Koristeći PCR dijagnostiku

Share Tweet Pin it

Polimeraza lančana reakcija (PCR) u molekularnoj biologiji naziva se eksperimentalna metoda detekcije virusa. Omogućuje značajno povećanje koncentracije određenih fragmenata nukleinske kiseline (DNA) u uzorcima biološkog materijala, što omogućuje određivanje (prepoznavanje) i brojanje njih.

Analiza se provodi kako slijedi. Genetski materijal (uzorak krvi), koji potencijalno može sadržavati željeni gen, uvede se u ispitnu epruvetu. Tu se također stavljaju primeri - kemijski sintetizirane male duljine željenog gena.

DNA ili RNA polimeraza se također dodaje u posudu, ona je u stanju izgraditi lanac nukleinskih kiselina koja je potpuno identična originalnoj. Skup od četiri slobodna nukleotida, posebni građevinski materijal za RNK ili DNA, od kojih jedan sadrži radioaktivne čestice fosfora, također se uvodi u rezultirajuću kompoziciju.

Rezultirajuća smjesa se zagrijava do 95-96 ° C, zbog čega se oba DNA helicama, koji su isprepleteni u uobičajenom stanju, razotkriveni. Zatim se priprema ohladi, u ovom trenutku početnice se pričvrste na željeno područje genoma virusa, bez da RNA (ili DNA) ponovo stvori dvostruku spiralu.

Tijekom hlađenja, polimeraza traži slobodan lanac nukleotida. Za funkcioniranje ovog enzima potreban je jedan lanac nukleotida. Jer polimeraze klizi duž lanca DNA (kao uže prsten), dvostruke spirale se ne može raditi.

Nakon toga se provodi ponovljeni ciklus grijanja, zbog čega se nukleotidni lanci razdvajaju. Za svaki od ovih ciklusa PCR, količina željenog hepatitisa u uzorku povećava se u geometrijskoj progresiji, a ostatak genetskog materijala linearno se proizvodi.

Nakon pročišćavanja otopine nukleotidnih ostataka i razdvajanja DNA lanaca parametrom molekularne težine iz elektroforeze, lako je odrediti da li željeni gen postoji u testnom uzorku ili ne.

Prednosti PCR

Laboratorijska studija koja koristi PCR metodu omogućuje dobivanje još više informacija nego jednostavno prisutnost RNA virusa. Prilikom određivanja parametra razine radioaktivnog zračenja, moguće je utvrditi koja je količina genetskog materijala u početku sadržana u uzorku koji se razmatra. U slučaju hepatitisa, odredite razinu viralnog opterećenja.

Druga prednost ove metode je vrlo visoka osjetljivost CR reakcije. To je puno veće od klasičnih metoda za otkrivanje virusa. U idealnom slučaju, da bi se identificiralo željeni gen, samo jedan virus u uzorku je dovoljan za PCR.

Osim toga, PCR je potpuno specifičan. Njegovi su primeri stvoreni na takav način da u potpunosti odgovaraju jedinim dijelovima željenih gena, koji nijedan drugi slijed nema. Oba otisaka prstiju su jedinstveni, au svakom od gena postoje jedinstveni slijedovi nukleotida.

Kvalitativna PCR analiza

Kvalitativna analiza otkriva samo prisutnost virusa u krvi. Taj bi test trebao biti proveden za sve pacijente za koje je utvrđeno da imaju antitijela na hepatitis C u krvi. Rezultat može biti samo jedna od dvije vrijednosti: "otkrivena" ili "nije otkrivena". U zdravih osoba norma (referentna vrijednost) ne smije biti "otkrivena".

Postoji i posebna interpretacija takvih rezultata provedenih kvalitativnih istraživanja:

  • Rezultat je "otkriven". To znači da je u uzorku biološkog materijala preuzeta je pronašao RNA ulomak koji je specifičan za hepatitis C virusom Prema tome, tu je i činjenica pacijenta s virusom hepatitisa B infekcije C. Ako je rezultat kvalitativne PCR je „otkrio”, to znači da virus replicira i u ovom trenutku inficira nove stanice jetre u tijelu.
  • Rezultat je "ne otkrivena". Kao presudi pokazuje da je u uzorku biološkog materijala dobivenog fragmenta RNA nije otkriven u laboratoriju, koji je specifičan za HCV RNA ili jednakom koncentracijom patogena infekcije u uzorku bio je ispod granice osjetljivosti testa.

U akutnoj fazi virusa hepatitis C virusom, kvalitativne studije primjenom PCR tehnike mogu se otkriti nakon 1-2 tjedna neposredno nakon infekcije tijela, tj. Dugo prije pojave antitijela na hepatitis.

Nepouzdani rezultati analiza takve istrage mogu se dobiti:

  • kontaminirana biomaterijala;
  • prisutnost heparina u krvi pacijenta;
  • prisutnost u uzorku kemijskih ili proteinskih supstanci (inhibitori) koji utječu na različite komponente PCR-a.

Za kvalitativnu analizu PCR, posebna priprema pacijenta za studij nije potrebna. Venska krv koristi se kao materijal.

Procjena rezultata

Kvalitativna PCR testa ima određeni stupanj osjetljivosti, a ovisno o točnosti istraživanja i razini opreme u laboratoriju može varirati između 10 i 500 IU / ml.

To znači da ako je prisutan u vrlo maloj koncentraciji virus uzorak krvi (manje od praga osjetljivosti laboratorija), a zatim bolestan ishod pacijent može definirati kao „ne detektira.” Zbog toga, kada se izvođenje kvalitativne analize PCR s niskim razinama viremije (virus niska koncentracija), na primjer, kod pacijenata koji se liječe antivirusne terapije, važno je znati, a prag osjetljivosti dijagnostičkog sustava.

Varijante dijagnostičkih sustava

Za kontrolu virološkog odgovora preporuča se antivirusno liječenje za korištenje dijagnostičkih sustava s pragom osjetljivosti od najmanje 50 IU / ml. Tih kriterija, na primjer: analizatore Cobas Ampicolor HCV (c točnosti od 50 IU / ml) i RealBest HCV RNA (s osjetljivošću od 15 IU / ml).

Prema preporukama SZO za uspostavljanje konačne dijagnoze hepatitisa C, mora se temeljiti isključivo na temelju trostrukog detekciju virusa RNA u uzorcima seruma iz pacijenta bez drugih vrsta markera hepatitisa.

Uz PCR metode, TMA ispitivanje (transkripcijska amplifikacijska metoda) također se koristi za otkrivanje HCV RNA kod bolesnika. Ona ima najbolji prag osjetljivosti (5-10 IU / ml), ali u našoj zemlji takva metoda testiranja još nije vrlo česta.

Raspon otkrivenih modifikacija virusa

Ovo kvalitativno određivanje seruma prisutnosti RNA virusa hepatitisa C omogućuje određivanje nekoliko genotipova ovog virusa. Trenutno, znanost zna više od šest genotipova ovog virusa, kao i oko 10 podtipova ove bolesti.

U našoj zemlji česti su virusi 1, 2, 3 genotipova. Laboratoriji mogu identificirati sljedeće genotipove: la i lb, 2a, 2b i 2c i 3, 4, 5a i 6, bez obzira na podtipove. Za sve izmjene virusa specifičnost detekcije je 100%.

