Antigen na HIV: što ona predstavlja, kakvu ulogu ima dijagnostika?

Dijagnoza virusa imunodeficijencije obavlja se na različite načine. Međutim, najpopularniji nedavno primljen ultra osjetljiv sustav za ispitivanje. Pomoću njihove pomoći, moguće je identificirati ovu bolest u najranijim fazama. Za to se koristi HIV antigen, čija je prisutnost u tijelu zajamčena da ukazuje na neugodnu i opasnu dijagnozu. Za detekciju se koristi nekoliko različitih studija.

Zašto je HIV 1, 2 antigen odgovor antitijela najpouzdaniji pokazatelj prisutnosti virusa imunodeficijencije?

Test za virus imunodeficijencije u javnim medicinskim ustanovama je besplatan. Ali se proizvodi u dvije faze u slučaju da je to potrebno. U početku HIV nije testiran na HIV. Prva analiza prisutnosti ili odsutnosti ove bolesti usmjerena je na otkrivanje protutijela. Ovo je ELISA test. Imunoenzimska analiza vam omogućuje prepoznavanje ljudi koji nisu sigurni da će biti zaraženi virusom imunodeficijencije (u slučaju da je test proveden u skladu s svim pravilima).

Također je uvjetno zaražena. Zašto uvjetno? Činjenica je da su protutijela na HIV 1,2, za razliku od AH ovog virusa, izlučena u tijelu i iz drugih razloga. O čemu točno razgovaramo. Prije svega, to je moguće s bolesti imunološkog sustava. U slučaju problema s ovim vitalnim sustavom, tijelo proizvodi protutijela kao zaštitu, koja se određuje enzimskim imunoenzimom, kao i one koji se pojavljuju u ovoj opasnoj bolesti. Ako se rezultat ELISA čini pozitivan, pacijent se upućuje na dodatnu studiju koja se temelji na otkrivanju reakcije AH-AT od 1,2 vrste. U klinikama se najčešće koristi imunološki blot. Ovo je najčešći tip analize za otkrivanje virusa imunodeficijencije. Uz pomoć, antigen i antitijela na HIV 1 i 2 nisu samo detektirani, već su testirani i na snagu reakcije.

Što je p24 antigen na HIV?

Prije nego što govorimo o metodama koje se mogu otkriti hiv ag antigenom HIV-a, treba objasniti što je on. Znanstvenici su dugo uspjeli saznati da je AH, koji je obilježen u oblicima analize i u laboratorijima označenim kao p24, retrovirus kapsid. Jednostavnim riječima, to je protein virusa imunodeficijencije. Određivanje HIV antigena je nemoguće bez detekcije protutijela prvog i drugog tipa. Uostalom, AH su jako vezani za antitijela. Oni su formirani u tijelu kao imuni odgovor na početak AT, koji su pak neki "intervencionisti" usmjereni na uništavanje imunološkog sustava i stvaranje opasnog biološkog materijala.

ATT i A za HIV od 1 i 2 tipova su otkriveni u reakciji jedni s drugima. Prvi ulogu stranih molekula u ljudskom tijelu. Ovo potonje služi kao vrsta razvijen od proteina ili polisaharida. U slučaju virusa imunodeficijencije, AH uzrokuje imuni odgovor. Prema tome, u medicini i znanosti povezani s proučavanjem ove bolesti, klasificirani su kao imunogeni.

P24 antigen HIV 1 i tipa 2 detektiran je samo kroz sveobuhvatnu studiju biološkog materijala. Najčešće se za analizu upotrebljava venska krv. U nekim slučajevima, to je prikladno za spermu ili sekretornu tekućinu koju luče ženski genitalni organi. Kombinirana analiza HIV antigena izvodi se na tri poznata načina. Koje su konkretne studije o kojima govorimo? Ovo je imunološki blot, kombinirani test (hiv combo HIV) i imunokemiluminescentna analiza. Svatko od njih treba raspravljati odvojeno.

Imunološki blot: antitijela i antigeni na HIV 1 i 2

Kao što je već gore spomenuto, imunološki blot je jedan od najčešćih testova koji otkrivaju antigen na HIV. Kako se to proizvodi? U početku pacijent uzima krv iz vena. Ispitivanje se obavlja na prazan želudac. Trideset i četrdeset minuta prije toga pacijentu se ne preporuča pušiti. Bit ove studije je da ako osoba ima virus imunodeficijencije tipa 1 ili tipa 2, reakcija antigen-protutijela je stabilna i nerješiva. Biološki materijal subjekta najprije se digestira u poseban reagens, a zatim stavlja na traku, koja je u pravilu blister s polistirenskim stanicama. Kao rezultat dodavanja posebnih reagensa, tehničar laboratorija prvo utvrđuje da li je određena reakcija, a potom uz pomoć ponovljenog pranja krvi, donosi zaključke o tome kako je stabilna. To nam omogućuje razumjeti postoji li virus u imunodeficijenciji u tijelu, što je u budućnosti najvažniji čimbenik dijagnoze.

HIV testiranje AG-AT, proizvedeno imunim blotom, preporučuje se da se daju najranije četiri do pet tjedana nakon navodne infekcije. Unatoč činjenici da je ovaj test sustav četvrte generacije, nije super osjetljiv i ima pogrešku od nekoliko posto (dva do tri).

Supersenzibilna analiza: hiv duo HIV (kombinirano) antitijela 1, 2 tipa

HIV test (hiv) ag-ab (AG-AT) kombinacija, za razliku od imunološkog blotiranja, je preosjetljiv. Stručnjaci iz područja medicine tvrde da je njegova uporaba preporučljiva već dva tjedna nakon navodne infekcije. Cilj je usmjeren na proučavanje specifičnih antitijela koja su vrsta imunološkog odgovora ljudskog tijela na intervencionisti kao što je virus imunodeficijencije, kao i AH p24. Hiv duo HIV antitijela tipa 1 i 2 također su usmjereni na otkrivanje protutijela na ovu opasnu bolest. Pomoću nje je moguće ne samo otkriti ih u krvi, već i odrediti vrstu bolesti.

Test kombinacije kombiniranog HIV antigena kombinira se. Uz pomoć, također se testira antigena i antitijela, što ukazuje na prisutnost strašne bolesti u tijelu.

Imunokemiluminescentna analiza: hiv 1,2 kombinirani HIV-AT-AG IHLA

HIV test za HIV je također preosjetljiv. U srcu takve istrage je vrsta reakcije AG-AT. Specifičnost metode je oko devedeset dva posto, dok je njegova pouzdanost od devedeset osam do devedeset devet. Iz toga se može zaključiti da postoji pogreška u takvoj analizi, ali je relativno mala. I, ako je potrebno, lako se preklapaju ponavljanim testiranjem. Ova analiza se koristi nakon dva ili tri tjedna nakon navodne infekcije.

Ovaj kombinirani test za HIV usmjeren je na proučavanje venske krvi, u slučaju provjere prisutnosti virusa imunodeficijencije u tijelu. Kada se identificiraju druge bolesti i patologije, koristi se urin ili sekretorna tekućina koja se oslobađa iz genitalnih organa. AT i AG na virus imunodeficijencije s IHL su također testirani na reakciju. Za to se koriste posebni reagensi i traka s ćelijama. Istraživanje provedeno u nekoliko faza omogućuje brzo i precizno utvrđivanje dijagnoze ili odbijanje.

Sve gore opisane metode dijagnosticiranja virusa imunodeficijencije kroz stabilnu reakciju AT-AG su djelotvorne. Razlikuju se samo u smislu dopuštenih uvjeta studije. Liječnik bi trebao odlučiti koja bi metoda trebala biti korištena.

P24 antigena u serumu

Ar p24 u serumu obično nema.

Ar p24 je protein HIV-nukleotidnog zida. Faza primarnih manifestacija nakon infekcije HIV-om posljedica je početka replicirajućeg procesa. Ag p24 pojavljuje se u krvi 2 tjedna nakon infekcije i može se otkriti pomoću ELISA tijekom 2 do 8 tjedana. Nakon 2 mjeseca od pojave infekcije, Ar p24 nestaje iz krvi. Nadalje, u kliničkom tijeku HIV infekcije, zabilježen je drugi porast sadržaja p24 proteina. Pada na razdoblje nastanka AIDS-a. Postojeći ELISA test kit za detekciju p24 Ag se koristi za rano otkrivanje HIV-a u krvi donora i djece, određivanje prognoze bolesti i praćenje terapije. ELISA postupak ima visoku osjetljivost analitičke koji omogućuje otkrivanje Ar p24 HIV-1 u serumu u koncentracijama 5-10 pg / ml i manje od 0,5 ng / ml HIV-2, i specifičnosti. Međutim, treba napomenuti da je sadržaj Ag p24 u krvi podliježe individualne varijacije, što znači da je samo 20-30% bolesnika mogu se prepoznati po ovoj studiji u ranom razdoblju nakon infekcije.

Protutijela na p24 Ag klase IgM i IgG u krvi pojavljuju se, počevši od 2. tjedna, dosegnuvši vrhunac u roku od 2-4 tjedna i čuva u različito vrijeme razini - IgM antitijela za nekoliko mjeseci, nestaje u roku od godinu dana od infekcije, Ig Ig može trajati godinama.

