljedećih antigena su glavne markera autoimunih bolesti vezivnog tkiva: SS-A (Ro), SS-B (La), BNP70, Sm, RNP / Sm, J01, centromere antigeni B. Osnovni, koji se koriste u suvremenim setovima za otkrivanje nuklearnih protutijela IgG klase, predstavljeni su sljedećim skupom:

1. 1. SS-A (Ro) - nuklearni ribonukleoproteini, (polipeptidi). Antitijela na njih se često otkrivena u sistemske skleroze (60% slučajeva), Sjogren sindrom (70%), a u SLE (30% slučajeva). Smatra se da li antitijela naći u krvi trudnica, to je pokazatelj rizika od povećanja novorođenčadi sindroma volchanochnopodobnogo u novorođenčeta (sindrom neonatalna lupus). Ta protutijela majke prolaze kroz placentu i uzrokuju oštećenje fetusa, što dovodi do hemolitičke anemije i trombocitopenije. Teške posljedice uključuju oštećenje sustava provođenja djetetovog srca (do konstantnog pacemakera). Uočeno je da kod žena koje su imale značajan titar protutijela tijekom trudnoće, bez očitih kliničkih znakova, nakon toga se razvija autoimuna bolest, uključujući SLE.
2. 2. SS-B (La) - nuklearni proteini. Njihova protutijela otkrivaju do 60% slučajeva Sjogrenovim sindromom iu 15% slučajeva SLE.
3. 3. Scl-70 je protein-enzim koji je uključen u razmjenu nukleinskih kiselina (topoizomeraza-1). Protutijela na ovaj protein su najspecifičnija u sustavnoj sklerodermi (do 70% slučajeva).
4. 4. Dvolančana DNA - izvorna DNA. Antitijela na DNA su najspecifičnija u SLE (do 80% slučajeva) i praktički nisu određena u reumatoidnom artritisu i sklerodermi.
5. 5. RNP / Sm - Kompleks RNP / Sm antigeni se sastoji od ribonukloproteine ​​U1-: U1-68, U1-A, U1-C, U5, U6; i također od Sm polipeptida: SmA |, SmB | B, SmD, SmE, SmF, SmG. Protutijela na te antigene su najspecifičnija za mješovite bolesti vezivnog tkiva - tj. u prisustvu simptoma sklerodermije, reumatoidni artritis, lupus, polimiozitis (oko 95%), te u manjoj mjeri za SLE (30% slučajeva).
6. 6. Jo-1-enzim-sintetaza aminoacil-transporta RNA. Autoantitijela na ovaj protein su dijagnostički značajna u miositisu (polimiozitis / dermatomyositis).
7. 7. CENP-B (centromeru) - Antitsetromernyh za detekciju protutijela (anti-pričvrsnica B), za dijagnosticiranje CREST sindrom-(sindrom aktivna kombinacija kože kalcinoza, Raynaud sindroma, jednjaka ljenost, sklcrodaktilija, telangiectasias). CREST sindrom se odnosi na varijantu sistemske skleroderme (sistemske skleroze). Ta antitijela u bolesnika s dokazima o povoljnom tijeku sustavne skleroze i razgovor o malom lezije unutarnjih organa.
8. 8. Hep-2 stanica - stanica ljudskog karcinoma grkljana linija epitelnog Hep-2, koja sadrži mnogo različitih nuklearnih antigena, uključujući antigen SS-A (Ro) i centromera antigena. Protutijela na hep-2 nalaze se u bolesnika s polimiozitisom i dermatomiozitisom do 90% slučajeva.
9. 9. Mitohondrija (PDC) - PDC - kompleks piruvat dehidrogenaze. Velika skupina Antimitiohondrijska antitijela su antitijela, koji su formirani na enzima kompleksa piruvat dehidrogenaze, koji se nalazi u mitohondrijima stanica i koji sudjeluju u oksidativnom dekarboksilacijom piruvata.

Često, ANA se nalazi u bilijarnoj cirozi.

AHA obično ne prodire u žive stanice i stoga je bezopasna. Ali ponekad nastaju kompleksi antigen-antitijela koji uzrokuju oštećenje tkiva (kao što je, na primjer, SLE, oštećenje bubrega). U vezi s uključenjem mnogih organa u patološkom procesu, dijagnostička vrijednost AHA definicije je mala i rezultati analize samo djelomično potvrđuju kliničke podatke.

Osim reumatskih bolesti, ANA se također nalazi u kroničnom aktivnom hepatitisu do 50% slučajeva. Pojava (niske titre) je moguća s upalnim bolestima, onkologijom i virusnim infekcijama.

• Usporedna učestalost otkrivanja antinuklearnih antitijela.