Kvantitativna analiza PCR-a

Korištenjem kvantitativnog PCR testa određuje se razina koncentracije virusa hepatitisa u uzorcima krvi (viralni opterećenje). Ovaj test za viremiju (koncentraciju virusa) omogućuje određivanje broja jedinica specifičnog genetskog materijala (najviše viralne RNA), koji se detektira u određenoj količini. U tom slučaju, odredite njegovu koncentraciju u 1 ml, što odgovara 1 cu. cm.

Kvantitativni parametri analize su izraženi u brojkama, za ovu uporabu kao mjerne jedinice međunarodnih jedinica (IU) po mililitru (ml), označene kao ME / ml. Sada se u nekim laboratorijima količina virusa može odrediti u drugim jedinicama: broj kopija po ml, označen je kao kopija / ml.

  • Za hepatitis C, takva kvantitativna analiza PCR-a se obavlja neposredno prije početka terapije. Zatim na 1., 4., 12. i 24. tjedna. Procjena na 12. tjednu je indikativna, omogućuje određivanje učinkovitosti terapije.
  • Priprema za analizu. Za kvantitativnu analizu PCR-a nije potrebna posebna priprema pacijenta za ispitivanje. Pola sata prije uzorkovanja, ne smijete pušiti. Venska krv koristi se kao laboratorijski materijal.

Procjena rezultata

Za različite laboratorijske testne sustave, za ovaj pokazatelj postoje različiti faktori konverzije u IU / ml. U prosjeku se koristi parametar pretvorbe u kojem je 4 kopija / ml = 1 IU / ml. To je, na primjer, ako laboratorij daje rezultat PCR analize 2,4 x 10 6 kopija / ml, tada bi taj parametar trebao biti podijeljen s 4, a dobivamo 6 x 10 5 IU / ml.

Visoka razina opterećenja od 800.000 IU / ml smatra se visoka, što je približno jednako indeksu od 3.000.000 kopija / ml. Niža viremija, prema nekim autorima, odgovara parametrima kvantitativnog PCR ispod 400,000 IU / ml.

Kao rezultat kvantitativnog testa, konačni rezultati mogu biti isporučeni ne u obliku digitalne vrijednosti, već: "ispod mjernog raspona" ili "nije detektirano".

  • Procjena: "ispod mjernog raspona". To ukazuje da kvantitativni test nije uspio otkriti viralnu RN hepatitis C, ali sam virus prisutan je u tijelu u vrlo malim koncentracijama. Ovo je indicirano dodatnim kvalitativnim testom, koji potvrđuje činjenicu prisutnosti virusa.
  • Procjena: "nije otkrivena". Ovaj rezultat pokazuje da kvantitativni test nije detektiran virus u uzorku RNA.

Parametar viralnog opterećenja, prije svega, određuje stupanj infektivnosti bolesti, razinu "infektivnosti" pacijenta. Što je koncentracija virusa veća, to je veća vjerojatnost prijenosa podataka na druge ljude. Na primjer, kada se seksate s bolesnom osobom ili vertikalnom stazom. Takav kvantitativni pokazatelj također pomaže u određivanju učinkovitosti pacijentovog liječenja.

Provođenje kvantitativne analize PCC-a važno je za antivirusnu terapiju, vrednovanje njegovog uspjeha i raspoređivanje trajanja tečaja. Dakle, s brzim odzivom tijela na liječenje i niskim stupnjem viremije, trajanje terapije može se smanjiti.

S polaganim smanjenjem kvantitativnog parametra PCR, antivirusna terapija treba biti proširena ili modificirana. Ako je razina viralnog opterećenja niska, onda je to povoljan faktor terapije, ako je visok, onda je primijenjena metoda liječenja nedjelotvorna, a lijekove ili metode njihove upotrebe treba mijenjati.

Učinkovitost PCR metode: dijagnoza infekcija

PCR - dijagnoza infekcija, moderna i vrlo precizna metoda otkrivanja različitih zaraznih bolesti. Što se razlikuje od ostalih testova?

PCR studija: glavne prednosti

Ova kratica označava "lančanu reakciju polimeraze". Kao što kaže Wikipedija, 1983 je izumio američki znanstvenik Cary Mullis. Za svoje otkriće dobio je Nobelovu nagradu.

Za neko vrijeme, PCR se koristio samo u znanstvene svrhe, nakon što je uspješno posudio lijek. Bit ove studije jest prepoznati uzročnik infekcije na razini DNA i RNA. Svaki patogen, uvodeći u DNK, mijenja strukturu prema određenom tipu. Oblik promijenjene DNK postaje jasno laboratorijskom pomoćniku što je bolest skriveno u ljudskom tijelu. Među ostalim prednostima PCR-a:

  1. Identifikacija korijena uzroka infekcije, koja je ostavila "tragove" u DNA. S kombinacijom nekoliko bolesti, teško je identificirati onaj sa kojim je sve počelo. A za ispravnu dijagnozu i odabir učinkovitog tretmana, lančana reakcija je od ogromne važnosti;
  2. Na PCR-u se uspostavlja ne samo promijenjena DNK, već i određeno područje transformacije. To je neophodno kako bi se uklonile sumnje o lažnim infekcijama;
  3. PCR dijagnoza je tako osjetljiva da otkriva čak i pojedine bakterije i viruse. Oni mogu ostati u krvi nakon nepropisno propisane terapije ili neplaniranog prekida lijekova. Minimalno dijagnosticirana količina kod dekodiranja PCR-10 stanica-patogena. Druge metode ispitivanja nisu toliko učinkovite;
  4. Patogeni mikroorganizmi se nalaze čak iu odsustvu ozbiljnih simptoma spolno prenosivih bolesti. Otkrivena u ranoj fazi takve bolesti tretira se ne toliko dugo kao zanemareni oblici;
  5. Rezultati PCR-a pacijent dobiva dovoljno brzo. Dijagnoza infekcija traje najviše 4-6 sati. Zajedno s dekodiranjem, cijeli proces traje ne više od 1-2 dana;
  6. Jednom uzeto, DNA-materijal je dovoljan za držanje 5-6 uzoraka. Pacijent neće morati uzimati mrlje više puta;
  7. PCR i proučavanje infekcija ne prestaju, ovo područje se stalno razvija. Izrađuju se novi testni sustavi preosjetljivosti, a troškovi istraživanja se smanjuju. Ako je prije nego što je bio dostupan samo stanovnicima megaština, sada bez njega ne misli definiciju bolesti liječnika poliklinike poliklinike u regijama.

Značajke PCR metode:

  1. Točnost (pogreške su minimalne i njihova učestalost ne prelazi 0,01%);
  2. Osjetljivost (test "izračunava" pojedine bakterije u krvi i razmazima);
  3. Specifičnost (PCR identificira infekcije, često se ne manifestiraju do teškog stadija);
  4. Jedinstvenost (analize su učinkovite u situacijama u kojima druge studije ne otkrivaju ništa).

Rezultati PCR analize

Kako funkcionira lančana reakcija, kako se pripremiti za analizu?