Pojava klasa AT u različitim fazama zaraze HIV-om prikazana je na slici.

Sl. Pojava klasa AT u različitim fazama infekcije HIV-om

Sl. Pojava klasa AT u različitim fazama infekcije HIV-om

Metode dijagnosticiranja HIV infekcije

Trenutačno nove dijagnostičke tehnologije omogućuju otkrivanje etioloških i patogenih uzroka mnogih bolesti te radikalno utječu na rezultate liječenja. Možda su impresivni rezultati uvođenja tih tehnologija u kliničku praksu postignuti na području imunologije i dijagnozi zaraznih bolesti.

Ispitivanje se temelji na sustavu imuno testom i analizom immunohemilyuminestsentnogo otkrivaju različite klase antitijela, koja značajno poboljšava kliničke informativne metode, analitička osjetljivost i specifičnost za dijagnosticiranje zaraznih bolesti. Valja napomenuti da su najznačajniji napredak u dijagnostici infekcija povezanih s uvođenjem u laboratorijskoj praksi metode lančane reakcije polimeraze, što se smatra „zlatni standard” u dijagnostici i procjeni učinkovitosti liječenja nekih zaraznih bolesti.

serum, plazma u krvi, stružu biopsija, pleuralni ili cerebrospinalna tekućina (CSF) za proučavanje različitih biološki materijal može se koristiti. U prvom redu, laboratorijska dijagnoza infekcije tehnika odnosi se na detekciju bolesti, kao što su virusni hepatitis B, C, D, infekcije citomegalovirusom, infekcije, spolno prenosive infekcije (gonorrheal, klamidija, mikoplazma, Ureaplasma), tuberkuloza, HIV-a i drugih.

HIV infekcija - bolesti uzrokovane virusom humane imunodeficijencije (HIV), dugo upornog u limfocitima, makrofagima, stanice živčanog tkiva, zbog čega razvija polako progresivno oštećenje imunološkog i živčanog sustava tijela, očituje sekundarnih infekcija, tumori, subakutni encefalitisa i druge patološke promjene.

Infektivni agensi - virus ljudske imunodeficijencije tipa 1 i 2 (HIV-1, HIV-2), - pripadaju obitelji retrovirusa, na podvrstu sporo virusa. Virioni su sferične čestice promjera od 100-140 nm. Virusna čestica ima vanjsku fosfolipidnu ljusku, uključujući glikoproteine ​​(strukturne proteine) s određenom molekularnom masom, izmjerene u kilodaltima. U HIV-1, to je gpl60, gpl20, gp41. Unutarnja ljuska virusa, oblaganjem jezgre, kako je predstavljeno sa proteini poznatih molekulskih masa - P17, p24, p55 (HIV-2 sadrži gpl40, gpl05, gp36, P16, P25, P55).

Sastav HIV genoma uključuje RNA i enzimsku reverznu transkriptazu (revertaza). Kako bi se genom retrovirusa povezao s genom stanice domaćina, sinteza DNA na matriksu viralne RNA javlja se prvo uz pomoć revertaze. Zatim je provirna DNA umetnuta u genom stanice domaćina. HIV ima izraženu antigensku varijabilnost značajno veću od one virusa influence.

U ljudskom tijelu glavni cilj HIV-a su T-limfociti koji nose najveći broj CD4 receptora na površini. Nakon ulaska HIV-a u stanice preko svog reverzne transkriptaze uzorkom sintetizira virus RNA DNK koji je integriran u uređaj za genetsku stanice domaćina (CD4 limfocita), te ostaje ima za život u stanju provirus. Osim T-limfotsitovhelperov pogođenih makrofaga, B limfocite, glija stanica sluznice crijeva i nekim drugim stanicama. Razlog za smanjenje broja T-limfocita (CD4 stanica) je ne samo izravno citopatogeni učinak virusa, već i na njihovo spajanje s neinficiranim stanicama. Uz lezijama T limfocita kod pacijenata s HIV-om je zabilježeno poliklonalnog aktivaciju B-limfocita s povećanjem sinteze svih klasa imunoglobulina, naročito IgG i IgA, i nakon toga osiromašeni imunološkog sustava kartice. Deregulacija imunih procesa također očituje povećanom razinom a-interferona, P2-mikroglobulin, smanjenje razine IL-2. Kao posljedica disfunkcije imunološkog sustava, posebno u smanjenju broja T-limfocita (CD4) na 400 stanica po 1 ml krvi ili manje, postoje uvjeti za nekontrolirano replikaciju HIV sa značajnim porastom broja viriona u različitim okolinama u tijelu. Kao rezultat poraza mnogih dijelova imunološkog sustava, osoba zaražena HIV-om postaje ranjiva na zarazne agense.

U pozadini povećane imunodepresije razvijaju se teške progresivne bolesti koje se ne javljaju kod osobe s normalno funkcioniranim imunološkim sustavom. To su bolesti koje je Svjetska zdravstvena organizacija (WHO) definirala kao marker AIDS-a ili bolesti indikatora AIDS-a.

AIDS-indikator bolesti

Prva skupina - bolesti inherentne samo u teškim imunodeficijencijama (CD4 razina 74.100 kopija / ml gotovo sve pacijente razvijaju kliničku sliku AIDS-a (Senior D., Holden E., 1996).

Vjerojatnost razvoja AIDS-a je 10,8 puta veća kod osoba s HIV-1 u krvi> 10,000 kopija / ml nego kod osoba s HIV-1 u krvi od 20,000 kopija / ml (PCR). Procjena rezultata antiretrovirusne terapije kod ljudi inficiranih HIV-om provodi se kako bi se smanjila razina HIV RNA HIV seruma.

S učinkovitom terapijom, razina viremije trebala bi se smanjiti 10 puta tijekom prvih 8 tjedana i biti ispod granice osjetljivosti metode (PCR) (

Tablica transkripta rezultata HIV testova

Posebna pažnja se trenutno odnosi na dijagnosticiranje virusa HIV (humane imunodeficijencije) kod ljudi. Otkrivanje bolesti u ranoj fazi pomoći će početku liječenja ranije i to će značajno utjecati na životni vijek pacijenta.

Nakon što je proveden HIV test, tumačenje rezultata obično je pozitivno ili negativno. U ovom slučaju, postoji primarna dijagnoza i sekundarna dijagnoza. U primarnoj - osoba provjerava pomoću IFA. Ako je potrebno, ponovite test krvi za HIV. Što znači pozitivan i negativan rezultat? Kako je učinjen transkript HIV testa? Zašto osoba koja nije narkoman i alkoholičar, ima redovite seksualne partner, prijepis analiza virusa imunodeficijencije je pozitivan, ali upitne rezultate?

O HIV-u

Uzročnici bolesti su iz prvog i drugog tipa. Dugog vremenskog razdoblja, njihova prisutnost u nekoj osobi prolazi neopaženo, tada imunitet prije svega utječe, onda drugi ljudski sustavi.

Glavna metoda laboratorijske dijagnoze virusa imunodeficijencije otkriva protutijela na HIV. Analiza imunoenzima (ELISA) temelj je metode, osjetljiva je (99,5% i više) i specifična (99,8% i više). Osim toga, kod dijagnosticiranja HIV-a s EIA, određuje se p24 antigen.

Svaki testni sustav ima različite pokazatelje, u vezi s tim određuju različite proteinske strukture virusnih omotnica. HIV patogeni su od dva podtipa: 1. i 2. ili HIV-1 i HIV-2. Virusne čestice izgledaju kao sferični oblik, koji ima vanjsku fosfolipidnu membranu. Za 1. podtip, ima sljedeću molekularnu masu: gp120, gp41, gp160. Drugi podtip sadrži gp105, gp36, gp140. Za unutarnju školjku virusa, poznata je i molekularna težina. Za prvi podvrstu ovo je p55, p17, p24. Za 2. - p16, p25, p55.

Za svaki testni sustav za određivanje virusa, postoje tri osnovna skupa proteina.

Općenito, rezultat ELISA može biti:

• negativni;
• lažno pozitivan;
• lažno negativno;
• upitna ili neizvjesna.

Metode dijagnostike identificiraju antigene, protutijela.

O normalnom rezultatu

Norm - što to znači? Kada je HIV test negativan, smatra se normalnim.

1. Najnovija generacija ELISA test sustava može odrediti prisutnost protutijela na HIV i bjelančevine. Ako je analiza normalna, krv ne nađe antitijela i proteinske čestice patogena. Ali to je točno reći da je osoba zdrava na temelju toga može biti, ako prije nego što ga predaju nije bilo rizika od infekcije za 3 mjeseca. Inače, opet nakon nekog vremena, morate ponoviti test.

Došlo je do slučajeva da je HIV otkriven tek nakon 6 mjeseci. Stoga, ako je rezultat negativan, a došlo je do kontakta s pacijentom zaraženim HIV-om, za pouzdanost je nužno ponoviti isporuku testova nakon tri, četiri i šest mjeseci. Događa se da je ELISA dala negativan rezultat, a osoba jasno sumnja na prisutnost znakova HIV-a, a zatim se preporučuje ponovni test. Pogrešan je rezultat moguće zbog ranog vremena analize ili zbog ljudskog faktora.