Lančana reakcija u laboratoriju pretpostavlja višestruku množenje različitih dijelova DNA i RNA kako bi se pronašla vrlo slomljena veza. Pojačajte (udvostručene) kiseline uz pomoć enzimskih pripravaka. Pomoću enzima laboratorijski tehničar prima dovoljan broj kopija patogenog dijela DNA za usporedbu PCR s uzorcima raznih bolesti izazvanih infekcijom.

U pravilu se upotrebljavaju biološki materijali preuzetih ogradom ili premazom. Da bi se identificirale (dešifrirale veneralne infekcije), za PCR se uzima rezancija iz vagine, cerviksa ili uretre. Ponekad se također koristi urin.

Da bi potvrdili ili uskratili prisutnost hepatitisa, toksoplazmoze ili HIV-a, uzmite krv iz vena. Krv preuzet iz prsta često daje lažno negativne rezultate. Mononukleoza se dijagnosticira nakon prikupljanja materijala. Tuberkuloza se može identificirati nakon sputuma, koja se u jutro poprilično dodjeljuje bolesnicima.

Ispiranje iz vagine i cerviksa na PCR je jednostavna analiza koja se ne bi trebala bojati. Za 2-3 dana prije nego što je potrebno odustati od seksualnog života. Istodobno je zabranjeno koristiti gelove i sapun alkalnom bazom za osobnu higijenu. Može se isprati s uobičajenom toplom vodom ispod slavine. Posljednji pranje je večer prije jutarnjeg posjeta laboratoriju ili medicinskom uredu.

Liječenje drozdom uz pomoć kreme, masti, supozitorija ili sprejeva, ako se provodi, također je poželjno zaustaviti. Pojam se daje u prvih nekoliko dana nakon menstruacije ili neposredno nakon njega. Za preciznije rezultate, preporuča se da nećete posjetiti WC 2-3 sata prije nego što uzmete PCR test.

Kod muškaraca, odsječak iz uretre se uzima za lančanu reakciju. Biološki materijal se skuplja pomoću sterilne sonde ili pamučnog umetka umetnute u uretru. Tijekom postupka može doći do neznatnog neugode ili peckanja. Muškarci će također morati privremeno odustati od seksa i higijene. Tjedan dana prije analize ukida se liječenje antibioticima i drugim lijekovima. Ako je neugodnost nakon ograde sačuvana, preporučljivo je uskoro kontaktirati polikliniku.

Pretpostavimo da studija upotrebljava krv ili mrlju od pacijentovih spolova. Genetski materijal se stavlja u uređaj za pojačavanje za PCR, tamo se dodaju i enzimi. DNA se zagrijava do 90-95 ° C sve dok se lanac ne raspada u nekoliko veza. Taj se proces naziva denaturacija. Tijekom rada reaktora iz jednog uzorka DNK i RNA, stvara se tisuće rezultata analize (dekodiranje reakcije) rezultata kopija.

Rezultati PCR dijagnostike

Lančana reakcija pokazuje ne samo prisutnost infekcije, već i točan broj patogena. Razvoj posljednjih godina - umjetno uvođenje mutacijskih gena u ljudsku DNK kako bi se utvrdilo predispoziciju za promjenu genotipa.

Što otkriva dijagnoza PCR infekcije?

Tumačenje rezultata analize obično vidi odvojeno od strane liječnika. Mogućnosti lančane reakcije omogućuju potvrdu ili odbijanje prisutnosti sljedećih bolesti:

  1. Tuberkuloza.
  2. Helicobacter pylori infekcija, često uzrok bolova u trbuhu, bez ikakvog razloga.
  3. Candidiasis usne šupljine, vagine, respiratornog trakta i uretre.
  4. Listerioza (smrt zaštitnih stanica imunološkog sustava i uništavanje živčanog sustava).
  5. Označava borreliozu (uzrokovanu patogenim bakterijama, također nazvanim Lyme bolest). Da bi saznali prisutnost Lyme bolesti je moguće samo putem PCR.
  6. Tick-borne encefalitis (virusna oštećenja središnjeg živčanog sustava).
  7. Papilomavirus infekcija je uobičajena vrsta urološke infekcije, lako prenosi kroz nezaštićeni odnos. Izražena najčešće u obliku genitalnih bradavica ili bradavica na genitalijama. Opasno je da može utjecati na jednjaku, rektum i druge organe. Dešifriranje rezultata PCR omogućuje identificiranje virusa na embrionalnom stadiju, bez ikakvih vanjskih simptoma.
  8. Ureaplasmoza je bolest izazvana mikroorganizmima Ureaplasma urealyticum. Mnogo je godina sposobna živjeti u ljudskom tijelu, nikako se ne manifestira. To se pokazuje kada se uobičajena mikroflora smeta.
  9. Bakterijska vaginoza. Normalno, bakterije-gardnerelli žive u ženskom tijelu, a ne uzrokuju zdravstvene probleme. Prijem antibiotika, česta promjena seksualnih partnera, naglašava poremećaj ravnoteže vagine. Postoji disbakterija, zove gardnerellezom.
  10. Klamidija je neosporni prvak među spolno prenosivim spolovima. To je uzrokovano virusnim bakterijama - klamidijom. Oko 100 milijuna ljudi zaraženo je svake godine.
  11. Mikoplazmoza. Akutna bolest, koja se prenosi isključivo seksom dvaju partnera suprotnog spola. Češće, prije PCR testa, nestaje pod krinkom salpingitisa ili endometritisa.
  12. Trichomoniasis je suparnik klamidije u smislu "popularnosti". Može se liječiti, ako je napušten, zaraza dovodi do neplodnosti, patologija u trudnoći, prostatitis i cista.
  13. Herpetičke bolesti. Malo je vjerojatno da će se bolesna osoba sjetiti kakav je to lukav neprijatelj kad pati od angine ili konjuktivitisa. Različite vrste herpesa utječu na grlo, genitalije, sluznice oka i kože. Masquerades kao gnojan grlobolju, mangan, a zatim pod izobilnim suzama, dok se ne provede studija.
  14. Citomegalovirus. Bakterije, jednom pronađene u tijelu, nikada neće nestati. Oni prodiru u krv pacijenata s AIDS-om koji su podvrgnuti operaciji za transplantaciju jednog ili drugog organa koji uzima lijekove za suzbijanje imuniteta. Simptomi: produljena vrućica s visokom temperaturom, osip na koži, bol u mišićima. Svi oni su indikacije za PCR.
  15. Zarazna mononukleoza je Filatovova virusna bolest koja se očituje u osipa, žučnog mjehura i kože, bijelom prevlakom na jeziku.
  16. Virusni hepatitis A, B, C, G. Hepatitis se lako prenosi i teško je dijagnosticirati ako ne primjenjujete tehniku ​​ove analize. Dešifriranje rezultata PCR pomaže pri prepoznavanju problema izvan, dok zaraženi mogu osjećati da ima uobičajene probleme gripe, glavobolje, mučnine, jetre ili slezene;
  17. HIV infekcija je ozbiljna neizlječiva imunodeficijencija koja je prije otkrića PCR metode bilo nevjerojatno teško prepoznati. "Kuga XX. Stoljeća" ubrzano napreduje, ako se ne otkrije na vrijeme i ne započne terapiju lijekovima za održavanje.

Kao što je jasno s ovog popisa, PCR dijagnostika daje liječnicima mnogih usko usmjerenih specijalnosti neograničene mogućnosti. Metoda se može primijeniti u pulmonologiji, virologiji, infektivnim bolestima, onkologiji, gastroenterologiji, hematologiji, ginekologiji i urologiji.

PCR transkripta: rezultati

Analize lančane reakcije ocjenjuju samo liječnici pojedinačno za svaki pacijent, uzimajući u obzir postojeće patologije i kronične bolesti. Rezultati PCR analiza ukazuju, kako je gore spomenuto, kvantitativne karakteristike patogenih bakterija. Provjeravanjem s njima, liječnik će odrediti težinu i stupanj bolesti. Na temelju ovih pokazatelja, naknadno je propisana doza lijekova i trajanje tijeka primjene.

Negativan PCR rezultat znači da u prikupljenom biološkom materijalu nema virusa ili infekcija. Pozitivan PCR je alarmni signal. Dakle, infekcija se nalazi u krvi i drugim biološkim tekućinama pacijenta.

Ako su vrijednosti minimalne, to može značiti jednostavan nositelj bolesti, a ne samo aktivan razvoj bolesti. Jednostavan vektor infekcije, koji se nalazi samo u PCR-u, ali koji ne pokazuje nikakve druge simptome, treba stalno pratiti liječnik.

Važno je da ne paničete i ne zaboravite da je većina poznatih virusa osjetljiva na antibiotsko liječenje. Da bi ih odabrali i zamijenili jedni drugima nedjelotvornim, samo kvalificirani stručnjak koji ima iskustva u liječenju određene bolesti može.

Dekodiranje PCR može se provesti ne samo na zahtjev liječnika, već i na vlastitu volju. Često to čine žene koje planiraju trudnoću u bliskoj budućnosti kako bi bili sigurni da nema spolno prenosivih bolesti. Pri registraciji na konzultacije okruga s trudnicom, i dalje će biti potrebna ova vrsta dijagnoze.

Propisati PCR je obavezan za žene koje su imale nekoliko pobačaja ili pobačaja iz raznih razloga. Prije IVF-a provodi se analiza kako bi se eliminirali svi razlozi mogućeg odbacivanja fetusa.

Muškarci imaju tendenciju da provedu PCR nakon odmora, tijekom kojih je postojala romantika ili čak nekolicina. Dijagnoza im pomaže da ne ugroze svoj život i zdravlje potencijalnih seksualnih partnera.

Često PCR postaje jedina šansa za pacijenta da se riješi bolesti u početnoj fazi, kada je rizik od komplikacija i ozbiljni tečaj neznatan.

Kvalitativna analiza za hepatitis C

Ostavite odgovor

Kvalitativna analiza lančane reakcije polimeraze - PCR za hepatitis C određuje prisutnost ili odsutnost HCV u tijelu. U laboratoriju se proučava struktura RNA, u kojoj će se virus locirati. Ako se otkrije virus C, potrebno je podvrgnuti tijeku liječenja, budući da zanemareno stanje jetre ima ozbiljne posljedice. Kvalitativno PCR se provodi nakon oporavka kako bi se potvrdilo odsutnost protutijela. Imenovan i za preventivni pregled. Uz nisku koncentraciju patogena u krvi, PCR (kvalitativni) ne može otkriti ništa, jer dijagnostički sustav ima prag osjetljivosti. U slučaju početne faze bolesti ili blagog oblika, PCR se u konačnici dijagnosticira s ultrazvučnom opremom.

Što je RNA virus?

Pojam RNA virusa hepatitisa C (ili virusa hepatitisa C virusa RNA) naziva se sam jetrena bolest. Virus C se veže na zdravu ćeliju tijela, prodirući unutra. Tijekom vremena, širenje po cijelom tijelu, to je samo doći u krv. Kao rezultat, patogen prodire u jetru, osigurava svoje stanice i naporno radi. Jetrene stanice (hepatociti) rade pod njegovim utjecajem, podvrgavaju se promjenama i od toga propadaju. Što duže virus C bude u jetri, više stanica umre. Tijekom vremena nastaju opasne bolesti koje dovode do maligne degeneracije i smrti.

Infekcija jetre s tom vrstom virusa ne može se na bilo koji način manifestirati izvana. Dugi niz godina ili desetljeća zaražena osoba osjeća se sasvim zdravo, a samo slučajni pregled najčešće otkriva patologiju. Kada donosi krv za hepatitis, ispituje se dio lanca RNA (ribonukleinske kiseline) koji je dio ljudskog gena (DNA). Rezultati laboratorijskih istraživanja ne bi trebali biti korišteni za samo-liječenje, jer to je samo indikator. Liječnik će odrediti točnu sliku i daljnju dijagnozu.

Kada završite: svjedočanstvo studije

Za potvrdu HCV je dodijeljena PCR analiza (lančana reakcija polimeraze). PCR studije pomažu pronaći patogeni materijal u strukturi RNA i propisati učinkovitu terapiju. Imenovan u sljedećim slučajevima:

  • identifikacija znakova upale jetre;
  • probira za prevenciju;
  • ispitivanje osoba u kontaktu;
  • dijagnoza hepatitisa mješovitog porijekla (definicija glavnog uzročnika);
  • Određivanje razine aktivnosti reprodukcije virusa u kroničnom obliku;
  • ciroza jetre;
  • kako bi se odredila učinkovitost propisane terapije.
PCR studije određuje liječnik kako bi se utvrdilo učinkovitost tijeka liječenja hepatitisa.

Postoji kvalitativna i kvantitativna analiza PCR-a. Kvantitativno PCR pokazuje postotak RNA s nosačima virusa u krvi, a kvalitativno PCR upućuje na virusnu prisutnost ili odsutnost. Pozitivan pokazatelj kvalitete (prisutnost hepatitis C RNA) također zahtijeva kvantitativno istraživanje. Visoka razina koncentracije patogena hepatitisa C povezana je s rizikom prijenosa, tj. Kontaminacije drugih. Niska količina se bolje liječi. Količina RNA virusa u krvi nije povezana s intenzitetom bolesti. PCR analiza se također obavlja u slučaju interferonske terapije, kako bi se propisala trajanje i složenost liječenja.

Značajke kvalitativne PCR analize za hepatitis C

Imenuje kvalitativnu analizu s indeksom lančane reakcije polimeraze, svi pacijenti koji su imali antitijela u krvi za hepatitis C koji je bio bolestan i oporavio, treba ponovo uzeti test. Preporučljivo je da se testira na hepatitis B, a zatim, u slučaju pozitivnog zaključka, i hepatitis D. i kvalitativno analizirani reakatsiya treba provoditi u suradnji s drugim krvnim testovima. Analize će pokazati kompletnu sliku širenja virusa.

Iz rezultata ispitivanja vidjet će se samo pozitivan test za hepatitis C ili negativan, tj. Prisutnost ili odsutnost virusa. Ako se zaključak "detektira", virus je i nastavlja djelovati aktivno. Oznaka "nije pronađena" ukazuje na odsutnost virusa ili malu količinu virusa. Uz ovaj pokazatelj treba uzeti u obzir činjenicu da je analitička osjetljivost dijagnostičkih sustava različita, a RNA hepatitis C još uvijek može biti u krvi, ali se ne očituje u analizi.