2. Ako je rezultat negativan kod imunoblota, tada je to sada najpouzdanija analiza.

Ako osoba ima virus imunodeficijencije, a rezultat je negativan, vjerojatno je to medicinska pogreška koja se može pojaviti u bilo kojoj fazi ispitivanja. Ako je rezultat imunoblota u tri i šest mjeseci negativan, onda se ne treba brinuti, to znači normu. I tek nakon negativnog odgovora iz imunoblota izdaje se potvrda da je HIV test negativan.

3. PCR istraživanje u odraslih osoba kod dijagnoze virusa imunodeficijencije koristi se vrlo rijetko, a ova metoda se koristi za novorođene djece.

Norm ovdje također se smatra negativnim rezultatom.

4. Prema sociološkim istraživanjima, mnogi ljudi koriste brzi test za HIV. Na vidiku negativnog trake ljudi se smiruju i odbijaju odlaziti u medicinsku ustanovu, čak i ako postoje svi znakovi zaraze HIV-om. Ali morate znati da točnost ekspresnog testa iznosi osamdeset pet posto. Pored toga, kod kuće možete ga krivo ponašati ili će se kršiti uvjeti njezine pohrane. I dalje postoji velika vjerojatnost da je rezultat netočan. Čak i uzimanje 8 sati prije ispitivanja mineralne alkalne vode utjecat će na rezultat ispitivanja. Dakle, činjenica da je ljudski virus imunodeficijencije odsutan u nekoj osobi na temelju ekspresnog testa, čak i ako je negativan, nikako nije uvijek istinita izjava.

Objašnjenje analize

Nakon testiranja, ljudi se često pitaju kako dešifrirati rezultat istraživanja, što učiniti ako se dobije pozitivan rezultat za HIV.

1. Ako je ELISA pokazala prisutnost svih ili gotovo svih protutijela na antigene prema ovom testnom sustavu, to ukazuje na pozitivan HIV test. Ako je odgovor nakon drugog immunoassay enzima u serumu pozitivan, treba provesti imunoblot. Dešifriranje njegovih rezultata bit će točniji. Ako je enzimski imunoanalizus dao pozitivan rezultat, sljedeća imunoblotska analiza također je pokazala prisutnost HIV-a, pa je konačni rezultat stavljen. Kada se analize dešifriraju, potrebno je znati da se određuje pozitivan HIV test:

• od 60% do 65% 28 dana nakon infekcije;
• u 80% - u 42 dana;
• u 90% - u 56 dana;
• u 95% u 84 dana.

Ako je odgovor na HIV pozitivan, to znači da se otkrivaju antitijela na virus. Da biste izbjegli pogrešan pozitivan odgovor, morate ponovno testirati, po mogućnosti dva puta. Ako antitijela na imunodeficijencije identificirati polaganja dvije analize dvaju ili vraćanja 3 testovima 2 od njih, smatra se da je pozitivan rezultat.

Antigen p 24 može se otkriti u krvi nakon 14 dana od dana infekcije. Koristeći metodu enzimskog imunološkog ispitivanja, ovaj antigen se detektira od 14 do 56 dana. Nakon 60 dana više nije u krvi. Tek kad tijelo oblikuje AIDS, ponovno raste rast ovog proteina p24 u krvi. Dakle, test sustav vezan imuno test koristi za otkrivanje HIV infekcije u prvih nekoliko dana ili tako, kako bi se utvrdilo kako nastaje bolest i praćenje procesa liječenja. Visoka osjetljivost analitičke imunoanaliza detektira p24 antigen u biološkom materijalu na prvom HIV podtipa u koncentraciji od 5 do 10 pg / ml, sa drugim HIV podtip od 0,5 ng / ml i manje.

2. Pod sporna ELISA rezultata značilo da je dijagnoza greške negdje, obično nešto zbunjen medicinskog osoblja ili osoba koja ima znakove infekcije, a rezultat je negativan, to je sumnjivo, čovjek poslan na ponovnu analizu promjena.

3. Lažni pozitivni rezultat je rezultat kada su uzeti krvni testovi u sljedećim uvjetima pacijenta:

• trudnoća;
• ako osoba ima hormonsku pozadinu;
• s produljenom imunodepresijom.

Kako dešifrirati analizu u ovom slučaju? Pozitivan je lažni pozitivni rezultat ako je otkriven barem jedan protein.

Zbog činjenice da je p24 antigen visoko ovisan o individualnim varijacijama, tada se u prvom razdoblju infekcije primjenjuje ova metoda, od 20% do 30% pacijenata.

Na parametre nakon lančane reakcije polimeraze

Koristeći ovu metodu, HIV RNA i DNA otkrivaju se gotovo odmah nakon infekcije. No, ne postoji konačna dijagnoza, ona se mora potvrditi drugim metodama. "Pomozite mi da dešifrirati rezultat PCR-a." - Vrlo često možete čuti takav zahtjev. Što je napisano u ovom slučaju ako se pronađe virus imunodeficijencije? Kao odgovor na rezultat analize učinjene PCR-om, indiciran je broj kopija RNA u mililitru krvi. Tablica u nastavku prikazuje rezultat, ovisno o kvantitativnim karakteristikama u krvi.

Što to znači: imate (nije otkrivena) protutijela na HIV

Jedna od najpouzdanijih studija o HIV-u je ELISA (enzimski imunoanaliza). Da bi se otkrila prisutnost virusa imunodeficijencije u krvi, provodi se testiranje antitijela. Trebam li se brinuti ako se ne pronađu? Što znači pozitivna ELISA?

Što su antitijela na HIV u krvi

Ako patogeni virus ulazi u ljudsko tijelo, imunološki sustav počinje proizvoditi protutijela na HIV. Kada se takve proteinske veze nalaze u ispitnom uzorku krvi, ovo je alarmni signal. Postoji velika vjerojatnost da je osoba zaražena opasnim virusom. Otkriveni HIV antigen p24 ukazuje da je došlo do infekcije virusom imunodeficijencije. Antigen je organska tvar. Količina se u krvi smanjuje dok tijelo proizvodi antitijela. Broj antitijela po jedinici krvi omogućuje vam predviđanje razvoja bolesti.

Druga važna karakteristika je virusni opterećenje (koncentracija virusnih stanica u 1 ml krvne plazme). Što je vrijednost ovog pokazatelja veća, to je jači imunološki sustav potisnut. Ne može spriječiti reprodukciju virusa.

Nakon tog vremena pojavljuju se protutijela na HIV

Imunoenzimska analiza za HIV se provodi 3 do 4 tjedna nakon moguće infekcije. To ranije čini besmisleno, jer protutijela još nisu formirana, ili premalo. Ako je došlo do infekcije i nema HIV antitijela u krvi, takav se test naziva lažno negativnim. Da biste stavili konačnu dijagnozu, primarna pozitivna reakcija HIV testova nije dovoljna. Ponovno je ispitivanje jamstvo pouzdanosti studija. Nova dijagnoza se izvodi nakon 3 mjeseca i nakon šest mjeseci. Ako su svi rezultati pozitivni, predviđeni su dodatni testovi.

Navedeni su izrazi prosječni. U svakom pojedinom slučaju, vrijeme je drugačije. Ako je dio zaražene biomaterijala, koji je ušao u unutarnje okruženje tijela, bio velik, zaštitni proteini - protutijela - mogu se formirati za tjedan dana. To je moguće uz transfuziju zaražene krvi. U 0,5% slučajeva HIV se može otkriti tek nakon jedne godine. To se događa kada je broj virusnih stanica vrlo mali.

Vrijeme kada se antitijela pojavljuju u tijelu zaražene osobe:

• u 90-95% slučajeva - 3 mjeseca nakon navodne infekcije;
• u 5 - 9% slučajeva, nakon 6 mjeseci;
• u 0,5 - 1% slučajeva - kasnije.

Stope pokazatelja za prisutnost protutijela

Protutijela ili imunoglobulini nastaju kada ini strani virusi i bakterije uđe u tijelo, kao i bilo kakve štetne organske spojeve. Za svaku virusnu stanicu postoji antagonist. Formirani su jedinstveni parovi: stranu stanicu + imunoglobulin. Nakon identificiranja protutijela prisutnih u tijelu, liječnici dobivaju informacije o virusima koji su izazvali njihovu pojavu. Imunoglobulini su podijeljeni u 5 skupina:

1. IgA - odgovorni su za imunološki oporavak zbog prehlade, upala kože, opće opijenosti;
2. IgE - dizajnirani su za borbu protiv parazita;
3. IgM je čuvar tijela. Oni "napadaju" virusne stanice čim uđu u krv;
4. IgD - dok je smjer njihove aktivnosti nepoznat. Takvi imunoglobulini nisu veći od 1%;
5. IgG - osigurava otpor u dugom tijeku bolesti, odgovoran je za zaštitu fetusa u maternici i glavna je prepreka protiv virusa kod novorođenčadi. Povećanje razine IgG u krvi može ukazivati ​​na razvoj HIV-a.