Posebno osjetljiva metoda PCR ultra-hepatitisa C otkriva čak iu manjoj količini. Koristi se hibridizacijsko-fluorescentna studija koja je mnogo puta veća od standardnih PCR sustava. Metoda se koristi u nekoliko slučajeva:

  • sumnja na skrivene oblike hepatitisa C;
  • Pacijent nije potvrdio dijagnozu PCR, ali postoje antitijela;
  • u slučaju oporavka;
  • identificirati ranu fazu infekcije.
Povratak na sadržaj

Objašnjenje analize

Konačnu odluku u dijagnozi utječe PCR dekodiranje HCV-a, posebice, s ultrametodom. Glavni nedostatak ovog istraživanja je strog pridržavanje sterilnih uvjeta za uzorak i materijale. Malo odstupanje ponekad pokazuje netočne zaključke analitičara, komplicira dijagnozu i naknadnu terapiju. Analiza PCR-a za određivanje RNA virusa hepatitisa ne pokazuje uvijek sliku bolesti s povjerenjem, a ponekad se priznaju netočnosti, oba načina.

Dijagnosticiranje virusa hepatitisa preporuča se primjenjivanje sveobuhvatnog pregleda.

Norma indikatora

Odsutnost JgM antitijela na RNA u virusnom hepatitisu C smatra se normom u analizi lančane reakcije polimeraze. Istodobno, nalaz serološke analize ukazuje na prisutnost antitijela na virus C i to je također unutar granica norme. Kvalitativna definicija ne pokazuje intenzitet bolesti, samo otkriva uzročnik hepatitisa C u RNA. Takva analiza se ponavlja nakon tretmana kako bi se potvrdio stvarni oporavak.

odstupanja

Ako su JgM antitijela na HCV RNA prisutna, to ukazuje na razvoj infekcije. Bolest je akutna ili kronična, manifestira se u različitim fazama. Ako se bilježi smanjenje broja antitijela, analiza će pokazati postizanje rezultata liječenja tijekom oporavka. Postoje vrlo rijetki slučajevi lažnih pozitivnih nalaza u dijagnozi. Nalaze se kod žena tijekom trudnoće i kod osoba s drugim zaraznim bolestima.

Medinfo.club

Portal o jetri

PCR analiza za HCV, tipovi: negativni, pozitivni i transkripcijski

PCR (lančana reakcija polimeraze) za hepatitis C - određuje uzrok nastanka RNA virusa u ljudskom tijelu.

Što je PCR i RNA test krvi?

Način na koji je virus dijagnosticiran - PCR, ili čak nazvan RNA analiza - vrlo je mlad, do sada je već desetljećima. No, unatoč takvom kratkom vremenu, uspio se dokazati s pozitivne strane. Rezultat PCR analize za hepatitis C je nekoliko tipova: negativan i pozitivan. Negativno - pokazuje nedostatak virusa u krvi, a pozitivan - ukazuje na prisutnost u krvi RNA hepatitisa C.

Krv za ovu studiju predana je iz vena i na prazan želudac, po mogućnosti između 08:00 i 11:00. Iskušava ga visoko-osjetljiv način "Real-tima PCR" - 14 IU / ml, što omogućuje precizniji rezultat.

Vrste PCR testova i njihovih troškova

Dijagnoza hepatitisa C (PCR) podijeljena je u tri vrste:

  • kvalitativno - radno vrijeme RNA sheme (lančana reakcija).
  • kvantitativno - utvrđivanje opterećenja virusa na ljudskom tijelu.
  • genotipizirana - definicija vrste virusa.

kvantitativan

Kvantitativno - odraz razine koncentracije infekcije RNA u krvi pacijenta Najčešće, liječnici ga prije terapeutskog liječenja propisuju kako bi saznali cijelu sliku bolesti. Najviše je informativan za liječnike 12. tjedan bolesti. Na njemu možete odrediti je li liječenje učinkovito ili postoji li bolest ili ne.

Rezultati se interpretiraju kod liječnika. Indeksi počinju se odrediti na 8x5 IU / ml - dok se u tijelu bilježe ne manje od 3x6 kopija po 1 mm krvi.

Postoje slučajevi kada laboratorij ne može izračunati RNA, a rezultat je napisan: "ispod mjernog raspona".

Trošak studije varira od 350 do 5.000 rubalja. Cijena izravno ovisi o reagensima koji se koriste u studiji.

Važno je napomenuti da je izravna veza koncentracije infekcije u krvi (HCV RNA) s stupnjem bolesti tamo.

Ova metoda pomaže uspostaviti:

  • učinkovitost odabranog tretmana i njegovu jednoj ili drugoj metodi,
  • duljina bolesti, dijagnoze i prognoze za liječenje i daljnji život,
  • stupanj opasnosti u kojem je pacijent nositelj bolesti, na primjer, s PA (seksualni odnos).

Postoje slučajevi kada pacijent ima visok stupanj infektivnog opterećenja, ali istodobno nema stanice vitalnog organa.

kvaliteta

Kvalitativna analiza je rezultat proučavanja lančane reakcije polimeraze ove bolesti. Standardne vrijednosti virusnih oznaka kreću se od 10 do 500 IU / ml. Ako je nakon prolaska studije zabilježeno negativno virusno opterećenje, postotak infekcije u krvi pacijenta je niži od normalne. Ako ste primili rezultat "nije pronađen", onda nakon 10 dana ponovite ispit, jer svaka osoba može imati prag osjetljivosti. Važno je provoditi istraživanja u istom laboratoriju. Budući da to također ovisi o rezultatu.

Ako ste ugovorili hepatitis C, tada će ova analiza pokazati "otkrivena" već 4-6 dana nakon infekcije. No, za provođenje kvantitativne analize - to je prerano jer može postojati lažno negativan rezultat.

genotipizacija

Analize omogućuju prilično rano otkrivanje vrste genotipa infekcije u krvi pacijenta. U medicinskoj praksi identificirano je 11 genotipova. PCR je također pomaže liječnik utvrditi stabilnost i čvrstinu virusa metodama liječenja, odnosno odrediti oblik mutacije bolesti. Sve je to potrebno kako bi se osiguralo da liječnik može propisati pravo liječenje, kao jedan genotip zahtijeva 48 dana tretmana, i drugi - ukupno 20 dana. Postoje slučajevi u kojima je laboratorij ne može odrediti vrstu bolesti, i pisati „ne tipiruyut”, koja je, u čovjeku postoji virus koji se ne podudaraju s prisutan u laboratorijskim vrste hepatitisa C. U tom slučaju je bolje da se ponovno uzeti analiza u drugom laboratoriju s više osjetljive opreme.

prijepis

Da biste dešifrirali rezultate studija, bolje je kontaktirati svog liječnika, budući da znanje o pokazateljima normi u ovom slučaju nije dovoljno. Na primjer: riječi "PCR analiza hepatitisa C nije otkrivena" ili "pronađena / detektirana" možemo razumjeti, ali u kojoj mjeri je bolest i kakva vrsta hepatitisa C, nažalost, ne.