Normalni IgG (gigamol po litri)

Djeca od 7,4 do 13,6 g / l

Odrasli od 7,8 do 18,5 g / l

Kako bi se identificirale protutijela na HIV, provodi se kvantitativna analiza. Negativan rezultat je norma za zdravu osobu. Pozitivan test ukazuje na prodiranje u tijelo virusnih čestica protiv kojih se sintetiziraju zaštitni imunoglobulini.

Ako se u stupcu "antitijela" nalazi "+", još je prerano za sažetak, dodatne studije su zakazane. HIV infekcija nije uvijek uzrok pozitivne reakcije. Drugi uzroci abnormalnosti često se javljaju. Uzroci lažnih pozitivnih reakcija:

• U prvih 18 mjeseci života u krvi djeteta, sadržani su imunoglobulini primljeni od majke tijekom trudnoće;
• struja u tijelu autoimunih procesa;
• prisutnost reumatoidnog faktora;
• uzimanje lijekova.

Kvantitativna analiza pomaže u određivanju stanja bolesti. Ako je broj imunoglobulina neznatan, bolest se počinje razvijati. Predviđanja u ovom slučaju su povoljna. Visoka koncentracija zaštitnih bjelančevina može značiti da je HIV dosegao završnu fazu - AIDS.

Izolirajte HIV 1 i 2 vrste. Svaki od njih uzrokuje stvaranje određenih protutijela. Kvalitativna analiza pomaže u određivanju tipa protutijela. U obliku takvih testnih brojeva 1 i 2 su naznačeni, a podaci se pune ispred svakog od njih.

Kako protutijela na HIV

Serum se izolira iz dijela venske krvi. Primjenjuje se na čvrstu osnovu i kombinira se s virusnim stanicama. Zatim se površina obrađuje posebnim enzimima. U krvi, gdje su u početku prisutni virusi imunodeficijencije, nakon pranja nastaju protutijela.

Osoba koja mora dati krv za antitijela, dva dana prije analize treba odreći masnu i začinjenu hranu, ne piti alkoholna pića. Za 2 tjedna preporuča se prestati uzimati antivirusne lijekove. Bilo koji lijek treba konzumirati samo kada je apsolutno neophodan. Uoči testa, preporučuje se psihološki i fizički odmor. Analiza se provodi na prazan želudac ujutro. Istraživanja o prisutnosti antitijela prepoznata su kao najpouzdaniji u dijagnozi HIV infekcije. Pogreška nije veća od 2%.

Indikacije za ELISA, uključujući kliničke znakove HIV-a:

• trajno povraćanje zaraznih bolesti;
• produljena vrućica;
• visoka vjerojatnost infekcije (nezaštićeni seks ili transfuzija krvi iz HIV pozitivne osobe);
• hospitalizacija u bolnici;
• Doniranje krvi donacije;
• planiranje trudnoće i njezin tečaj;
• trauma s iglom ili drugim oštrim objektom zaraženim biološkim materijalom;
• prije operacije.

Znakovi HIV mogu se odmah pojaviti. U nekim slučajevima, bolest se ne osjeća jako dugo (do 10 godina). Ta činjenica sprječava pravodobnu dijagnozu i liječenje. Da bi prepoznali virus ljudske imunodeficijencije u vremenu, potrebno je proći testove na najmanju sumnju. Ako je dijagnoza potvrđena, identificirani su svi seksualni partneri zaraženih. Trebali bi uzeti testove i odrediti njihov HIV status. Medicinsko osoblje koje radi s pacijentima HIV-a mora proći zakazane provjere.

HIV / AIDS test - p24 antigen u krvi

Antigen p24 u serumu obično nema.

P24 antigen je protein HIV-nukleotidnog zida. Faza primarnih manifestacija nakon infekcije HIV-om posljedica je početka replicirajućeg procesa. Antigen p24 pojavljuje se u krvi 2 tjedna nakon infekcije i može se otkriti ELISA tijekom 2 do 8 tjedana. Nakon 2 mjeseca od pojave infekcije, p24 antigen nestaje iz krvi. Nadalje, u kliničkom tijeku HIV infekcije, zabilježen je drugi porast sadržaja p24 proteina. Pada na razdoblje nastanka AIDS-a.

Postojeći ELISA test kit za detekciju p24 antigena upotrebljava se za rano otkrivanje HIV-a u krvi donora i djece, određivanje prognoze bolesti i praćenje terapije. ELISA postupak ima visoku osjetljivost analitičke, omogućuje otkrivanje HIV-1 p24 antigen u serumu u koncentraciji od 5-10 ug / ml i manje od 0,5 ng / ml HIV-2, i specifičnosti. Međutim, treba napomenuti da su razine u krvi p24 antigena je predmet individualne varijacije, što znači da je samo 20-30% bolesnika mogu se prepoznati po ovoj studiji u ranom razdoblju nakon infekcije.

Antitijela na antigen p24 klase IgM i IgG u krvi pojavljuju se, počevši od 2. tjedna, dosegnuvši vrhunac u roku od 2-4 tjedna i zadržao se na razini različitim vremenima - IgM klase antitijela u nekoliko mjeseci, nestaje u roku od godinu dana od infekcije, i IgG antitijela mogu trajati godinama.

Protutijela na HIV 1 i 2 i HIV 1 i 2 antigen (HIV Ag / Ab Combo)

Protutijela na HIV 1 i 2 i HIV 1 i 2 antigen (HIV Ag / Ab Combo) - potpuni opis dijagnoze, indikacije za provedbu, tumačenje rezultata.

Protutijela na HIV 1 i 2 i HIV 1 i 2 antigen (HIV Ag / Ab Combo) - protutijela koja nastaju u tijelu kada su zaražena virusom humane imunodeficijencije.

Virus humane imunodeficijencije (HIV) član obitelji retrovirusa, šteti stanicama imunološkog sustava. Virus je od dvije vrste, HIV-1 je češći, a HIV-2 prevladava u afričkim zemljama.

HIV je ugrađen u ljudske stanice, virusne čestice se razmnožavaju, što rezultira pojavom antigena virusa na staničnoj površini, na koje se proizvode odgovarajuća protutijela. Njihovo otkrivanje u krvi omogućuje dijagnosticiranje HIV infekcije.

Identificirati protutijela virusu ljudske imunodeficijencije mogu biti tri do šest tjedana nakon što virus uđe u krv. Oštar porast virusa u krvi je karakterističan za stupanj primarnih manifestacija, ovo razdoblje pada na treći ili šesti tjedan od trenutka infekcije i naziva se "serokonverzija". U ovom trenutku, infekcija se može otkriti u laboratoriju, i klinički to ili se ne manifestira uopće, ili nastavlja kao hladna bolest s povećanjem limfnih čvorova.

Nakon 12 tjedana od vremena infekcije, antitijela se nalaze u gotovo svim slučajevima. U posljednjoj fazi bolesti, AIDS-a, broj antitijela se smanjuje.

U koje će vrijeme od trenutka infekcije biti otkrivene HIV infekcije, ovisi o testnom sustavu koji se koristi u određenom laboratoriju. Kombinirani testni sustavi četvrte generacije otkrivaju HIV zarazu dva tjedna nakon što virus uđe u krvotok. I testni sustavi prve generacije otkrili su HIV samo nakon 6-12 tjedana.

Kada se provodi kombinirana analiza, moguće je detektirati HIV antigen p24, koji je kapsid virusa. Određuje se u krvi nakon 1-4 tjedna nakon infekcije, čak i prije nego se povećava koncentracija antitijela u krvi (prije "serokonverzije"). Također, u kombiniranoj studiji, antitijela na HIV-1, HIV-2, dostupna su za dijagnozu dva do osam tjedana nakon infekcije.

Prije serokonverzije, i p24 i protutijela na HIV-1, na HIV-2 nalaze se u krvi. Nakon serokonverzije, antitijelo se veže na p24 antigen pa p24 nije otkriven i otkrivena antitijela na HIV-1 i HIV-2. Zatim se ponovno nalaze u krvi p24 i protutijela na HIV-1, na HIV-2. Kada osoba koja je zaražena HIV-om razvija AIDS, razvoj antitijela je razbijen pa se protutijela na HIV-1 i HIV-2 mogu odsutiti.

Dijagnoza zaraze HIV-om provodi se u fazi planiranja trudnoće i tijekom tekuće promatranje trudnica, jer HIV infekcija se može prenijeti s majke na fetus tijekom trudnoće, poroda i dojenja.

Indikacija za dijagnozu HIV-a

Random seks.

Vrućica bez objektivnih razloga.

Povećanje limfnih čvorova u nekoliko anatomskih područja.

Priprema za istraživanje

Test za HIV provodi se 3-4 tjedna nakon navodne infekcije. Ako je rezultat negativan, analiza se ponavlja nakon tri i šest mjeseci.

Od posljednjeg obroka do uzimanja krvi, vremenski interval treba biti veći od osam sati.

Uoči isključivanja iz prehrane masne hrane, nemojte piti alkohol.

Za 1 sat prije uzimanja krvi za analizu, ne možete pušiti.

Ne preporuča se donirati krv odmah nakon izvođenja fluorografije, radiografije, ultrazvuka, fizioterapijskih postupaka.