Također, rezultat se može napisati na sljedeći način:

  • naziv testa koji se provodi, najčešće piše: "Real-time".
  • raspon koji uspostavlja prisutnost bolesti,
  • genotip ove bolesti je 1, 2..., koji se može označiti slovom, na primjer genotip 3a.
  • količinu RNK prisutnih u krvi, na primjer 831,6 IU / ml.

Liječnici uvijek posvećuju posebnu pozornost na točku utvrđivanja virusnog opterećenja bolesti. Budući da ovaj pokazatelj predviđa budućnost i pomaže u određivanju metode liječenja.

Negativno PCR s pozitivnom ELISA

Ponekad pacijenti postavljaju pitanje: "Imam li hepatitis C antitijela i PCR negativan? Zašto je tako? "To je zbog činjenice da je analiza provedena slabo ili zbog nepoštivanja određenih pravila: na primjer, korištenje ove metode uoči dijagnoze lijekova.

Pojavljuje se, ali rijetko, kada pacijent dobije pogrešan rezultat. To je zbog neusklađenosti nekih pravila s pacijentom ili laboratorijem. Također se događa i takve kada je analiza na PTSR negativna i IFA pozitivna. To ukazuje da HCV nije pronađen u pacijentovoj krvi, ali prije toga je virus bio u akutnom obliku u tijelu. Ali to se događa još rjeđe. Osobito kada se tumače rezultati, liječnici su vođeni pomoću PCR pokazatelja.

Indikacije za analizu i gdje ih treba učiniti

Ako imate sumnju o prisutnosti u tijelu bolesti „hepatitis C” - check out naš članak o tome kako infekcije s hepatitisom C. Ako želite provjeriti činjenicu prisutnosti infekcije, ili provjeriti djelotvornost u liječenju ove bolesti, neophodno je provesti kvalitativnu i kvantitativnu analizu. Zahvaljujući njima, liječnici mogu točno odrediti ispravnost njihovih akcija usmjerenih na oporavak pacijenta.

Analiza za PCR može se obaviti u bilo kojem laboratoriju besplatno i plaćeno. Ono što je najvažnije, ako ona postaje potrebno proći drugi studij koji nemaju veze s lažno negativne rezultate, najbolje je da se testira u istom laboratoriju, jer svaki postaviti svoje normativne granice, što može zbuniti liječnika. To zauzvrat može dovesti do imenovanja netočne metode liječenja i povećanja vremena oporavka.

PCR dijagnostika: na temelju što je biomaterijalna i priprema temelji, kako oni rade, za koje bolesti je pogodan?

PCR (lančana reakcija polimeraze) - Napredak u molekularnoj biologiji, jedan od glavnih metoda laboratorijske dijagnostike s kraja 20. i početkom 21-og stoljeća, donosi ogromne prednosti u različitim područjima medicinske znanosti.

Mnogi ljudi to zbunjuju s ELISA (enzim imunoanalizom), što je, općenito, razumljivo. Oni su na neki način nešto slični, jer obavljaju jedan zadatak - traženje uzroka patoloških stanja uzrokovanih prodorima infektivnih sredstava u ljudsko tijelo. Međutim, postoje razlike među njima. Na primjer, ELISA traži tragove boravka mikroorganizama, tj. Protutijela (AT) i PCR pronalazi "svetište svetinja" patogena - DNA ili RNA (nukleinske kiseline), dajući život strancu mikroskopskim bićima ljudskog tijela.

Nukleinske kiseline "neprijatelja", koje se nalaze u svim biološkim tekućinama i tjelesnim tkivima, dostupne su PCR metodama, Ova analiza ne obvezuje vas da koristite samo vensku krv kao test, možete uzeti slinu, iscjedak iz genitalnog trakta, ispljuvak ili drugu okolinu, koji nose informacije o bolesti. Izbor materijala za istraživanje ostaje kod liječnika koji propisuje tu ili tu patologiju i zna koji je medij informativniji u takvim slučajevima.

Koja je bit lančane reakcije polimeraze?

PCR-studija je postignuće i veliko postignuće molekularne biologije. To je - metoda koja, pronalaženje microportions DNA ili RNA stranog genetskog materijala (genoma), je u stanju prepoznati individualne karakteristike koje su jedinstvene na jednu mikroorganizama umu da ne brkati s bilo koje druge. Kako radi PCR metode, te kako uspijeva rekonstruirati ponašanje zaraznih stanica u živom organizmu?

PCR proces

Dakle, pronađen je fragment nukleinske kiseline, ali to je jedan, a za reakciju očito nije dovoljno pa je kodiran (kopiran). Međutim, za daljnji proces potreban je velik broj takvih mikro-regija, koji mogu osigurati njegovu umnožavanje popunjavanjem novih DNA segmenata (replikacije) koji su identični pronađenom fragmentu. Reprodukcija je prirodno i integralno svojstvo nukleinske kiseline koja će se replicirati s enzim polimeraze čak i izvan živog organizma (u probnoj epruveti s kvarom), stvarajući puno klonova, to jest, ići će lančana reakcija. Klonovi će biti sve više novih fragmenata, ali samo oni u kojima je istraživač zainteresiran. Zato važno je uzeti "čisto", bez analize stranih tvari, i test da se provede vrlo pažljivo.

S obzirom na navedene sposobnosti lančane reakcije polimeraze, možete pogoditi zašto tako lako razlikuje ureaplazmu od mikoplazme, ili svaki od njih od klamidije.

Dakle, čak i ako su milijuni ljudskih tjelesnih stanica gubi se ne živi virus nego samo malo njegovog DNK, PCR, ako ništa da spriječi, možda, da se nosi sa zadatkom i izvješće o prisutnosti „vani” pozitivan rezultat. Ovo je bit PCR-a i njegove glavne prednosti.

Prednosti i nedostaci

Laboratorij koji obavlja PCR dijagnostiku ima najviše zahtjeve u pogledu opreme, ispitnih sustava i kvalifikacije medicinskog osoblja. Ovo je high-tech laboratorij koji ima arsenal visoko osjetljivih i visoko specifičnih reagensa, pa nema posebnih nedostataka. Osim ako ne daje pozitivan rezultat u odsutnosti kliničkih manifestacija i time stavlja kliniku ispred dileme: je li vrijedno početi s liječenjem ili ne?

Liječnik koji gleda pacijenta počinje sumnjati u pouzdanost rezultata ispitivanja, jer ne vidi nikakve znakove bolesti. Ali ipak, s obzirom na visoku osjetljivost PCR sustava, treba zapamtiti da otkriva patogena čak iu predkliničkoj fazi, a pozitivan rezultat u ovom slučaju više je prednost nego nedostatak. Polazeći od toga, liječnik koji odlazi na liječenje mora sam odlučiti o prikladnosti terapije, uzimajući u obzir druge argumente "za" i "protiv".

Prednosti dijagnostike primjenom lančane reakcije polimeraze su očite:

  • Visoka specifičnost, dostižući 100%, zbog prisutnosti u odabranom uzorku čestica nukleinskih kiselina inherentnih u određenom organizmu, ali izvanzemaljac ljudima;
  • Visoke performanse, jer PCR je automatizirana tehnika visoke tehnologije koja omogućuje testiranje na dan kada se materijal uzima i time pacijent dobiva osloboditi od nepotrebnih briga;
  • PCR, radeći na jednom uzorku, može provesti nekoliko studija iotkriti nekoliko patogena, ako će imati takav zadatak. Na primjer, kod dijagnoze klamidijske infekcije, gdje se PCR odnosi na glavne metode, uz klamidiju, moguće je otkriti neisseriju (gonokokus), uzročnik gonoreje. Štoviše, pouzdanost rezultata se ne odražava negativno;
  • Testiranje PCR-aopasni su mikroorganizmi u razdoblju inkubacije, kada još nisu uspjeli uzrokovati ozbiljnu štetu tijelu, to jest, rana dijagnoza upozorava na budući razvoj patološkog procesa, što omogućava pripremu i potpunu pripremu.

Osim toga, kako bi se izbjegli nesporazumi koji se ponekad pojavljuju tijekom dijagnoze, PCR se također štiti činjenicom da se njezini rezultati mogu popraviti (fotografija, računalo) u svrhu njihova korištenja u stručne svrhe, ako je potrebno.

Norma u odgovorima PCR-a je negativna, što ukazuje na nedostatak fragmenata stranih nukleinskih kiselina, pozitivan odgovor ukazuje na prisutnost infekcije u tijelu, numeričke vrijednosti znače stanje virusa i njegovu koncentraciju u vrijeme ispitivanja. Međutim, potpuni prijepis analize obavlja liječnik koji je prošao poseban studij na temu "PCR". Pokušavate sami tumačiti rezultate nema smisla, jer je moguće da će se najvjerojatnije dogoditi, pogrešno shvatiti i početi brinuti unaprijed.

Što se "boji" PCR-a, što zna i kako se pripremiti za to?

Kao iu drugim istraživanjima, ponekad rezultati ispitivanja su lažno pozitivni ili lažno negativni, gdje PCR nije iznimka. To se može dogoditi u sljedećim slučajevima:

  1. Poremećaj procesa u jednoj od faza reakcije;
  2. Nepoštivanje propisa o sakupljanju, skladištenju ili transportu materijala;
  3. Prisutnost stranih nečistoća u materijalu.

To sugerira da bi se PCR dijagnosticiranje infekcija trebalo pažljivo, pažljivo i pažljivo pristupiti, jer u suprotnom uzorci materijala mogu promijeniti strukturu strukture ili čak propasti.

Faze PCR dijagnostike. Lažni rezultati mogu dati kršenja u bilo kojoj fazi studije

PCR dijagnostika infekcija pripada kategoriji "zlatnih standarda" među drugim laboratorijskim metodama, pa se može koristiti za traženje patogena mnogih bolesti koje na prvi pogled nemaju međusobno zajedničko:

  • Tuberkuloza različitih lokalizacija, upala pluća (uključujući atipičnu, uzrokovanu klamidijom);
  • Dječje infekcije (ospice, rubeola, parotitis, ospice);
  • difterije;
  • salmoneloze;
  • Zoonotska zarazna bolest - listerioza (bolest se odlikuje nizom simptoma s uključivanjem limfnih čvorova, središnjeg živčanog sustava, unutarnjih organa);
  • Bolesti uzrokovane prodorom Epstein-Barr virusa (infektivna mononukleoza, itd.);
  • Onkološka patologija izazvana papilomovirusnom infekcijom (HPV i njezini tipovi);
  • Borrelioza (Lymeova bolest, krvariti-encefalitis);
  • Helicobacter pylori infekcija uzrokovana Helicobacter pylori mikrobiološkim životom u ljudskom želucu. Dokazano je da Helicobacter izaziva razvoj raka želuca ili duodenuma;
  • Candidiasis i gotovo sve spolno prenosive bolesti.

PCR dijagnostika infekcije, spolno prenosivih bolesti, od posebnog je značaja, budući da su bolesti uzrokovane time, često za dugo vremena provodi bez VRSTE kliničkih manifestacija, ali za vrijeme trudnoće postaju aktivni, i na taj način ugroziti zdravlje, pa čak i život djeteta. Slično se ponašaju i TORCH-infekcije. Neki od njih ("baklja") istovremeno se odnose na STI, tako da potonji zahtijevaju detaljnije razmatranje. Čitatelj će se moći upoznati s najpopularnijim metodama u sljedećim odjeljcima članka.

Kako pravilno pripremiti za dobivanje pouzdanog rezultata?

Odjednom ćemo primijetiti da je priprema za PTSR dovoljno jednostavna, bilo kakve posebne napore bolesnika koji ne zahtijevaju. Potrebno je samo tri jednostavna zadatka:

  1. Nemojte imati seksualni odnos 24 sata prije uzimanja testa;
  2. Za prikupljanje i analizu krvi iz vene, morate doći do praznog želuca i, usput, ne možete piti;
  3. Prenošenje urina slijedi noć (ujutro - u sterilnom staklenku, kupljeno dan prije u ljekarnama).

PCR može raditi u bilo kojem biološkom okruženju

PCR metoda nije "krvožedna", tako da prihvaća bilo koji biološki medij koji sadrži pretpostavljeni zarazni agens. izbor - ono što trebate poduzeti za istraživanje, ostaje za liječnika.

Dakle, u potrazi za agensom koji nije test krvi (iako se također uklapa i u većini slučajeva uzima paralelno s drugim materijalom), možete koristiti:

  • Smear (izlučivanje urogenitalnog trakta);
  • Soskob sluznice membrane usne šupljine, konjunktive, nazofarinksa, genitalnog trakta (kod žena koje su uzete iz cerviksa i vagine, kod muškaraca - od uretre);
  • slina;
  • sperma;
  • Sok od prostate;
  • Placente tkiva i amnionska tekućina (amnionska tekućina);
  • Sediment urina (nakon centrifugiranja), na primjer, kako bi se identificirali određeni STI i mikobakterije tuberkuloze;
  • Sputum i pleuralna tekućina za istu svrhu;
  • eksudati;
  • Cerebrospinalna tekućina kada se sumnja na zaraznu bolest CNS-a;
  • Biopsija (biopsija), uzeta iz jetre, 12 duodenuma, želuca, itd.

Za gore želim dodati da je materijal za testiranje u svim slučajevima, čak i na ogrebotine i emisije će biti dovoljno, jer je testiranje pomoću PCR velikim količinama ne zahtijeva analizu nedostaje i nekoliko ul, koji se obično poduzimaju u mikro-tipa „Eppendorf” i poslan na studija.

Bolesti i uporaba PCR-a

Lančanu reakciju HIV i polimerazu

Obično, kada se obavlja anonimno ispitivanje u slučaju pozitivnih imunoblotnih rezultata, dijagnoza HIV infekcije ponavlja se ponovo. Ako je dijagnoza potvrđena, pacijentu dodjeljuju dodatne studije:

  1. Određivanje pomoću imunoloških reakcija apsolutnih vrijednosti broja CD limfocita4 (imunokompetentne stanice - T-pomoćnici ili pomoćnici) koji inficiraju infekciju na prvom mjestu, nakon čega gube osnovna svojstva i ne mogu razlikovati "vlastiti" i drugo ". Kruženje u plazmi RNA virusa virusa se uzimaju za normalne stanice tijela i ne reagiraju na njih;
  2. Detekcija virusne RNA pomoću PCR metode i izračunavanje koncentracije virusnih čestica kako bi se ustanovio stadij, težina patološkog procesa i prognozu uzimajući u obzir ove podatke. Naravno, riječ "norma" u ovom planu ne postoji, budući da je reakcija uvijek pozitivna, a tumačenje digitalnih vrijednosti je u nadležnosti liječnika.