Krv je utrošena na ispitivanje ujutro na prazan želudac, pa čak i čaj ili kava su isključeni.

Dopušteno je piti običnu vodu.

Za 20-30 minuta prije studije, bolesniku se preporučuje emocionalno i fizičko odmaranje.

Materijal za istraživanje

Dekodiranje rezultata dijagnoze HIV-a

Analiza je kvalitativna. Ako se ne pronađu protutijela na HIV, odgovor je "negativan".

Ako se otkriju antitijela na HIV, analiza se ponovi s još jednim nizom testova. Drugi pozitivni rezultat zahtijeva imunoblot metodu, "zlatni standard" dijagnoze HIV-a.

norma: negativni odgovor.

1. Osoba nije zaražena HIV-om.
2. Terminalna faza zaraze HIV-om (AIDS).
3. Seronegativna varijanta HIV infekcije (kasnije formiranje protutijela na HIV).

Pozitivan odgovor.

1. Osoba je zaražena HIV-om.
2. Test nije informativan kod djece starijih od jedne i pol godine, rođene od HIV-om inficiranih majki.
3. Lažno pozitivan rezultat u prisutnosti protutijela u krvi u Epstein-Barr virus, glavni kompleks histokompatibilnosti, reumatoidni faktor.

Odaberite simptome koji vas zanimaju, odgovorite na pitanja. Saznajte koliko je vaš problem ozbiljan i trebate li vidjeti liječnika.

Prije korištenja informacija koje pruža medportal.org pročitajte uvjete ugovora o korisniku.

Korisnički ugovor

Stranica medportal.org pruža usluge na uvjete opisane u ovom dokumentu. Korištenjem web stranice, potvrđujete da ste pročitali uvjete ovog korisničkog sporazuma prije korištenja web stranice i prihvatili sve uvjete ovog ugovora u cijelosti. Nemojte koristiti web stranicu ako se ne slažete s ovim uvjetima.

Opis usluge

Sve informacije objavljene na web mjestu su od referentne prirode, informacije preuzete iz otvorenih izvora su referenca i nisu oglašavanja. Stranica medportal.org pruža usluge koje korisnicima omogućuju da traže lijekove u podacima dobivenim od ljekarni u okviru sporazuma između ljekarni i stranice medportal.org. Radi praktičnosti korištenja web stranice, podaci o lijekovima, dodatke prehrani sustavni su i dobivaju jedan pravopis.

Stranica medportal.org pruža usluge koje omogućuju korisniku da traži klinike i druge medicinske informacije.

Ograničenje odgovornosti

Podaci koji se nalaze u rezultatima pretraživanja nisu javna ponuda. Administracija stranice medportal.org ne jamči točnost, potpunost i (ili) relevantnost prikazanih podataka. Administracija stranice medportal.org ne snosi odgovornost za štetu ili štetu koju možete prouzročiti zbog pristupa ili nemogućnosti pristupa web-mjestu ili zbog korištenja ili nemogućnosti korištenja ove stranice.

Prihvaćanjem uvjeta ovog ugovora, u potpunosti razumijete i prihvaćate sljedeće:

Informacije na stranici su samo za referencu.

Administracija stranice medportal.org ne jamči odsutnost pogrešaka i odstupanja u vezi s prijavljenom na web mjestu i stvarne dostupnosti dobara i cijena robe u ljekarni.

Korisnik se obvezuje objasniti informacije od interesa za njega telefonskim putem u ljekarnu ili koristiti informacije koje su mu na raspolaganju.

Administracija stranice medportal.org ne jamči odsutnost pogrešaka i odstupanja u vezi s rasporedom rada klinika, njihovim kontaktnim podacima - telefonskim brojevima i adresama.

Niti administriranje stranice medportal.org, niti bilo koja druga strana uključena u proces otkrivanja informacija nije odgovorna za štetu ili štetu koju biste mogli podnijeti u potpunosti se oslanjaju na informacije navedene na ovoj web stranici.

Administracija stranice medportal.org se obvezuje i obvezuje se nastaviti poduzimati sve napore kako bi smanjili odstupanja i pogreške u pruženim informacijama.

Administracija stranice medportal.org ne jamči odsustvo tehničkih neuspjeha, uključujući i vezu s radom softvera. Administracija stranice medportal.org se obvezuje poduzeti sve moguće napore kako bi se uklonili propusti i pogreške u slučaju njihove pojave.

Korisniku je upozoreno da Administracija web stranice medportal.org nije odgovorna za posjete i korištenja vanjskih resursa, linkovi na koje se može sadržavati na web mjestu, ne daju odobrenje njihovog sadržaja i nisu odgovorni za njihovu dostupnost.

Uprava stranice medportal.org zadržava pravo obustaviti rad web stranice, djelomično ili potpuno promijeniti sadržaj, kako bi izmijenio Korisnički ugovor. Takve izmjene vrše se samo na temelju odluke Uprave bez prethodne obavijesti Korisniku.

Prihvaćate da ste pročitali uvjete ovog Korisničkog Ugovora i prihvatili sve uvjete ovog Ugovora u cijelosti.

Informacije o oglašavanju, za čije postavljanje na web stranicu postoji odgovarajući ugovor s oglašavačem, označen je "o pravima oglašavanja".

Antigen p24 što je to

Klinička i laboratorijska dijagnoza HIV infekcije ima tri smjera:

1. Utvrđivanje činjenice infekcije HIV-om, dijagnoza HIV infekcije.
2. Određivanje stupnja kliničkog tijeka bolesti i određivanje sekundarnih bolesti.
3. Prognoza progresije kliničkog tijeka bolesti, laboratorijsko praćenje učinkovitosti liječenja i nuspojave antiretrovirusnih lijekova.

1. Identifikacija HIV infekcije, dijagnoza HIV infekcije

Odrediti pomoću HIV infekcija sljedećim parametrima: HIV antitijela, virusne antigene, HIV proviralni DNA i RNA. Antitijela na HIV-a određena je enzimskom imunoanalizom (ELISA) ili imunoblot, koji je u biti vrsta IFA. Antigeni (proteini) HIV-a određeni su ELISA metodom. Koristeći molekularne genetske tehnika lančane reakcije polimeraze (NDP), a može se odrediti bDNK HIV proviralni DNA i RNA. Primjenom daljnji postupak hibridizacije nukleinske kiseline sa specifičnim DNA sonde može provjeriti specifičnost sljedova DNA dobivenih PCR. Osjetljivost PCR je otkrivanje virusnih gena u jednoj od pet tisuća stanica [27].

Kod primarne infekcije promatra se sljedeća dinamika markera HIV-a u krvi zaraženih osoba. U prvom mjesecu, kao rezultat aktivacije replikativni postupka nastaje oštar porast količine virusa (sadržaj u plazmi HIV RNK) i zatim, zbog masovne širenje virusa i infekciju ciljanih stanica u krvi i limfne čvorove, moguće određivanje proviralne DNA. Najvažnija dijagnostička vrijednost je činjenica otkrivanja DNA provirusa integriranog u genom ciljane stanice.

Virusna opterećenja odražavaju intenzitet replikacijskog procesa u zaraženim stanicama. Tijekom primarne infekcije, virusne razine opterećenja razlikuju se tijekom zaraze različitih podtipova HIV, ali dinamika njegovih promjena je približno isti. Tako, kada je zaraženo podtip B, na primjer, ako je prvi mjesec nakon izazivanja vrijednosti količine virusa u 700 kopija / ml, a zatim u 2. mjesecu je redukcija do 600, u 3 minute - 100, 4 min - 50 kopije / ml. Takva dinamika se promatra na pozadini povećanja sadržaja specifičnih protutijela na HIV u krvi. Sadržaj proviralne DNA u zaraženim HIV-om krvnih mononuklearnih karakterizira relativno konstantan tijekom prvih 6 mjeseci, uz manje oscilacije u pojedinim podtipovima. Dakle, opterećenja RNA i DNA nisu identična.

U fazi inkubacije, neko vrijeme, nikakva specifična protutijela na HIV nisu formirana u količini dovoljnoj za određivanje postojećih laboratorijskih metoda. Prije nego što su antitijela registrirana vrlo kratko vrijeme, pojavljuje se u krvi proteina Nef, koja je potisnuta replikacijskim procesom i strukturni protein p24. P24 antigen može se otkriti u krvi pomoću metode imunoenzimatske analize nakon 1-2 dana nakon infekcije i odrediti do 8. tjedna, tada se njegov sadržaj bitno smanjuje. Nadalje, u kliničkom tijeku HIV infekcije dolazi do drugog povećanja sadržaja krvi p24 proteina. Pada na razdoblje nastanka AIDS-a. Nestanak slobodnih (ne vezanih antitijela) proteina jezgre p24 i pojava specifičnih protutijela na HIV proteine ​​u krvi ukazuju na pojavu serokonverzije (Slika 9.6).

Viremija i antigenemija uzrokuju stvaranje specifičnih protutijela IgM klase (anti-p24, anti-gp41, anti-gpl120, anti-gp160). Besplatno razredi antitijela IgM i IgG na protein p24 može pojaviti počevši od 2. tjedna, njihov sadržaj je povećana u roku od 2-4 tjedna, dosegnuvši određenu razinu, koji traje mjesecima (IgM) i S (IgG) (Sl. 9.7).

Izgled kompletnog serokonverzije kada periferne krvi zabilježeno visoke razine specifičnih IgG antitijela klase na strukturne proteine ​​HIV p24, gp41, gp120, gp160, znatno olakšava dijagnozu infekcije HIV-om. Protutijela na HIV pojavljuju se u 90-95% inficiranih unutar 3 mjeseca nakon infekcije, u 5-9% - u razdoblju od 3 do 6 mjeseci od vremena infekcije i 0,5-1% - kasnije.

Unatoč činjenici da se na posljednjem mjestu pojavljuju protutijela na HIV, glavni laboratorijski dijagnostički indeks do sada je otkrivanje specifičnih protutijela pomoću ELISA i imunoblotiranja.

Podaci prikazani u tablici 9.2 [Vidi] i 9.3 [Vidi], vizualno pokazuju visoku osjetljivost suvremenih imunoenzimskih testnih sustava za otkrivanje protutijela na HIV, koja premašuje osjetljivost imunoblotiranja. U nekim slučajevima, pri dobivanju primarnog pozitivnog rezultata ELISA-e, može se potvrditi u imunoblotiranju tek nakon 2-3 tjedna.

U studiji zaraženih HIV-om (HIV) uz korištenje sustava za ispitivanje imunoupijač vodećih svjetskih tvrtki u svim slučajevima otkrivena antitijela na gp160 i P24 / 25 antitijela protiv drugih proteina nađenih u 38,8-93,3% slučajeva (tablica. 9.4 [Vidi] ).

Poteškoće antitijela za detekciju u pacijenata s HIV-om može se pojaviti za vrijeme razdoblja masovnog viremije i antigenemia kad postoje specifična antitijela u krvi koja je povezana s česticama virusa i replikativni postupak ispred vremena između novih antivirusnih antitijela. Takva se situacija može pojaviti i nestati tijekom infekcijskog procesa [15].

U bolesnika s početno oslabljenim imunološkim sustavom viremija i antigenemija pojavljuju se ranije i ostaju na visokoj razini prije ishoda bolesti. Kod tih bolesnika imaju nisku razinu slobodnih antitijela na HIV zbog dva razloga - nedovoljna proizvodnja antitijela pomoću B-limfocita i vezanje viriona i topivih proteina HIV antitijela, i time odrediti infekcije potreban test sustavu s povećanom osjetljivošću ili mijenjati metoda analize obuhvaća korake antitijela oslobađanje od imunoloških kompleksa [7].

Najčešće pad antitijela na HIV događa iz razloga navedenih u terminalnoj fazi, kada je HIV antitijela u serumu se ne mogu snimiti kroim ne postupcima imunološke ili metodom Western blot (immumoblotinga). Pored pojave specifičnih protutijela na HIV, imunološki odgovor u prvih 4 mjeseca karakterizira smanjenje sadržaja krvi inficiranog CD4 + - i povećanje CD8 + stanica. Nadalje, sadržaj stanica koje nose CD4 i CD8 receptore stabilizira se i ostaje nepromijenjen neko vrijeme. Povećanje sadržaja CD8 - limfocita je zaštitna reakcija jer stanice-ovisna cptotoxicity realizirana je s CD8 + limfocitima, koji su usmjereni na uništavanje HPV-inficiranih stanica. U početku, citotoksični limfociti (CTL) odgovoriti na regulatorni protein Nef virusa koji igra važnu ulogu u smanjenju virusne (RNA) opterećenje u HIV-plazme u prvim mjesecima. Tada se formira CTL odgovor drugima, uklj. strukturnih, na HIV proteine, kao rezultat toga, nakon 12 mjeseci nakon infekcije, citotoksični učinak je značajno povećan.

Sustavi laboratorijske dijagnoze HIV infekcije

S obzirom na dane dinamike specifičnih markera HIV infekcije u praksi, poželjno je pridržavati se sljedećih shema laboratorijske dijagnoze kod odraslih (Slika 9.8-9.10).

Dijagrami odražavaju tri glavne faze primarne laboratorijske dijagnoze HIV infekcije:

1. Screening.
2. Reference.
3. Stručnjak.

Potreba za nekoliko faza laboratorijske dijagnoze prvenstveno je posljedica ekonomskih razmatranja. Na primjer, trošak provođenja jednog stručnog ispitivanja pomoću imunoblotiranja uz pomoć domaćih testnih sustava iznosi do 40 američkih dolara, probira (ELISA metodom) je oko 0,2, tj. Omjer 1: 200.

U prvoj fazi (slika 9.8) ispitanici su testirani na protutijela na HIV pomoću jednog enzimskog imunoassay sustava dizajniranog za otkrivanje protutijela na obje vrste virusa - HIV-1 i HIV-2.

U predloženim ispitnim sustavima, proizvođačke tvrtke koriste antigensku osnovu virusni lizat, rekombinantne proteine, sintetičke peptide. Svaki od ovih nosača antigenskih determinanti HIV-a ima svoje vlastite zasluge i demere. Stoga, pri odabiru ispitnih sustava približno jednakih troškova, treba preferirati setove s najvećom osjetljivošću (po mogućnosti 100%). Među ispitnim sustavima jednakih troškova i osjetljivosti, poželjno je da se usredotočite na one koji imaju maksimalnu specifičnost.

Na osnovi lizata virusa stvoreni su prvi testni sustavi za laboratorijsku dijagnozu HIV infekcije. U 1980-im godinama takvi testni sustavi bili su karakterizirani osjetljivosti manjom od 100% i niske specifičnosti, koja se manifestira velikim brojem lažnih pozitivnih rezultata (do 60%).

Kada se virion formira u kulturi limfocita, njegova membrana se stvara iz vanjske membrane i stoga sadrži antigene glavnog kompleksa histokompatibilnosti klasa I i II. Ta okolnost uzrokuje lažne pozitivne reakcije ako su antitijela na histocompatibilnost allo-antigena prisutna u krvi pacijenata.

Kasnije, za virus je predloženo koristiti kulture makrofaga, u kojem se čestice virusa načinjen uglavnom ne intracelularno pupanjem iz vanjske stanične membrane i membrane endoplazmatski retikulum. Ta je tehnologija smanjila broj lažnih pozitivnih rezultata.

Jedan od najbolje od najvažnijih karakteristika - Osjetljivost i specifičnost - imuno-test sustava prepoznat, koji se koristi u sastavu pročišćenog virusnog lizata kombinaciji s sintetskih peptida koji predstavljaju dijelove antigenznachimye najviše proteine ​​ili rekombinantnih proteina.

Osjetljivost ispitnog sustava također ovisi o karakteristikama ostalih komponenti setova. Stoga, testni sustavi koji koriste konjugate koji prepoznaju antitijela ne samo IgG klase, već i IgM i IgA, omogućuju otkrivanje ranije faze serokonverzije. Primjena ispitnih sustava s kojima je moguće istodobno odrediti i antivirusna antitijela i p24 antigen je obećavajuća, što čini još ranije laboratorijsku dijagnozu HIV infekcije.

Primarni pozitivan rezultat trebao bi biti ponovljen ponovnim ispitivanjem uzorka u istom sustavu za ispitivanje, ali ponajprije drugom serijom i drugim laboratorijskim asistentom. Ako se tijekom drugog ispitivanja dobije negativan rezultat, studija se provodi po treći put.

Nakon potvrde pozitivnog rezultata, poželjno je ponovno uzeti krv i ispitati ga za antitijela na HIV kao primarnu. Ponovno uzimanje krvi može spriječiti pogrešku zbog netočnosti označavanja cijevi i popunjavanja obrazaca upućivanja.

Seropozitivna u fazi screeninga, krvni serum se šalje referentnim studijama provedenim koristeći dva ili tri visoko specifična ELISA test sustava. U slučaju dva pozitivna rezultata, eksperimentalna studija provodi se pomoću imunoblot metode.

Primjena u referentnim dijagnostičkim enzima imunološke sustave, koji se mogu koristiti za razlikovanje specifičnih antitijela na HIV-1 i HIV-2, olakšava daljnji rad i omogućuje da istraži pozitivnog uzorka u stručnoj stupnju odmah koristeći odgovarajući imunoblot (HIV-1 ili HIV-2),

Laboratorijsko mišljenje o HIV infekciji vrši se samo na temelju pozitivnog rezultata imunoblotiranja (Western blot). Prilikom obavljanja stručne dijagnostike nužno je koristiti nomenklaturu gena i genskih produkata HIV-a, koje je 1990. predložila Svjetska zdravstvena organizacija (WHO Expert Group) (Tablica 9.5 [Vidi] ).

Specifičnost bendova na imunoblot treba procijeniti vrlo pažljivo i temeljito, koristeći rezultate studije kontrolnih seruma (pozitivne i negativne), koji se održava paralelno sa studijem eksperimentalnih uzoraka i uzoraka imunoblot označeni HIV-proteina (isporučuje od strane proizvođača u ispitnom sustavu). Tumačenje rezultata treba provesti u skladu s uputama priključenim na ispitni sustav. Općenito, kriterij za pozitivnost obvezno prisustvo protutijela na dva proteina (prekursora, vanjske ili transmembranske) gena koji je kodiran pomoću env i moguću prisutnost antitijela na proizvodima druga dva strukturnih gena HIV - gag i pol (vidi tablicu 9.6. [Vidi] ).