PCR i hepatitis

Metoda PCR može identificirati patogene hepatitisa, najčešće test koristi se za dijagnosticiranje C hepatitisa, što je slabo definirano drugim metodama.

Virus hepatitisa C (koji sadrži RNA) podsjeća na HIV u ponašanju u ljudskom tijelu. Uklještenje u genom stanica jetre (hepatociti), ona ostaje tamo čeka u krilima, koja se može pojaviti čak i nakon 2 godine, najmanje 20 godina, tako da su liječnici ga je nazvao „nježan ubojica”. Hepatitis C dovodi do stvaranja malignih procesa u parenhimu jetre, koja se manifestira u kasnim fazama. Svi ti događaji imunološki sustav ne primjećuje, uzimajući virus za hepatocite. Istina, proizvedena su protutijela na virus u nekim količinama, ali ne daju pristojan imuni odgovor. Za dijagnozu ELISA hepatitis C nije vrlo informativan, jer ukazuje da je virus ostavio tragove, ali je li otišao - to je nepoznato. Kod HCV-a poznati su slučajevi samoizlječenja, dok protutijela protiv virusa ostaju i nastavljaju kružiti za život (imunološka memorija). PCR je znatno ispred formiranja protutijela i može detektirati virusnu česticu unutar 1-1.5 tjedana, dok se AT može pojaviti u intervalu od 2 mjeseca do 6 mjeseci

PCR dijagnoza u slučajevima sumnja binge virusom hepatitisa C u tijelu je najbolji način za ispitivanje, jer sama može prepoznati prisutnost „ponude neprijatelja” u krvi ili biopsije jetre pacijenta.

Međutim, ponekad postoje slučajevi kada su AT-ovi pozitivni i PCR rezultat je negativan. To se ponekad događa s vrlo niskom količinom virusa ili kada je "uspavan" u jetri, a da ne napušta krvotok. Da bi pronašli istinu, pacijent je ponovno analiziran, a ponekad i ne samo.

Papilomovirusna infekcija

HPV (humani papiloma virus), osim ako je self-iscjeljivanje, može također, ne pokaže, dugo ustrajati u domaćinu, koji ni ne znaju o tome, jer nije bilo moguće napraviti PCR, a simptomi su nestali. Međutim, prisutnost infekcije papillomovirusnoy, iako latentna, nije ravnodušan na ljudsko zdravlje, gdje posebne opasnosti su određene vrste virusa koji uzrokuju rak (tipovi 16, 18).

HPV često pati ženski polovicu stanovništva, kao što je virus voli ženski reproduktivni sustav, a osobito - vrata maternice, gdje su neki tipovi virusa doprinijeti razvoju displazije procesa, a zatim do raka vrata maternice ako se ne liječi displaziju i osloboditi virus. Dakle, lančana reakcija polimeraze za otkrivanje virusnog DNA, a zatim navesti „loš” ili „dobar” (onkogeni ili ne-onkogeni) Tip naselili u ženskom tijelu.

Ostale infekcije STI i TORCH

Očito, lančana reakcija polimeraze može pronaći bilo koju stranu strukturu koja se sastoji od nukleinskih kiselina, pa je ovaj test prikladan za otkrivanje svih spolno prenosivih bolesti i TORCH infekcija, međutim, ona se ne koristi uvijek. Zašto, recimo, provodite takve skupe studije za otkrivanje Trichomonas ili gonoreje, ako postoje više pristupačne i jeftine?

TORCH infekcije i STI su tako međusobno povezani da je, s vremena na vrijeme, teško odrediti koja se skupina pripisuje jednom ili drugom uzročniku. Oni općenito može biti teško za razumjeti, jer je prilično raznolika skupina mikroorganizama koji se mogu prenijeti spolno je uvijek ili samo pod određenim uvjetima (imunodeficijencija), a mogu biti od interesa samo za vrijeme trudnoće, zbog mogućeg negativnog utjecaja na tečaj i na fetus.

PCR je glavna metoda otkrivanja skrivenih infekcija

U središtu razvoja kliničkih manifestacija su različiti patogeni koji se mogu naći samo pomoću PCR-a, što je njegov glavni zadatak ponekad u kombinaciji s ELISA-om, a ponekad i kao jedini potvrdni test, naročito ako je odsutna simptomatologija bolesti. Takva teška situacija može stvoriti polimikrobnu infekciju koja, pored eksplicitnih patogena, također uključuje oportunističke patogene.

U ljudi koji pate od upalnih bolesti genitalnog područja, na primjer, uretritis, klamidija, ureaplazma i mikoplazma su često otkriveni. Te iste vrste također ugrožavaju žensko tijelo. Oni koji znaju izdajstvo od klamidije i suočen je, ne zaboravite se kako je teško pronaći i prepoznati, pa je analiza, proizveden PCR-om na klamidiju, posebno, pošto se skriva u ćeliji je vrlo mali u veličini parazita ponaša nježno i štetu nanesenu uvijek potajno.

Ureaplazma se često liječi zajedno s mikoplazmom. I nije slučajno. Ove vrste, poput klamidije, ne odnose se niti na viruse niti na bakterije, nego u stanice i pripadaju STI, iako njihova prisutnost u zdravom tijelu također nije neuobičajena. Dakle, kako bi se razlikovali zdravi nosioci bolesna osoba treba posebna tehnika u kojoj PCR se smatra najpouzdaniji, jer je, s obzirom na osobitosti strukture i ponašanja tih mikroorganizama, druge studije su neučinkoviti.

Što se tiče herpes virusa (tip 1, 2) i citomegalovirusa, koji također pripada herpesvirusu (tip 5), situacija ovdje je također nejasna. Infekcija svjetske populacije je blizu 100%, tako da je u ovom slučaju vrlo je važno prepoznati virus i njegove doze, što je posebno igra važnu ulogu u trudnoći, kao odrasla osoba, virus se ukorijenilo u njegovom tijelu, često ne uzrokuju nikakve probleme i znakove bolesti ne.

Dakle, ne treba zanemariti liječnički recept poput ankete, jer u nekim slučajevima, lančana reakcija polimeraze je potrebno i neophodno metoda laboratorijske dijagnostike koji se štite od ozbiljnih komplikacija, ne samo žena, već i mladi, nerođenog, čovjeka.

Zaključno, želim napomenuti da takva prekrasna metoda kao PCR služi čovječanstvu više od 30 godina. Istovremeno, zadaci testa nisu ograničeni na traženje infektivnih sredstava. Lančana reakcija polimeraze, rođena na osnovi molekularne biologije, neraskidivo je povezana s genetikom uspješno se koristi u kriminologiji za identifikaciju identiteta, u forenzičnoj medicini za osnivanje očinstva, u veterinarskoj medicini, ako životinjska bolnica ima priliku kupiti skupu opremu, kao i na drugim područjima (industrija, poljoprivreda itd.).


Vezani Članci Hepatitis