U slučaju upitnih rezultata potrebno je koristiti popis preporuka za konačnu razjašnjenje imunobloting Rezultati (tablica. 9.7 [Vidi] ).

Prema preporukama ruskog znanstvenog metodološki centra za prevenciju i AIDS-a, smatra se da je pozitivan rezultat na prisutnost antitijela na najmanje jedan od proteina gp41, gp120, gp160, u kombinaciji s antitijelima na druge HIV-1 specifičnih proteina ili bez [10]. Ove preporuke temelje se na iskustvu sa serumima djece iz nosocomialnih fokusa, koji često određuju antitijela na samo jedan od proteina omotnice virusa.

Većina primarnih ispitan pomoću EIA seropozitivnih pacijenata odnosi faza persistiruyushey opću limfadenopatiju (PGL) ili asimptomatski faze. Stoga, u imunoblot (nitroceluloznu trake na kojoj se imobilizirane proteine ​​HIV) je određena u pravilu sljedeći kombinacija antitijela na HIV-1: The protutijela na omotnicu protein gp160, gp120 i gp41, kodiran s env gena, u kombinaciji s antitijelima na jezgre proteina p24 (proteinske nukleokapsid gen kodiran gag) i P31 / 34 (kodiran endonukleaze pol gena).

Pozitivne reakcije mogu se pojaviti samo kod gag i / ili ulog proteina u slučaju rane faze serokonverzije, a također ukazuju na infekciju uzrokovanu HIV-2 ili nespecifičnu reakciju.

U slučaju dobivanja sumnjivog rezultata, moguće je koristiti razne metodičke tehnike kako bi se pojasnio činjenica HIV infekcije.

Ovisno o tehničkim mogućnostima (dostupnost dijagnostičkih setova i reagensa, opreme specijalne opreme i obuke osoblja), stručni laboratorij obavlja dodatne dijagnostičke studije (slika 9.10).

U mnogim slučajevima, preporučljivo je koristiti molekularne genetske metode kako bi se utvrdile genetske sekvence HIV-a u serumu, limfocitima krvi ili limfnim čvorovima. Specifičnost DNA sekvenci dobivenih kao rezultat PCR može se provjeriti hibridizacijom nukleinskih kiselina s specifičnim DNA probama.

Metode za radioimunoprecipitaciju (RIP) i neizravnu imunofluorescenciju (IFN) također se mogu upotrijebiti za konačnu provjeru seruma sa upitnim rezultatima u imunoblotiranju [14].

Detekcija HIV RNA u plazmi kvalitativnom ili kvantitativnom metodom nije značajna za dijagnozu HIV infekcije. Takav rezultat treba potvrditi standardnim metodama, kao što je imunoblotiranje, 2-4 mjeseca nakon početnog upitnog ili negativnog odgovora.

Izolacija HIV-a u kulturi stanica je krajnja istina. Međutim, metoda je složena, skupo i provodi se samo u posebno opremljenim istraživačkim laboratorijima.

Sadržaj CD4 + - stanica u krvi je nespecifični pokazatelj, ali u slučaju spora (IFA „+” imunoblot „-”, prisutnost kliničkih znakova HIV / AIDS), može se koristiti kao vodič za izradu stručnjak odluku. Ako je u laboratoriju moguće izvršiti samo imunoblotiranje, tada slijedite preporuke navedene u tablici. 9.7 i na sl. 9.9.

Stručne osobe s studija seruma su dobiveni sumnjive (neodređene rezultate), osim što samo detekciju antitijela na P17 (HIV-1) ili p16 (HIV-2) treba proći ponovno ispitivanje za 6 mjeseci (nakon 3 mjeseca). U slučaju prave HIV infekcije nakon 3-6 mjeseci promatrati spektar antitijela „pozitivan” trend - dodatno obrazovanje antitijela na druge proteine ​​virusa. Zbunjujući reakciju karakterizira očuvanje za dugo vremena nesiguran imunobloting uzorka sumnjičav ili nestanka traka. Ako se nakon tog razdoblja ponovnog imunoblotiranjc će ostati negativan ili sumnjiv, onda odsustvo čimbenika rizika, kliničkih simptoma, ili drugih uvjeta povezanih s HIV infekcijom, osoba se može smatrati seronegativne za antitijela na HIV-1 i HIV-2.

Lažno pozitivni rezultati zbog sadržaja u krvi bolesnika protutijela za MHC alloantigens, koja je dio HIV omotnici, prikazani su u imunoblot u trake na gp41 i gp31 razini. Uzroci drugih nespecifičnih reakcija (na primjer, p24, koji se često nalaze kod pojedinaca s autoimunim procesima) još nisu razjašnjeni.

Poboljšanje tehnologije proizvodnje immunnofermentnyh sustava za ispitivanje da je moguće postići visoku osjetljivost - 99,99%, dok je osjetljivost metode imunobloting bio 97%. Stoga, negativni rezultat imunoblotiranja s pozitivnim rezultatima ELISA-e može ukazivati ​​na početno razdoblje serokonverzije, karakterizirano niskom razinom specifičnih protutijela. Stoga je potrebno ponoviti studiju u 1,5-2 mjeseca. To je duljina vremena potrebnog za dovršetak serokonverzije, postigla koncentracija u krvi specifičnih protutijela dovoljne za otkrivanje od strane imunoblotiranjc.

Pozitivni rezultat (a) studija na referencu, ili samo projekcije stadij laboratorijske dijagnoze infekcije HIV-om, tj pozitivan rezultat u bilo ELISA test sustavu, rezultat nije potvrđena od strane stručnih metoda, interpretira kao prisustvo u krvi subjekta unakrsne reakcije antitijela. Pod unakrsno reakciju antitijela uključuju ne-specifičnog vezanja na HIV proteina ili peptida da se koristi kao antigen u osnovama testnog sustava koji pozitivan rezultat.

U nedostatku imunodeficijencije i kliničkih znakova HIV infekcije, takve se osobe smatraju seronegativnim za antitijela na HIV i trebaju biti uklonjene iz registra.

Konačna dijagnoza infekcije HIV-om utvrđena je samo na temelju svih kliničkih, epidemioloških i laboratorijskih podataka. Kako bolesniku obavijestiti o dijagnozi HIV infekcije, samo liječnik koji ima pravo ima pravo.

Glavna metoda potvrđivanja (stručne) laboratorijske dijagnoze HIV infekcije je imunoblotiranje. Međutim, s obzirom na nižu osjetljivost u usporedbi s ELISA-om, brojni su istraživači predložili kombinaciju nekoliko testnih sustava kako bi konačno odredili prisutnost specifičnih protutijela na HIV. Na primjer, G. van der Groen i sur. [30] predložio je alternativnu imunoblotnu metodu za ispitivanje pozitivnih rezultata faze skeniranja laboratorijske dijagnoze HIV infekcije. To uključuje studija materijala paralelno u tri sustava za ispitivanje, koji se temelje na različitim metodama detekcije specifičnih antitijela na HIV (IFA nekoliko ostvarenja aglutinacijske) koristeći antigene različite prirode. Autori su uspjeli odabrati takve kombinacije testnih sustava, čija upotreba osigurava 100% osjetljivost i specifičnost u usporedbi s rezultatima dobivenim u imunoblotiranju.

Jeftinoća od metoda stručnog dijagnoza je prednost, ali je nedostatak informacija, na koje se primjenjuju posebna proteini virusa su antitijela u krvi pacijenta, ne dopušta za procjenu specifičnost reakcije u svakom slučaju, i pratiti promjene u spektru protutijela u ranim fazama serokonverzije.

Laboratorijska dijagnoza infekcije HIV-om kod djece rođenih od HIV-om inficiranih majki ima svoje osobitosti [24]. Od trenutka rođenja duljeg vremena (do 15 mjeseci) u krvi takve djece, majčinska protutijela na HIV mogu cirkulirati. Posteljice probiti barijeru samo imunoglobuline IgG klase, otkrivajući djetetove nmmupoglobulinov IgM i IgA klase HPV-specifične omogućuje potvrditi infekcije, ali negativni rezultat ne može ukazati na odsutnost HIV-a.

Kod djece mlađe od 1 mjeseca ne postoji replikacija HPV-a, a jedina metoda potvrđivanja je PCR. Određivanje p24 antigena kod djece starije od 1 mjeseca također je potvrda.

Nedostatak antitijela na HIV u novorođenčadi ne znači da virus nije prodro placentarnu barijeru. U svakom slučaju, djeca HIV-om inficiranih majki podvrgavaju se laboratorijsko-dijagnostičkom pregledu i promatranju 36 mjeseci od rođenja [10].

Rezultati laboratorijskih testova za markere HIV infekcije zahtijevaju pažljivu interpretaciju i trebali bi se uzeti u obzir samo u kombinaciji s epidemiološkim i kliničkim podacima. S druge strane, treba napomenuti da, unatoč visokoj osjetljivosti suvremenih metoda, negativni rezultati istraživanja ne mogu u potpunosti isključiti prisutnost infekcije HIV-om. Stoga, negativni rezultat studije, na primjer, imunoblotiranje, može se formulirati samo kao odsutnost specifičnih protutijela na HIV-1 i HIV-2.

Dijagnoza infekcije HIV-om u seronegativnim pacijentima

Kvaliteta testnih sustava koji se koriste u laboratorijskoj dijagnozi HIV infekcije, svake se godine poboljšava, njihova je osjetljivost povećana. Međutim, velika varijabilnost HIV-a može dovesti do pojave novih vrsta, antitijela na koja se ne mogu prepoznati postojeći testni sustavi. Osim toga, poznati su slučajevi atipičnog humoralnog odgovora imunog sustava organizma domaćina virusu. Dakle, L.Montagnier 1996. prijavio dva bolesnika s AIDS-om, koji je u zadnjih nekoliko godina nisu otkrivene u krvi specifičnih protutijela, dijagnoza se temelji na kliničkim podacima i potvrđeno laboratorijskim izolacije od samo HPV-1 u kulturi stanica. U takvim slučajevima, morate koristiti preporuku koji je, prema kojoj je klinička dijagnoza HIV infekcije u odraslih i djece je moguće ako je jedan od 12 AIDS-definiranje bolesti na:

1. Kandidijaza jednjaka, dušnika, bronha, pluća;
2. ekstrapulmonarna kriptokokoza;
3. kriptosporidioza s proljevom više od mjesec dana;
4. oštećenja citomegalovirusa bilo kojeg organa (s iznimkom i pored jetre, slezene i limfnih čvorova u bolesnika starije od 1 mjeseca):
5. infekcija uzrokovana virusom herpes simplex koji traje više od 1 mjeseca u bolesnika starije od 1 mjeseca;
6. limfom mozga kod pacijenta mlađe od 60 godina;
7. limfocitna intersticijska pneumonija kod djeteta mlađeg od 13 godina;
8. Dissiminirana infekcija uzrokovana bakterijama grupe Micobacterium avium intracellulare ili M. Kansassii;
9. pneumocistis pneumonija;
10. progresivna multifokalna leuko encefalopatija;
11. toksoplazmoza središnjeg živčanog sustava u bolesnika starije od 1 mjeseca.

Prisutnost jedne od ovih bolesti omogućuje dijagnosticiranje HIV infekcije u nedostatku mogućnosti provođenja laboratorijskog krvnog testiranja za prisutnost antitijela na HIV ili čak pri primanju seronegativnog rezultata.

1. Federalni zakon Ruske Federacije "O sprečavanju širenja u Ruskoj Federaciji bolesti uzrokovanog virusom ljudske imunodeficijencije" od 30. ožujka 1995.
2. Zmushko E.I., Belozerov E.S. HIV infekcija / Vodič za liječnike. - St. Petersburg: Peter, 2000. - 320 s.
3. Isakov VA Aspel YV, Bogoyavlenskii GV et al. Prethodna upotreba tsikloferona u liječenju HIV infekcije i AIDS infektsni / ručni vrachey.- SPB, 1997.- 60 str.
4. Kozhemyakin LA, Bondarenko IG, Tyaptin AA stečeni sindrom imunodeficijencije / priručnik za liječnike.- L.: Znanje, 1990.-112 str.
5. Lobzin Yu. V., Kazantsev AP Vodič za zarazne bolesti. - St. Petersburg, 1996. - 712 str.
6. Lysenko A.Ya., Turyanov M.X., Lavdovskaya M.V., Podolsky V.M. HIV infekcija i bolesti povezane s AIDS-om / Monografija.- M.: "Rarog" LLP, 1996, - 624 str.
7. Novokhatsky LS, Khlyabich GN teorija i praksa laboratorijske dijagnoze stečenog sindroma imunodeficijencije (AIDS). - M.: VINITI, 1992, - 221 str.
8. Pokrovsky VI, Pokrovsky VV AIDS: sindrom stečene imunodeficijencije.- M.: Meditsina, 1988. - 43 str.
9. Pokrovsky VI HIV-infekcija ili AIDS // Terapeut, arhitekt. - 1989. - T. 61, br. 11 - P. 3-6.
10. Pokrovsky V. V. HIV-infekcija: klinika, dijagnostika / Pod generalom. Ed. VV Pokrovskogo.- Moskva: GEOTAR MEDICINE, 2000.- 496 str.
11. Rakhmanova A.G. HIV infekcija (klinika i liječenje).- SPb: "SHA", 2000.- 367 str.
12. Preporuke za uporabu antiretrovirusnih lijekova kod odraslih i adolescenata zaraženih virusom humane imunodeficijencije // Consilium Medicum dopuniti. Siječanj 2000., - 22 str.
13. Smolskaya T. T., Leninskaya P. P., Shilova E.A. Serologicheskaya dijagnostika HIV infekcije / Metodološki priručnik za liječnike.- SPb, 1992.- 80 str.
14. Smolskal TT Drugo desetljeće života u uvjetima SPPD-a: lekcije i problemi / Zakon o govoru.- SPb., 1997. - 56 str.
15. Khaitov RM, Ignatieva GA AIDS.- M., 1992. - 352 str.
16. Connor S. Istraživanja pokazuju kako HIV ispušta tijelo // Brit. Mod. J.- 1995.-Vol. 310.-P. 6973-7145.
17. Burcham J., Marmor M., Dubin N. i sur. CD4 je najbolji prediktor razvoja AIDS-a u skupini HIV-infektivnih homoseksualnih muškaraca // J. AIDS.- 1991.- jN "9.- P.365.
18. Furlini G., M. Vignoli, Re MC, Gibellini D., Ramazzotti E., Zauli G.. La Place M. humani virus imunodeficijencije tipa I interakcija s membranom CD4 + stanica inducira sintezu nuklearne translokacije shock protein toplinskog 70k // J.Gen. Virol.- 1994.- Vol.75, str. 1.- P. 193-199.
19. Gallo R. C. Mehanizam indukcije bolesti HIV-om // J.AIDS.- 1990.-N3.- P. 380-389.
20. Gottlieb M. S., Schroff R., Schanker H. i sur. Pneumocystis carinii pneumonija i kandidijaza sluznice u prethodno homoseksualnom hormonu // Now England J. Med. - 1981. - Vol. 305. - P. 1425-1430.
21. Harper M. E., L. M. Marselle, Gallo R.C., Wong-Staal F. Određivanje lymfocytes eksprimiraju humani T-limfotropični virus tip III u limph čvorova i periferne krvi iz inficiranih pojedinaca in situ hibridizacija // Proc. Nat. Acad. Sci. U.S. S. 1986. Vol. 83.-N2-P. 772-776.
22. Hess G. Klinički i dijagnostički aspekti HIV infekcije Mannheim: Boehringer Mannheim GmbH, 1992.- 37 str.
23. Hu D.J., Dondero T.J., Ryefild M.A., et al. Nastala genetska raznolikost HIV / / JAMA.- 1996. - N 1.- P. 210-216.
24. Lambin P., Desjobert H., Debbia M. i sur. Serumski neopterin i beta-2-mikroglobulin u anti-HIV pozitivnim donatorima krvi // Lancet.- 1986.- Vol.8517. - P. 1216.
25. Maldonado I. A., Retru A. Dijagnoza pedijatrijske HIV bolesti // Baza znanja AIDS-a, Fd. Cohen P.T.; Sande M. A. Voiberding. 1994.- P. 8.2.1-8.2.10.
26. McDougal J. S., Kennedy M. S., Sligh J.M. et al. Vezanje HTLV-III / LAV u T4 + T stanica pomoću kompleks 110kA molekule i T4 molekule // Science.- 1985.- Vol.23.- P. 382-385.
27. Montagnier L., Gougeon M.L., Olivier R. i sur. Čimbenici i mehanizmi patogeneze AIDS-a // Znanost izaziva AIDS. Basel: Karger, 1992.- P. 51-70.
28. Paterlini P., Lallemant-Le C., Lallemant M. i sur. Lančana reakcija polimeraze za proučavanje majke do prijenosa HIV-I djece u Afriku // J. Med. Viro. - 1990.- Vol.30, N 10.- P. 53-57.
29. Polis M. A., Masur H. Predviđanje progresije u AIDS // Amor. J. Med. - 1990.- Vol.89, N.6- P. 701-705.
30. Roddy M.M., Grieco M. H. Povišena razina topivih IL-2 receptora u serumu HIV-inficiranih populacija // AIDS Res. Hum. Retrovir®. - 1988. - Vol. 4, br. 2 - P. 115-120.
31. Van Dor Groen. G., Van Kerckhoven I. i sur. Pojednostavljeni i jeftiniji, u usporedbi s tradicionalnim, načinom potvrđivanja HIV infekcije // Bull. WHO.- 1991. - T. 69, br. 6 - pp 81-86.

izvor: Medicinska laboratorijska dijagnostika, programi i algoritmi. Ed. prof. Karpischenko AI, St. Petersburg, Intermedika, 2001